中醫(yī)證候模型研究概述

中醫(yī)證候模型研究概述

傅正固法的理論基礎(chǔ)是中醫(yī)的正確理論。這是識別、診斷、預防和治療疾病的理論依據(jù)之一。扶正就是扶助正氣,固本就是調(diào)護機體抗病之本。通過扶正固本,促進生理機能的恢復,以達到正復邪退治療疾病的目的。近年來隨著中醫(yī)藥研究的不斷深入,扶正固本理論被廣泛應(yīng)用到多種疾病的治療中,包括腫瘤、心腦血管疾病、肝臟疾病、腎病、肺病等等。祖國醫(yī)學認為,疾病為人體正氣虛損后,外邪六淫不正之氣乘虛而入所致。虛證一般分為氣虛、血虛、陽虛和陰虛等不同類型,氣虛和陽虛表示機體臟腑功能的的減退,血虛和陰虛則表示體內(nèi)津液的損耗,二者之間的關(guān)系,是人體陰陽相互平衡的關(guān)系。人體陰陽不平衡,則可能出現(xiàn)陰盛陽衰,或陽盛耗陰。扶正固本治則是從整體出發(fā),調(diào)動機體內(nèi)在因素,提高機體抗病能力,調(diào)整機體的偏盛偏衰狀態(tài),使陰陽趨于平衡,以達到治療虛證的目的?，F(xiàn)將近年來虛證動物模型常用的制備方法和檢測指標綜述如下。1氣虛模型氣虛模型可分為肺氣虛、脾氣虛、心氣虛3種。1.1煙煙整體快速燃燒的方法肺氣虛是指肺的功能受損,臨床以咳嗽無力、動則氣喘、神疲乏力等為主要表現(xiàn)。目前國內(nèi)制作肺氣虛證動物模型多用煙熏法,先造成動物咳喘之證,進而發(fā)展成肺氣虛證候。中醫(yī)學認為久病咳喘,可以耗傷肺氣,從而導致肺氣虛,故煙熏造模法符合中醫(yī)理論要求。目前用于制備肺氣虛模型的方法有單純煙熏法、煙熏復合木瓜蛋白酶霧化吸入法、煙熏加感染法。單純煙熏法采用刨花、鋸末點燃煙熏大鼠,也可在此基礎(chǔ)上加上煙葉、硫磺或雄黃等,或單純用香煙煙熏。煙熏復合木瓜蛋白酶霧化吸入法則是目前制備慢性阻塞性肺病肺氣虛證模型比較常用的方法之一。木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶,采用木瓜蛋白酶霧化吸入,可破壞肺組織,可促進肺氣虛模型的形成。煙熏加感染法則是在煙熏法的基礎(chǔ)上向動物氣管內(nèi)注入LPS等。此3種方法均可復制出肺氣虛模型。模型動物可出現(xiàn)咳嗽無力,舌淡紅等癥狀,與臨床見證基本相同。此外還表現(xiàn)為活動減少,毛發(fā)蓬亂無澤,精神萎靡倦怠,飲食量減少,體質(zhì)量增加緩慢等。這類模型在制模上吸取了中、西醫(yī)在造模方面的成功經(jīng)驗,既與中醫(yī)理論相聯(lián)系,又與現(xiàn)代醫(yī)學的某些疾病相一致,且易于操作,重復性好,但由于中醫(yī)的“證”和西醫(yī)的病是兩個概念完全不同的體系,理論上尚難統(tǒng)一,因此目前制作的模型在理論依據(jù)上尚不能完全反映傳統(tǒng)中醫(yī)的理論特色。1.2多重因素造模技術(shù)脾氣虛模型的制備方法較多,如苦寒瀉下法,過食肥甘法、限制飲食法、饑飽失常法、耗氣破氣法等。近年來利用雙重或多重病因復制脾氣虛模型,而且造模時間延長,認為這類模型更符合中醫(yī)臨床病因,表現(xiàn)更為穩(wěn)定,故應(yīng)用越來越多1075。常用的多重因素造模方法有耗氣破氣加饑飽失常法,苦寒瀉下、勞累、饑飽失常3因素復合法。模型大鼠表現(xiàn)出嗜臥懶動,大便溏,食欲明顯下降,體重、體溫下降,毛色不榮等癥狀。脾氣虛的造模方法雖多,但大部分造模方法在選用上存在著爭議。其突出的問題是在造模后自然恢復較快。而采用多因素造模法在造模后模型大鼠的癥狀、體征仍存在,說明多因素復合制備的脾氣虛證大鼠模型穩(wěn)定性良好,可克服單因素造模方法持續(xù)時間短、自愈性強的缺點。