第四章-藥物的雜質(zhì)檢查

第四章藥物的雜質(zhì)檢查主要內(nèi)容概述（雜質(zhì)定義、來(lái)源、種類、限量檢查）一般雜質(zhì)檢查方法特殊雜質(zhì)檢查方法

第一節(jié)概述

雜質(zhì)的定義雜質(zhì)的來(lái)源雜質(zhì)的種類雜質(zhì)檢查的意義雜質(zhì)限量一、雜質(zhì)的定義雜質(zhì)（forin、impurities）是指：1.藥物中存在的無(wú)治療作用2.或影響藥物的穩(wěn)定性和療效3.甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。

二、藥物中雜質(zhì)的來(lái)源（2）試劑、溶劑、催化劑類1、生產(chǎn)過(guò)程中引入：（1）原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成（2）合成過(guò)程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成（3）需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成（4）所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)2貯藏過(guò)程中引入

(1)保管不善或貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(2)包裝不當(dāng)

三、雜質(zhì)的分類

藥物中的雜質(zhì)按來(lái)源分為：一般雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)取Ｒ话汶s質(zhì)其檢查方法收載在中國(guó)藥典的附錄中。特殊雜質(zhì)：指某一個(gè)或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過(guò)程中引入的雜質(zhì)，如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的其他甾體。特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國(guó)藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。三、雜質(zhì)的分類藥物中的雜質(zhì)按結(jié)構(gòu)分為：無(wú)機(jī)雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬等。有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物，異構(gòu)體和殘留溶劑。三、雜質(zhì)的分類藥物中的雜質(zhì)按性質(zhì)分為：信號(hào)雜質(zhì)：本身一般無(wú)害，但其含量的多少可反映出藥物的純度水平，如含量過(guò)高，表明藥物的純度差。如氯化物、硫酸鹽等。有害雜質(zhì)：如砷鹽、重金屬、氰化物對(duì)休體有害，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要嚴(yán)格控制。試題舉例中國(guó)藥典（2010年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項(xiàng)目是A.硫酸鹽檢查B.氯化物檢查C.溶出度檢查D.重金屬檢查E.砷鹽檢查四、雜質(zhì)檢查的意義（一）雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，因此藥品純度主要由藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的檢查相下的雜質(zhì)檢查來(lái)控制，包括雜質(zhì)名稱、檢查方法、允許限量。純度控制又稱雜質(zhì)限量控制。（二）嚴(yán)格按照《中國(guó)藥典》規(guī)定的雜質(zhì)檢查項(xiàng)目進(jìn)行檢查，凡《中國(guó)藥典》未規(guī)定檢查的雜質(zhì)，一般不需要檢查。（三）化學(xué)試劑不考慮生理毒副作用，不能用化學(xué)制劑規(guī)格代替藥用規(guī)格。藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較1、等級(jí)劃分不同：藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級(jí)：合格或不合格?；瘜W(xué)試劑有很多等級(jí)，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較2、要求不同：藥物純度主要從用藥安全、有效及穩(wěn)定性角度考慮；化學(xué)試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用產(chǎn)生的影響，以及根據(jù)使用范圍和使用目的來(lái)加以規(guī)定。

五、雜質(zhì)限量指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示限量檢查法：不檢查藥物的絕對(duì)含量，而檢查其是否超過(guò)限量。雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格雜質(zhì)的限量檢查在不影響療效和不發(fā)生毒副作用的原則下，既保證藥物質(zhì)量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對(duì)于藥物中可能存在的雜質(zhì)，允許有一定限度。五、雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量檢查方法：1、對(duì)照法：取限量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品溶液與一定量供試品溶液在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)規(guī)定。例：氯化物檢查；硫酸鹽；鐵鹽；重金屬；砷鹽檢查等。平行原則使用對(duì)照法檢查藥物的雜質(zhì)，必須遵循平行原則：供試液和對(duì)照液應(yīng)在完全相同的條件下反應(yīng)，如加入的試劑、反應(yīng)的溫度、放置的時(shí)間等均應(yīng)相同。五、雜質(zhì)限量2、靈敏度法：在規(guī)定量的供試品溶液中加入試劑，在一定條件下反應(yīng)，觀察有無(wú)正反應(yīng)出現(xiàn)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格。即以該檢測(cè)條件下反應(yīng)的靈敏度來(lái)控制雜技限量（不需對(duì)照品）。例：純化水中的氯化物檢查：在50mL純化水中加入硝酸5滴及硝酸銀試液1mL，不發(fā)生渾濁為合格。五、雜質(zhì)限量3、比較法：取一定量供試品，在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)結(jié)果（吸光度、旋光度）與規(guī)定數(shù)據(jù)（限量）比較，判斷供試品中雜質(zhì)限量。（不需對(duì)照品）。例：鹽酸去氧腎上腺素中酮體的檢查：取本品，加水制成1mL中含2.0mg的溶液，以水為空白，在310nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得大于0.02。雜質(zhì)限量的計(jì)算

