臨床免疫質(zhì)控1

免疫質(zhì)量控制

莫炳強(qiáng)檢驗(yàn)質(zhì)量的重要性醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是一門綜合性應(yīng)用學(xué)科，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)不可缺少的組成部分，其檢驗(yàn)質(zhì)量直接影響著醫(yī)療工作的整體水平。免疫質(zhì)量控制相關(guān)的幾個(gè)概念質(zhì)量Quality

一組固有特性滿足要求的程度。

注1：術(shù)語“質(zhì)量”可使用形容詞如差、好或優(yōu)秀來修飾。

注2：“固有的”（其反義詞是“賦予的”）就是指存在某事或某物中本身就的，尤其是那種永久的特性。質(zhì)量控制(QualityControl,QC)

質(zhì)量管理的一部分，致力于滿足質(zhì)量要求質(zhì)量保證(QualityAssurance,QA)質(zhì)量管理的一部分，致力于提供質(zhì)量要求會(huì)得到滿足的信任。

室間質(zhì)量評價(jià)（ExternalQualityAssessment,EQA）//能力驗(yàn)證(ProficiencyTesting,PT)

利用實(shí)驗(yàn)室間的比對確定實(shí)驗(yàn)室的檢測能力(能力驗(yàn)證)室內(nèi)質(zhì)量控制采用每天隨標(biāo)本測定質(zhì)控血清的方法，并將結(jié)果誤差控制在一定限度之內(nèi)系統(tǒng)誤差通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測定均值的漂移,是由操作者所使用的試劑、儀器設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)物出現(xiàn)的問題而造成的,這種誤差可以通過質(zhì)量控制的措施和方法加以控制,是可以排除的。隨機(jī)誤差

則表現(xiàn)測定SD的增大,主要是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)操作人員的操作等隨機(jī)因素所致,其出現(xiàn)難以完全避免和控制。單波長與雙波長

單波長如：405nm、450nm、490nm、630nm等要設(shè)空白對照孔，所有孔要減空白對照值

雙波長如：主波長450nm，參考波長630nm等可不用設(shè)空白對照孔OD值與S/CO值

OD值:酶標(biāo)儀比色的吸光度S/CO值:標(biāo)本OD值/判斷值（CUT-OFF）

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)要選用S/CO

臨界值（CUT-OFF）

是ELISA方法檢測的陰陽性結(jié)果的判斷值。不同項(xiàng)目的試劑盒CUT-OF值不同,常見有以下幾種方式:試劑盒直接提供的常數(shù)如HCV-IgGCO=1.5與陰性對照相關(guān)的計(jì)算值如HBsAgCO=2.1N與陰陽性對照相關(guān)的計(jì)算值如HBcAbCO=1/2(N+P)“灰區(qū)”（可疑結(jié)果的含義）

把定量分析的正常值范圍引入定性分析建立灰區(qū)概念，即將CO值上下的一段區(qū)域定為陽性可疑，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)或換試劑重測以確定其陰陽性，如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報(bào)告“+”（陽性）定性酶免疫測定的CUT-OFF值ELISA檢測的“鉤狀”效應(yīng)“HOOKEFFECT”一步法和二步法均存在，只是前者出現(xiàn)的更早些，大多數(shù)是高值低吸光度，很少陰性結(jié)果。

質(zhì)量控制血清質(zhì)控血清是已知靶值的血清，在每次的常規(guī)檢驗(yàn)中加入一份或數(shù)份，通過所得結(jié)果來了解本次檢驗(yàn)的情況。質(zhì)控血清檢驗(yàn)的結(jié)果如能控制其誤差在一定范圍內(nèi)，就說明該檢驗(yàn)沒有發(fā)生不允許的誤差。如果出現(xiàn)超過允許誤差范圍的異常結(jié)果，提示該檢驗(yàn)不合格，應(yīng)尋找原因，糾正后，重檢待測標(biāo)本。因此質(zhì)控血清在質(zhì)控工作中起重要作用。