1.3中醫(yī)病因病機心氣虛證動物模型的研究已有30多年的歷史,造模方法通常采用睡眠剝奪法、高脂飲食配合免疫損傷加慢性放血法、限食加力竭配合大劑量心得安復合因素法、慢性放血法、冠狀動脈結(jié)扎法等。其中前4種模型,多為生理性、一時性、可逆性的造模條件引起的結(jié)果,同時對所制作的動物模型缺少評價環(huán)節(jié),致模型所反映的中醫(yī)癥候說明力度偏低。而冠狀動脈結(jié)扎法致心肌梗死后心衰模型是西醫(yī)最典型的心肌缺血模型,符合西醫(yī)的病因病機。從中醫(yī)病因病機上講,此模型是由于血瘀閉阻心脈,致左心室收縮功能異常為特征的心氣虛證,亦較符合中醫(yī)理論。模型大鼠毛發(fā)較枯槁,毛色灰黃、倒豎,精神萎靡,喜扎堆蜷縮,抓取時反抗較輕微。高脂飲食配合免疫損傷加慢性放血法參考了動脈粥樣硬化模型的復制方法,在造成動物心血管慢性損傷的基礎(chǔ)上,結(jié)合多次少量放血以耗氣,復制心氣虛血瘀證模型。此法復制的動物模型與心氣虛血瘀證患者的臨床表現(xiàn)有相似之處,在一定程度上反映了心氣虛血瘀證的特點。扶正固本藥物基于氣虛動物模型的檢測指標見表1:2血虛證的制作方法血虛模型通常采用的的制備方法包括失血法、溶血法、化學損傷法、射線損傷法等。模型動物表現(xiàn)為懶動、豎毛、少食、體質(zhì)量下降、唇爪蒼白、閉目等現(xiàn)象。失血法可造成小鼠血液紅細胞數(shù)及血紅蛋白含量下降。此外,也有人在放血法的基礎(chǔ)上采用強迫游泳的方法,制成血虛證模型。此方法簡單,指標明確,不需要特殊設(shè)備,但小鼠失血量難以完全一致。溶血法是利用化學品乙酰苯肼的氧化作用,破壞紅細胞膜,造成溶血。操作較失血法更為方便,但由于紅細胞變形及碎片的干擾,鏡檢計數(shù)較困難,以紅細胞壓積法則更為準確方便?；瘜W損傷法主要形成外周白細胞減少,常用抗癌藥環(huán)磷酰胺造模,方法簡便易行。輻射損傷法用60Coγ射線照射損傷骨髓,影響造血功能,可使造血干細胞和祖細胞數(shù)目減少,此模型與再生障礙性貧血較為接近。目前血虛動物模型制備一般采用綜合的方法,除了采用溶血法與化學損傷法聯(lián)合應(yīng)用外,也有采用放血法與化學損傷法并用復制動物模型,動物在因失血造成血虛基礎(chǔ)上伴有氣虛。免疫抑制劑環(huán)磷酰胺在造成動物免疫功能低下的同時又抑制了骨髓的生長,減少了外周血細胞的生成,二者相互為用,從雙重環(huán)節(jié)上造成動物血虛模型,更符合中醫(yī)的血虛證。扶正固本藥物基于血虛動物模型的檢測指標見表2。3陽虛模型陽虛模型又分為腎陽虛、脾陽虛、心陽虛3種模型。3.1腺預防黨內(nèi)因素常用造模方法有過量糖皮質(zhì)激素、損傷腎上腺、抑制甲狀腺功能的藥物、切除甲狀腺、大劑量利血平、使用羥基脲等。腎上腺皮質(zhì)激素法是最早用于制造腎陽虛動物模型的方法。模型豚鼠出現(xiàn)活動遲緩、神態(tài)萎靡、倦臥、弓背、畏寒肢冷、體毛枯疏、尿多等腎陽虛征象。雌激素法可誘發(fā)鼠“下丘腦-垂體-性腺軸”受抑而造成腎陽虛模型。動物出現(xiàn)活動能力減弱,抗疲勞下降等表現(xiàn)。腺嘌呤法的機制是體內(nèi)攝入的大劑量腺嘌呤,在黃嘌呤氧化酶作用下,轉(zhuǎn)變?yōu)殡y溶于水的2,8-羥基腺嘌呤,這種腺嘌呤代謝產(chǎn)物沉積于腎小管,引起腎衰竭,并且代謝產(chǎn)物還可使腎組織中的糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝有關(guān)多種酶活性受抑制,影響腎組織的能量代謝1095。以上造模方法大都在某幾個方面模擬腎陽虛證候,幾乎沒有涵蓋疾病全部癥狀的造模法,如應(yīng)用腺嘌呤、性激素法主要表現(xiàn)為對生殖的影響,較適于研究不育癥;甲狀腺素法能引起動物甲亢,但對生殖影響小。