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文檔簡介

動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)如何獲取大量的皮膚細(xì)胞?皮膚移植動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動物細(xì)胞培養(yǎng)第44頁概念

從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。原理:細(xì)胞增殖動物細(xì)胞培養(yǎng)1、動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)單個細(xì)胞用胰蛋白酶分散成單個細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么?用胃蛋白酶行嗎?為何選幼齡動物組織或器官進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?動物細(xì)胞培養(yǎng)過程:動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。(分解纖維蛋白)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程:動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。(分解纖維蛋白)

細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。

細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。

細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng):從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出,配制成細(xì)胞懸浮液,分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),稱為傳代培養(yǎng)。無菌操作培養(yǎng)箱培養(yǎng)器皿動物細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)表面為什么要光滑、無毒?2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1)、無菌、無毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)2)、營養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、動物血清、血漿等。)3)、溫度和PH

36.5+0.5度;PH為7.2-7.4。4)、氣體環(huán)境:

O2和CO2(95%空氣和5%CO2

)補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)(1)生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品:病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。(2)獲得大量自身的皮膚細(xì)胞,用于植皮。(3)用于檢測有毒物質(zhì)(4)用于生理、病理、藥理等方面的研究,為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體或組織培養(yǎng)結(jié)果獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目試一試

動物細(xì)胞特點(diǎn)?分化潛能變窄:隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制,分化潛能變窄,這是指整體細(xì)胞而言。細(xì)胞核仍具有全能性:細(xì)胞核,它含有保持物種遺傳性所需的全套基因,而且并沒有因細(xì)胞分化而丟失基因,因此高度分化細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性想一想

根據(jù)動物細(xì)胞核仍具有全能性的特點(diǎn),怎樣將動物細(xì)胞的全能性表達(dá)?

再想一想利用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)動物核移植:

將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。

用核移植的方法得到的動物。克隆動物:記一記二、、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1、體細(xì)胞核移植的過程多莉——細(xì)胞工程的一個里程碑!卵細(xì)胞母羊B母羊A乳腺細(xì)胞胚胎移植細(xì)胞核移植細(xì)胞質(zhì)融合后的卵細(xì)胞細(xì)胞核母羊C子宮早期胚胎多莉羊分娩卵裂妊娠多莉羊的培育過程問題1、多莉羊是雄還是雌?2、為什么要使用卵細(xì)胞?3、克隆羊多莉的成功證明了什么?卵細(xì)胞A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育過程融合后的卵細(xì)胞供體細(xì)胞(供核)細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞卵巢卵母細(xì)胞(MⅡ中期:供質(zhì))去核無核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳基礎(chǔ)相同的犢牛歸納:1.共分成兩大階段:核移植和胚胎移植2.取卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因是:它是最大的細(xì)胞,易操作,它發(fā)育可直接表達(dá)性狀同時其可為細(xì)胞核的全能性表達(dá)提供物質(zhì)基礎(chǔ)3.嚴(yán)格來說新個體有卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)所以有兩個親本的性狀核移植過程2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動物品種

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