動物實驗基本技術(shù)課件

動物實驗根本技術(shù)

動物實驗根本技術(shù)實驗動物的抓取、保定1實驗動物的分組和編號2實驗動物的給藥與取血34實驗動物被毛去除5實驗動物的糞便采集56實驗動物的處死7實驗動物的麻醉一、實驗動物編號與分組

〔一〕編號：1、被毛涂染法：實驗動物：大鼠、小鼠。常用染色劑：3-5％苦味酸溶液，可染成黃色。2%硝酸銀溶液(咖啡色)0.5%中性品紅溶液(紅色)煤焦油的酒精溶液(黑色)

2、穿耳孔法

用專用耳空器在動物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定號碼的方法，原那么是：左耳代表十位，右耳代表個位。實驗動物：兔、犬、豬3、標(biāo)牌法一般掛在動物的頸部、耳朵、腳上實驗動物：犬、猴穿耳孔法

4、烙印法直接把標(biāo)記編號烙印在實驗動物身體上的方法。5、電子標(biāo)簽法用電子芯片標(biāo)記動物。實驗動物編號與分組

〔二〕分組：1、組別的要求：正常對照組模型組賦形劑〔或溶劑組〕陽性藥組藥物不同劑量組隨機(jī)區(qū)組分組步驟：1〕給小鼠編號〔在尾巴上寫數(shù)字〕2〕稱重3〕按體重重新編號4〕按區(qū)組分組在EXCEL中建立隨機(jī)數(shù)字表例如：3個實驗組，分3個區(qū)組，每個組5只動物。編號123456789101112131415隨機(jī)數(shù)字771028073235494011037除數(shù)3333333333余數(shù)2021221121組別231213231123213大鼠豚鼠家兔犬二、抓取、保定小鼠小鼠的捉持1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部將小鼠提起，放在飼養(yǎng)盒的籠蓋上。用左手拇指和食指迅速、準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后及頸背部的皮膚，將小鼠提起。翻轉(zhuǎn)左手掌，以左手掌心和中指夾小鼠背部的皮膚，使小鼠整個呈一條直線。用左手拇指和食指迅速、準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后及頸背部的皮膚，將小鼠提起。大鼠的捉持首先戴好防護(hù)手套用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部將大鼠提起，放在大鼠飼養(yǎng)盒的籠蓋上。

左手順勢按、卡在大鼠軀干背部，稍加壓力向頭頸部滑行。以左手拇指和食指捏住大鼠兩耳后部的頭頸皮膚，其余三指和手掌握住大鼠背部皮膚，完成抓取固定。豚鼠的捉持先用左手輕輕扣、按住豚鼠背部。順勢抓緊其肩胛上方皮膚，拇指和食指環(huán)箍其頸部。用右手輕輕托住其臀部，即可將豚鼠抓取固定。兔的捉持用右手抓住兔頸部的被毛和皮膚，輕輕把兔提起。用左手托住兔的臀部家兔的固定方式有腹臥式和仰臥式兩種

家兔的抓取、稱重、麻醉、固定犬的捉持實驗者先撫摩，逐步接近，勿使其驚恐或?qū)⑵浼づ?/p>

用粗棉繩兜住狗的下頜，并在上頜打結(jié)〔勿太緊〕。如犬不合作，那么先用一根特制長柄狗頭夾，從后面夾住犬頸，限制犬頭部活動，再按上述方法捆住犬嘴。三、動物被毛的去除

拔毛法：用拇指和食指拔去被毛的方法

剪毛法：用剪刀緊貼皮膚剪去被毛剃毛法：用剃毛刀剃去動物被毛。脫毛法：用化學(xué)藥品脫去動物被毛。四、實驗動物的給藥與取血灌胃給藥——大小鼠1、將灌胃針連接在注射器上，吸入一定量的藥液。左手捉持動物，使頭部向上。右手持針，把灌胃針頭的前端放進(jìn)動物的口腔，順著上腭部插入咽部，順咽后壁輕輕往下推。用右手食指將針?biāo)聣海瑢⒆⑸淦髦械乃幰汗嗳雱游锏奈钢?。劑量：小鼠約／10g體重。最大體積為1.0ml/只大鼠約1-2ml／100g體重，最大體積為5.0ml/只大鼠的灌胃灌胃給藥——兔將兔放進(jìn)固定架內(nèi)，灌胃者用左手拇指和中指擠壓兔兩頰，將下頜擠開使兔被動張口。

右手將開口器從一側(cè)口角插入口腔并固定。胃管經(jīng)開口器的孔插入，向前推進(jìn)約15cm，可達(dá)胃內(nèi)。在插管時應(yīng)將胃管另一端泡在水中確認(rèn)沒有冒氣泡，即可用注射器經(jīng)胃管注入藥液。豚鼠灌胃同家兔家兔的灌胃皮下注射給藥——大小鼠頸背部、腋下、腹側(cè)和后肢的皮下注射針頭取一銳角角度刺入皮下。將針頭輕輕向左右擺動，易擺動那么表示已刺入皮下。再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下大鼠的抓取、灌胃、皮下注射、肌肉注射、脫頸處死、尾靜脈、舌下靜脈給藥、心臟取血、心電圖測定表皮真皮皮下組織皮下注射腹腔注射小鼠腹腔注射皮內(nèi)注射靜脈注射給藥——大小鼠將大小鼠放在金屬籠或小鼠固定器中，通過金屬籠或大小鼠固定器的孔拉出鼠尾巴用左手捏住鼠尾巴中下部，用75％酒精棉球反復(fù)擦拭尾部注射時，以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè)，用食指從下面托起尾，右手持4號針頭的注射器，使針頭與靜脈平行〔小于30度角〕大鼠亦可用舌下靜脈注射小鼠尾靜脈注射靜脈注射給藥——兔兔放在固定架內(nèi)，酒精消毒并揉搓血管，使兔的耳緣靜脈充盈。