臨界值質(zhì)控血清

質(zhì)量控制血清分定值和未定值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值，一般定在正常值與異常值交界點(diǎn)上，定性測定時(shí)處于弱陽性水平，稱為臨界值。乙肝標(biāo)志物臨界值的制定，應(yīng)按臨床需求，為臨床提供統(tǒng)一的判斷弱陽性的標(biāo)準(zhǔn)。臨界值質(zhì)控血清可以作為試劑盒中的陽性對照品和陰性對照品以外的第三個(gè)對照品，它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽性反應(yīng)的標(biāo)本不漏檢。

質(zhì)控品（臨界血清）通常選用的濃度衛(wèi)生部臨檢中心提供：HBsAg1IU/mlHBsAb10mIU/mlHBeAg2NCU/mlHBeAb4NCU/mlHBcAb2NCU/mlHCV-IgG2NCU/mlHIV-Ab2NCU/mlTP2NCU/ml質(zhì)量控制的形式按其進(jìn)行范圍和評價(jià)目的：室間質(zhì)量評價(jià)室內(nèi)質(zhì)量控制室間質(zhì)量評價(jià)的目的是相互校正各參與實(shí)驗(yàn)室測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，要求保持在臨床所能接受的誤差范圍內(nèi)，從而使參加活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果具有可比性，因此室間質(zhì)量評價(jià)著重考察檢驗(yàn)操作的整體狀態(tài)，由于室間質(zhì)量評價(jià)活動(dòng)是借助外部力量來進(jìn)行回顧性檢查，而不能控制實(shí)驗(yàn)室每天所發(fā)生的報(bào)告質(zhì)量，故絕不能代替室內(nèi)質(zhì)量控制。相反只有首先搞好室內(nèi)質(zhì)量控制，保證檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到一定的精密度，才能得到較好的室間質(zhì)量評價(jià)成績，才談得上室間結(jié)果的可比性。當(dāng)室間質(zhì)量評價(jià)某一項(xiàng)目出現(xiàn)明顯差異時(shí)，又要從室內(nèi)質(zhì)量控制中尋找原因，重新制訂改進(jìn)計(jì)劃。

室間質(zhì)量評價(jià)的目的

室內(nèi)質(zhì)量控制的目的

實(shí)驗(yàn)室為了監(jiān)測和評價(jià)本室工作質(zhì)量，決定常規(guī)檢驗(yàn)報(bào)告能否發(fā)出所采取的一系列檢查、控制手段，旨在檢測和控制本室常規(guī)工作的精密度，并檢測其準(zhǔn)確度的改變，提高本室常規(guī)工作中批間和日間標(biāo)本檢測的一致性。

室內(nèi)質(zhì)量控制的質(zhì)量保證提昌全程保證或全方位保證，主要因素：人質(zhì)量體系

實(shí)驗(yàn)前的質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量保實(shí)驗(yàn)后的質(zhì)量保證人是質(zhì)量保證的關(guān)鍵素質(zhì)：

熱愛醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)具有廣泛的臨床醫(yī)學(xué)知識(shí)和檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)具有高度的責(zé)任心具有閑熟的檢驗(yàn)操作技能具有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)和實(shí)事求是的工作態(tài)度設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督管理員：督促、檢查、落實(shí)各項(xiàng)質(zhì)量要求

質(zhì)量管理體系建立各種管理文件（操作規(guī)程）包括:分析前、中、后各個(gè)環(huán)節(jié)

相關(guān)表格的建立、填寫及歸檔

建立各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP）

包括:儀器設(shè)備檢驗(yàn)項(xiàng)目等

室內(nèi)質(zhì)量控制的基本內(nèi)容包括分析前的質(zhì)控分析中的質(zhì)控分析后的質(zhì)控

病人準(zhǔn)備量具與測量計(jì)算結(jié)果標(biāo)本采集試劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)本轉(zhuǎn)移儀器狀態(tài)質(zhì)控圖繪制標(biāo)本處理反應(yīng)條件結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析標(biāo)本儲(chǔ)存比色測定