3.2苦寒瀉下復合法脾陽虛模型的制備方法與脾氣虛有很多類似之處,常用的方法有飲食失調(diào)、游泳、苦寒瀉下復合法、游泳、利血平、苦寒瀉下復合法。造模大鼠出現(xiàn)精神萎靡、四肢冰涼、蜷臥、反應(yīng)遲鈍、行動遲緩、甚至行走不穩(wěn)、皮毛枯槁散亂、大便溏薄或泄瀉、肛周污濁、飲食減少、消瘦等癥狀。3.3對大鼠主動脈出血量的影響心陽虛模型的制備尚無較統(tǒng)一的標準,有報道可于大鼠舌下靜脈注射鹽酸普羅帕酮,當+LVdp/dtmax降到正常值的2/3以下,并維持5min以上即視為模型形成。也可給大鼠靜脈注射垂體后葉素使大白鼠心臟冠狀動脈發(fā)生痙攣性收縮,產(chǎn)生典型的心陽虛和心肌缺血的一系列典型的心電圖變化。扶正固本藥物基于陽虛動物模型的檢測指標見表3。4魔鬼模型陰虛模型分為肺陰虛模型、脾陰虛模型、腎陰虛模型3種。4.1模型動物的檢測腎陰虛的造模方法包括過量糖皮質(zhì)激素法、過量甲狀腺激素法、甲狀腺素加利血平法等等。其中過量糖皮質(zhì)激素法是較為經(jīng)典的方法。模型動物表現(xiàn)為體重明顯下降,行動遲緩,背毛卷曲、灰暗,對外界反應(yīng)遲鈍等。缺點是經(jīng)糖皮質(zhì)激素處理后的小鼠免疫功能較差,可能出現(xiàn)病菌誘發(fā)感染死亡。4.2脾實模型制備肺陰虛模型通常采用灌服利血平、甲狀腺素,同時輔以二氧化硫(SO2)的方法加以制備。模型大鼠出現(xiàn)咳嗽、少痰、消瘦、皮毛枯槁、大便干等癥狀,并進行性加重,飲水量增加,個別大鼠有哮鳴音和脫毛現(xiàn)象。脾陰虛模型通常是在脾氣虛模型的基礎(chǔ)上采用辛熱傷陰法制備。扶正固本藥物基于陰虛動物模型的檢測指標見表4。5證候動物模型的制備中醫(yī)證候動物模型是在中醫(yī)理論指導下根據(jù)中醫(yī)病因病機理論,利用特定的致病因素在動物身上復制出與人體臨床癥狀和病理改變相似的證候,它是開展中醫(yī)證候?qū)嶒炑芯康谋匾獥l件。如何使動物模型更接近臨床,已經(jīng)成為當前虛證動物模型研制工作中的重大問題。多年來經(jīng)過學者們的積極探索,現(xiàn)已建立了40多類中醫(yī)證候動物模型。但這些模型的復制方法均與特異性、單一的病理變化相關(guān)聯(lián),多數(shù)只反映臨床病理的某個方面,多無明確的臨床病因?qū)W基礎(chǔ),難以完全體現(xiàn)中醫(yī)證候的全部特征和病理狀態(tài)。在血虛模型的研究中,有人比較了綜合放血法和單純放血法建立的血虛證小鼠模型,認為綜合放血法能建立一種比較理想的血虛證動物模型,更加符合血虛證的病因、病機和臨床表現(xiàn)。在腎陽虛模型的制備方法中,腺嘌呤誘導的腎陽虛模型較氫化考的松誘導的腎陽虛模型更符合要求。腺嘌呤誘導的腎陽虛模型T3,T4水平較氫化考的松誘導的腎陽虛模型偏低,而且腺嘌呤誘導的腎陽虛模型大鼠尿量明顯增多。隨著病程的進展,腎單位大量喪失,出現(xiàn)“大白腎”,進而出現(xiàn)非常明顯的陽虛癥狀。而氫化考的松誘導的腎陽虛模型,雖可致下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸反饋抑制,但腎臟基本無損傷,機體反饋性的調(diào)節(jié)這種抑制狀態(tài),從而使陽虛癥狀減輕,與臨床病人持續(xù)性的腎陽虛癥狀不是很符合。在心氣虛模型的諸多制備方法中,左冠狀動脈結(jié)扎法造成的心肌缺血模型大鼠,其左室收縮功能顯著下降,而且大鼠在安靜狀態(tài)下呼吸頻率減慢,運動后呼吸急促,這些均與臨床上的心氣虛證患者表現(xiàn)類似,被認為是目前制備心氣虛模型較為理