用左手食指和中指夾住兔的耳緣靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無名指和小指放在耳郭下作墊。右手拿注射器，針尖的斜面朝上，將針頭從遠(yuǎn)心端插入血管回抽有血即可注射，拔針后用棉球止血豚鼠可用足背靜脈注射實驗動物的采血5231尾尖采血眼眶靜脈叢采血斷頭采血腹主動脈采血4心臟采血腹主動脈采血6靜脈采血方法：固定動物并露出鼠尾，將尾部在45℃的溫水中浸泡數(shù)分鐘，使尾部血管擴(kuò)張。將鼠尾擦干，用銳器切去尾尖0.3～0.5cm，讓血液滴入盛器或直接以吸管吸取。對象：大、小鼠特點：小量采血，可以屢次采血。1尾尖采血方法：用左手捉鼠，拇指及中指抓住頭頸部皮膚，食指按于眼后，使眼球輕度突出，眼底球后靜脈叢淤血。右手持取內(nèi)徑為的玻璃毛細(xì)管〔臨用前折斷成1-1.5cm長的毛細(xì)管段，浸入1％肝素溶液中，枯燥后用〕刺入深度小鼠2～3mm，大鼠4～5mm。當(dāng)感到有阻力時再稍后退，得到所需要的血量后，拔出。對象：大、小鼠等。特點：中等血量〔0.2～0.3ml，小鼠；0.5～1.0ml，大白鼠〕，防止動物死亡。2眼眶靜脈叢采血小鼠眼眶取血方法：左手以拇指和食指保持動物的頭頸部，使其頭略下傾，右手持剪刀猛力剪斷鼠頸，讓血液滴入盛器。對象：大、小鼠等。特點：需要血量較大〔小白鼠可采血0.8～1.0ml，大白鼠可采血5.0～8.0ml〕，且不需要繼續(xù)保存動物生命時用本法。3斷頭采血

方法：動物要麻醉后進(jìn)行，用針管在腹主動脈與血管平行刺入。對象：大、小鼠等。特點：需要血量較大，且不需要繼續(xù)保存動物生命時用本法。4腹主動脈采血大鼠腹主動脈取血、灌流腹主動脈采血腹主動脈方法：將動物背位固定，在左胸第2至第4肋間剪毛一塊，用碘酒和酒精消毒。然后用配有7號針頭的10ml注射器，在心跳最明顯處作穿刺。針頭刺入心臟后即見血液流入注射器；或邊刺邊抽，直至血液流入注射器。取得所需血量后，迅速將針頭拔出，這樣心肌上的穿刺孔較易閉合。

對象：大鼠、兔、豚鼠等。特點：采血量較大，繼續(xù)保存動物生命。5心臟采血方法：將家兔放在固定箱內(nèi)，剪去擬采血耳殼上的毛，用電燈照射加熱或用二甲苯棉球涂擦耳殼，使耳部血管擴(kuò)張。用粗針頭刺破耳緣靜脈或以刀片在血管上切一小口，讓血液自然流出，滴入已放有抗凝劑的盛器中。采血完畢，用干棉球壓住出血口，以待止血。如一時不易止血，可用木夾夾住耳殼10～20分鐘。

對象：兔特點：采血量較大，繼續(xù)保存動物生命。6靜脈采血兔耳緣靜脈取血方法麻醉方法：★吸入、注射〔靜脈、皮下、肌肉、腹腔〕★常用麻醉藥物：揮發(fā)性麻醉藥：異氟烷、乙醚〔吸入〕，非揮發(fā)性麻藥：戊巴比妥鈉、硫賁妥鈉、氯胺酮〔靜脈〕五、實驗動物的麻醉常用麻醉藥的劑量及注射途徑種類戊巴比妥硫賁妥鈉鹽酸氯胺酮水合氯醛烏拉坦mg/kg途徑mg/kg途徑mg/kg途徑mg/kg途徑mg/kg小鼠3550IVIP2550I.V.IP22-44IM400IP--大鼠2550IVIP2040IVIP22-44IM300IP0.75IP豚鼠3040IVIP2055IVIP22-44IM200-300IP1.5IP家兔3040IVIP20IV22-441.0IVIP麻醉本卷須知

麻醉前應(yīng)準(zhǔn)確稱體重；注意麻醉劑量，麻醉過程中注意觀察動物的反響情況；注意保溫，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動物體溫水平；靜脈注射時，速度要均勻，不宜太快。動物在麻醉狀態(tài)體