免疫室內(nèi)質(zhì)控各種表格的填寫

冰箱、水浴箱溫度記錄表儀器設(shè)備故障維修記錄本各種儀器設(shè)備使用記錄本各種儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄本各種儀器設(shè)備保養(yǎng)記錄本環(huán)境溫度、濕度記錄表各種原始操作記錄表

尤瑞納斯、I2000操作記錄表雜項(xiàng)操作記錄表自身抗體操作記錄表TORCH操作記錄表ASA、ACA操作記錄表體檢項(xiàng)目操作記錄表HIV-Ab標(biāo)本檢測登記表HIV-Ab原始記錄、

原始結(jié)果記錄

試劑、質(zhì)控物批次更換記錄免疫室內(nèi)質(zhì)控失控結(jié)果記錄尤瑞納斯室內(nèi)質(zhì)控即時(shí)審核記表即刻法—室內(nèi)質(zhì)控原始數(shù)據(jù)記錄（計(jì)算）表HCV-Ab陽性報(bào)告記錄表HIV-A結(jié)果登記表室內(nèi)質(zhì)控圖月分析總結(jié)室間質(zhì)評回報(bào)結(jié)果分析總結(jié)免疫質(zhì)控方法

Levey-Jennings法(回顧性)

“即刻審核”分析“L-J”質(zhì)控方法

免疫質(zhì)控目前沒有統(tǒng)一的方法,最合適的質(zhì)控方法尚待研究建立中。目前由各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)各自的情況制定,但必須要滿足臨床的需要，本實(shí)驗(yàn)室引用“L-J”質(zhì)控方法，其內(nèi)容基本上與臨床化學(xué)測定的質(zhì)控方法相同,但失控的判斷標(biāo)準(zhǔn)不同。

本室ELISA失控的判斷標(biāo)準(zhǔn)暫定：1.標(biāo)本OD值≥CO值為陽性的，S/CO值＜1為失控；標(biāo)本OD值＜CO值為陽性的，S/CO值＞1為失控；

2.S/CO值≥±3S為失控。免疫質(zhì)控的特點(diǎn)

影響ELISA檢測的因素很多。檢測時(shí)，陰陽性對照物、質(zhì)控物和標(biāo)本同時(shí)同板進(jìn)行檢測。檢測完成后要對空白孔、陰陽對照孔、質(zhì)控物進(jìn)行即刻審核，判定是否在控，該板結(jié)果可否發(fā)出。即時(shí)審核規(guī)則UranusAE200（所有項(xiàng)目數(shù)據(jù)自動(dòng)換算自動(dòng)傳輸）:設(shè)空白1孔，陰、陽性對照各2孔,室內(nèi)質(zhì)控1孔（乙肝兩對半、HIV-Ab、HCV-Ab、TP、CEA、AFP、EB、肝吸蟲抗體）

乙肝兩對半（上?？迫A）在控的情況下，陽性結(jié)果必須符合特有的模式方可發(fā)出報(bào)告；對少見或不可能出現(xiàn)的模式必須復(fù)查。重點(diǎn)注意HBsAg，復(fù)查的方法有:金標(biāo)、兩步法、時(shí)間分辨、PCR、中和試驗(yàn)等。（HBsAgHBsAbHBeAg）

CUT-OFF值=2.1N(N-陰性對照,OD值不到0.05按0.05算)。通常CO值為0.105。結(jié)果判斷陽性：≥CUT-OFF值；陰性：＜

CUT-OFF值（HBeAbHBcAb）CUT-OFF值=1/2（N+P）（N-陰性對照,P-陽性對照)。通常CO值為1.5-1.7。結(jié)果判斷陽性：＜CUT-OFF值；陰性：≥

CUT-OFF值x-x-x-HIV-Ab（北京金豪）

篩查陽性按條例規(guī)定用另一種方法和本法復(fù)查，3次2陽送確認(rèn)，發(fā)“HIV-Ab待復(fù)查”報(bào)告，3次2陰發(fā)“陰性”報(bào)告。CUT-OFF值