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CentralLaboratoryofBiology實驗六微生物液體深層培養(yǎng)—發(fā)酵罐的使用微生物學(xué)實驗?zāi)康囊笈c基本原理【目的要求】1.了解微生物液體深層培養(yǎng)的方法和設(shè)備的使用?！净驹怼亢醚跷⑸锏纳L繁殖需充足的氧。為了進行大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)，微生物需進行液體深層培養(yǎng)，其氧的供給由空氣系統(tǒng)完成，“通風(fēng)攪拌”是最常用的方式。生產(chǎn)前，空氣過濾器至罐體以及其他與罐體相通的管道、培養(yǎng)基都需進行徹底地滅菌。然后，控制好微生物培養(yǎng)所需的溫度、風(fēng)量、攪拌速度并接種，方可正常生產(chǎn)?！緦嶒炗闷贰?.材料：玉米粉、豆餅粉2.試劑：K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H20、紅曲霉液體菌種3.儀器：小型通風(fēng)發(fā)酵罐【方法步驟】1.準備工作1）培養(yǎng)基的配制：玉米粉5%，豆餅粉2%，K2HPO4·3H2O0.5%，MgSO4·7H200.1%，pH自然。2）檢查本系統(tǒng)各單件設(shè)備，確保各設(shè)備能正常運行時方可開機。3）溫度、pH、轉(zhuǎn)速、消泡設(shè)定值的調(diào)節(jié)【方法步驟】2.空氣過濾及空氣管路的消毒1）慢慢打開蒸汽閥門，排盡冷凝水。2）蒸汽通過空氣過濾器進入發(fā)酵罐內(nèi)。3）消毒時間一般為30分鐘。4）吹干空氣過濾器需20分鐘左右。3.空消1）排盡夾套中的水。2）排盡蒸汽管中冷凝水，使蒸汽徐徐進入發(fā)酵罐。3）空消時間一般為30～50分鐘。排盡發(fā)酵罐內(nèi)的冷凝水。4.加培養(yǎng)基液1）將培養(yǎng)基原液加入發(fā)酵罐內(nèi)，并加水至所配培養(yǎng)液總量的75～85%左右。5.實消1）排盡夾套中的水。2）夾套預(yù)熱：調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速至150rpm左右，進行慢速攪拌。3）發(fā)酵罐內(nèi)溫度達到80℃左右時，排盡蒸汽管中冷凝水，使蒸汽徐徐進入發(fā)酵罐。4）當(dāng)培養(yǎng)液溫度達到95～100℃后方可停止攪拌。5）實消時間一般為30分鐘。自然冷卻10分鐘左右。6）通冷卻水進行冷卻。7）當(dāng)罐內(nèi)溫度降至70℃以下時，慢速攪動培養(yǎng)基?！痉椒ú襟E】6.接種1）當(dāng)發(fā)酵液溫度降到接種溫度時即可進行接種。2）準備合格的搖床菌種。3）在接種口四周圍上酒精棉。4）點燃酒精棉，擰下接種口螺母，并將其放入預(yù)先準備的盛有酒精的培養(yǎng)基中。5）將裝菌種

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