允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量＝供試品量

試題舉例檢查某藥物中的砷鹽，取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml（每1ml相當(dāng)于1

g的As）制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，砷鹽限量為0.0001％，應(yīng)取供試品的量為A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10g

已知：c＝1

g/ml＝1×10

6g/mlV＝2ml

L＝0.0001%試題檢查維生素C中的重金屬時(shí)，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十，問(wèn)應(yīng)吸取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD.1mlE.20ml第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)：廣泛分布于藥物中的雜質(zhì)。如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)取Ｖ亟饘?、砷鹽二、重金屬檢查法重金屬：在實(shí)驗(yàn)條件下能與顯色劑如S2-作用顯色的金屬。如銀、鉛、汞、銅等。鉛在多數(shù)藥物的生產(chǎn)中容易積累，在體內(nèi)會(huì)積蓄中毒，因此重金屬檢查時(shí)常以鉛為代表。中國(guó)藥典（2000年版）共收載四法：硫代乙酰氨法、熾灼殘?jiān)?、硫化鈉法、微孔濾膜法。1.第一法硫代乙酰胺法（1）、原理：對(duì)照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

（2）.測(cè)定條件用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10

g/ml，適宜比色范圍為2ml溶液中含10～20

g的Pb2+。本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5。顯色劑：從ChP（1990）開(kāi)始改用硫代乙酰胺做顯色劑。

（1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

A.外消色法：在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液。

B.內(nèi)消色法：

C.改用第四法，微孔濾膜過(guò)濾法（3）.干擾及排除（2）若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾。（3）若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成FeCl2，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中加KCN掩蔽，然后用第三法檢查。（4）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法檢查。

2.第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

（1）.原理對(duì)照法

（2）.測(cè)定條件及注意事項(xiàng)（1）堿性條件：NaOH（2）顯色劑：硫化鈉

注意事項(xiàng)：Na2S需新鮮配制

3.第二法熾灼殘?jiān)?/p>

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。500～600℃熾灼后的殘?jiān)?jīng)處理后，依一法檢查。

（1）.原理對(duì)照法（2）.操作方法（3）.注意事項(xiàng)含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。熾熱溫度影響檢查結(jié)果：溫度越高，重金屬損失越多。酸溶液使用后一定要采用適當(dāng)措施完全去掉，以免影響下一步操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4.第四法微孔濾膜法適用于重金屬限量低的藥物（含2～5

g重金屬雜質(zhì)）及有色供試液的檢查。原理：重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜，比較色斑的深淺。

裝置：過(guò)濾器（p36圖3-1）

USP（24）檢查重金屬時(shí)，使用硫代乙酰胺（特殊情況下也采用新制飽和硫化氫試液）顯色。檢查時(shí)，除用供試管、對(duì)照管，還規(guī)定用監(jiān)控管，三管同法檢查。

監(jiān)控管的設(shè)置是防止藥品中的重金屬以結(jié)合態(tài)存在而無(wú)法檢測(cè)。我國(guó)《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬時(shí)，應(yīng)用該法。例1：重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時(shí)溶液控制最佳的pH值是（）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.5例2：微孔濾膜法是用來(lái)檢查（）A.氯化物B.砷鹽C.重金屬D.硫化物E.氰化物例3.中國(guó)藥典(2000年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（）A.硫化氫試液B.硫代乙酰胺試液C.硫化鈉試液D.氰化鉀試液E.硫氰酸銨試液例4.葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時(shí)，適宜的條件是（）A.用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液B.用10ml稀硝酸酸化C.在pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中D.用硫化鈉為試液E.結(jié)果需在黑色背景下觀察例5.現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用《中國(guó)藥典》上收載的重金屬檢查的哪種方法（）A.一法B.二法C.三法D.四法E.以上都不對(duì)例6.下面哪些方法為《中國(guó)藥典》收載的重金屬檢查方法（）A.500～600℃熾灼殘?jiān)?按一法操作B.pH3～3.5條件下，加入硫化氫試液C.堿性下，加入硫化鈉試液D.按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過(guò)濾后觀察色斑E.以上都對(duì)三、砷鹽檢查法

（一）、古蔡法ChP（2000）、BP（1998），砷鹽的限量檢查（二）、Ag-DDC（二乙基二硫代氨基甲酸銀）法

ChP(2000)、USP（24），檢查、含量測(cè)定

遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較。1.古蔡法As（HgBr）3（黃色）AsH3+HgBr2

AsH（HgBr）2（棕色）As2Hg3（棕黑色）（2）.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑:用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備1

gAs/ml（2）如供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作。導(dǎo)氣管C裝有醋酸鉛棉花（約60~80mm高）旋塞D的頂端放有溴化汞試紙。3.測(cè)定條件

（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1

gAs/ml。（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。（3）反應(yīng)中加入酸性氯化亞錫及碘化鉀，其作用是：(4).鋅粒應(yīng)無(wú)砷(5).砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察A.還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；B.碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；D.可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100

gSb存在不干擾。

4.干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，加熱,使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+，如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。（4）本法適用于不含Sb或含Sb量小于100

g的供試品。（二）Ag-DDC法

1.原理：對(duì)照法

用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（24）用吡啶，ChP（2000）用三乙胺。

本法適用于含Sb量小于500

g的供試品。砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，進(jìn)行比較。（三）白田道夫法含銻藥物銻鹽被還原為SbH3與HgBr2試紙作用，產(chǎn)生灰色銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用Betterdorff法。例1：在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過(guò)百萬(wàn)分之十的是（）A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

例2：在用古蔡法檢查砷鹽時(shí)，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH3例3：古蔡氏法中，SnC12的作用有（）A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.組成鋅錫齊E.除去其它雜質(zhì)

例4：中國(guó)藥典（1995年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是（）A.與鋅、酸作用生成H2S氣體B.與鋅、酸作用生成AsH3氣體C.產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑D.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的面積大小E.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強(qiáng)度

例5、砷鹽檢查法方法的比較1、在連接砷化氫發(fā)生瓶的導(dǎo)管中裝入醋酸鉛棉花（）2、使用的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液為2m1（）3、測(cè)定結(jié)果要與標(biāo)準(zhǔn)砷斑相比較（）4、要測(cè)定吸收度（）5、要用酸堿滴定法（）

A.古蔡氏（Gutzeit）法B.二乙基二硫代氨基甲酸銀法C.A和B均可D.A和B均不可例6、用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時(shí)，排除干擾的方法：A.先用硝酸或溴水氧化B.先加酸性氯化亞銻還原C.改用白田道夫法D.先加氰化鉀掩蔽E.先加草酸生成沉淀1.硫化物（）2.亞硫酸鹽（）3.硫代硫酸鹽（）4.高鐵鹽（）5.銻鹽（）例7.ChP（2000）檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時(shí)，應(yīng)選用（B）A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法E.契列法例8.葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有（）A．Pb2+標(biāo)準(zhǔn)液B．SnCl2試液C．KI試液D．ZnE．醋酸鉛棉花例9.Ag-DDC法檢查砷鹽時(shí)，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為（）A．將As5+還原為As3+B．有利于AsH3生成反應(yīng)C．抑制SbH3的生成D．形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣E．催化加速生成AsH3例10.古蔡氏法檢查所用的溶液是()A.強(qiáng)堿性溶液B.強(qiáng)酸性溶液C.含稀鹽酸10ml溶液D.含稀硝酸10ml溶液E.含強(qiáng)氧化劑(硝酸或過(guò)硫酸銨)溶液例11、綜合練習(xí)1、藥物中鐵鹽檢查（）2、磺胺嘧啶中重金屬檢查（）3、藥物中硫酸鹽檢查（）4、葡萄糖中重金屬檢查（）5、藥物中氯化物檢查（）A.硝酸銀試液B.氯化鋇試液