獸醫(yī)實驗室生物安全技術管理規(guī)范

獸醫(yī)實驗室生物安全技術

管理規(guī)范（2003年10月15日農業(yè)部第302號公告發(fā)布）1適用范圍

本規(guī)范規(guī)定了獸醫(yī)實驗室生物安全防護的基本原則、實驗室的分級、各級實驗室的基本要求和管理。本規(guī)范為最低要求。本規(guī)范適用于各級獸醫(yī)實驗室的建設、使用和管理。2引用標準《中華人民共和國動物防疫法》（1997）《中華人民共和國進出境動植物檢疫法》（1992）《中華人民共和國進出境動植物檢疫法實施條例》（1995）《農業(yè)轉基因生物安全管理條例》（2001國務院304號令）《農業(yè)生物基因工程安全管理實施辦法》（1996農業(yè)部7號令）3定義

獸醫(yī)實驗室（VeterinaryLaboratory）：一切從事獸醫(yī)病原微生物、寄生蟲研究與使用，以及獸醫(yī)臨床診療和疫病檢疫監(jiān)測的實驗室。

獸醫(yī)微生物（VeterinaryMicroorganisms）：一切能引起動物傳染病或人畜共患病的細菌、病毒和真菌等病原體。人畜共患?。╖oonosis）：可以由動物傳播給人并引起人類發(fā)病的傳染性疾病。

外來?。‥xoticDiseases）：在國外存在或流行的，但在國內尚未證實存在或已消滅的動物疫病。3定義

實驗室生物安全防護（BiosafetyContainmentofLaborato-ries）：實驗室工作人員在處理病原微生物、含有病原微生物的實驗材料或寄生蟲時，為確保實驗對象不對人和動物造成生物傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染，在實驗室和動物實驗室的設計與建造、使用個體防護裝置、嚴格遵守標準化的工作及操作程序和規(guī)程等方面所采取的綜合防護措施。3定義

微生物危害評估（HazardAssessmentofMicrobes）：對病原微生物或寄生蟲可能給人、動物和環(huán)境帶來的危害所進行的評估。3定義

氣溶膠（Aerosol）：懸浮于氣體介質中粒徑為0.001—100μｍ的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態(tài)分散體系。

通風櫥（ChemicalHood）：是通過管道直接排出操作化學藥品時所產生的有害或揮發(fā)性氣體、氣溶膠和微粒的通風裝置。高效空氣過濾器（HEPA，HighEfficiencyParticulateAir-fil-ter）：在額定風量下，對粒徑大于等于0.3μｍ的粒子捕集效率在99.97％以上及氣流阻力在245Pa以下的空氣過濾器。生物安全柜（Biosafety

Ｃabinet）：處理危險性微生物時所用的箱形負壓空氣凈化安全設備。分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級。

4實驗室生物安全防護的基本原則總則獸醫(yī)實驗室生物安全防護內容包括：安全設備、個體防護裝置和措施（一級防護）；實驗室的特殊設計和建設要求（二級防護）；嚴格的管理制度和標準化的操作程序與規(guī)程。獸醫(yī)實驗室除了防范病原體對實驗室工作人員的感染外，還必須采取相應措施防止病原體的逃逸

4實驗室生物安全防護的基本原則總則對每一特定實驗室，應制定有關生物安全防護綜合措施，編寫各實驗室的生物安全管理手冊，并有專人負責生物安全工作。生物安全水平根據微生物的危害程度和防護要求分為４個等級，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級。有關ＤＮＡ重組操作和遺傳工程體的生物安全應參照《農業(yè)生物基因工程安全管理實施辦法》執(zhí)行。

4實驗室生物安全防護的基本原則安全設備和個體防護實驗室必須配備相應級別的生物安全設備。所有可能使病原微生物逸出或產生氣溶膠的操作，必須在相應等級的生物安全控制條件下進行。實驗室工作人員必須配備個體防護用品（防護帽、護目鏡、口罩、工作服、手套等）。

4實驗室生物安全防護的基本原則實驗室選址、設計和建造的要求實驗室必須依據所需要的防護級別和標準進行設計和建造，并滿足本規(guī)范中的最低設計要求和運行條件。動物實驗室除滿足相應生物安全級別要求外，還應隔離，并根據其相應生物安全級別，保持與中心實驗室的相應壓差。

4實驗室生物安全防護的基本原則生物安全操作規(guī)程本規(guī)范規(guī)定了不同級別的獸醫(yī)實驗室生物安全操作規(guī)程，必須在各實驗室的生物安全管理手冊中明列，并結合實際制定相應的實施方案。本規(guī)范對各種病原微生物均有明確的生物危害分類，各實驗室應根據其操作的對象，制定相應的特殊生物安全操作規(guī)程，并列入其生物安全管理手冊。

4實驗室生物安全防護的基本原則危害性微生物及其毒素樣品的引進、采集、包裝、標識、傳遞和保存采集的樣品應放入安全的防漏容器內，傳遞時必須包裝結實嚴密，標識清楚牢固，容器表面消毒后由專人送遞或郵寄至相應實驗室。危害性微生物及其毒素樣品的保存應根據其危害等級分級保存。進口危害性微生物及其毒素樣品時，申請者必須要有與該微生物危害等級相應的生物安全實驗室，并經國務院畜牧獸醫(yī)行政管理部門批準。

4實驗室生物安全防護的基本原則使用放射性同位素的生物安全防護要求參照《放射性同位素與射線裝置放射防護條例》執(zhí)行。

◆國務院第449號令《放射性同位素與射線裝置安全和防護條例》

自2005年12月1日起施行照射狀態(tài)指示燈當心電離輻射不同射線的穿透能力輻射所致各組織器官病變組織器官

效應

單次照射劑量閾值（Gy）皮膚紅斑（X、γ線）5—8暫時性脫毛3—5永久性脫毛7造血系統(tǒng)受照者50%死亡2—3眼睛晶體混濁（X線)2白內障（100%）7.5白內障（X線,隨訪35年）5睪丸暫時性不育0.15永久性不育3.5卵巢不育2.5—6

電離輻射防護的基本手段時間防護距離防護屏蔽防護

4實驗室生物安全防護的基本原則污染與廢棄物（廢氣、廢液和固形物）處理去污染包括滅菌（徹底殺滅所有微生物）和消毒（殺滅特殊種類的病原體），是防止病原體擴散造成生物危害的重要防護屏障。被污染的廢棄物或各種器皿在廢棄或清洗前必須進行滅菌處理；實驗室在病原體意外泄漏、重新布置或維修、可疑污染設備的搬運以及空氣過濾系統(tǒng)檢修時，均應對實驗室設施及儀器設備進行消毒處理。

4實驗室生物安全防護的基本原則污染與廢棄物（廢氣、廢液和固形物）處理根據被處理物的性質選擇適當的處理方法，如高壓滅菌、化學消毒、熏蒸、γ—射線照射或焚燒等。對實驗動物尸體及動物產品應按規(guī)定作無害化處理。實驗室應盡量減少用水，污染區(qū)、半污染區(qū)產生的廢水必須排入專門配備的廢水處理系統(tǒng)，經處理達標后方可排放。

4實驗室生物安全防護的基本原則管理制度獸醫(yī)實驗室必須建立健全管理制度。

4實驗室生物安全防護的基本原則微生物危害評估按照微生物危害分為４級。在建設實驗室之前，必須對擬操作的病原微生物進行危害評估，結合人和動物對其易感性、氣溶膠傳播的可能性、預防和治療的獲得性等因素，確定相應生物安全水平等級。危害程度評估應該由適當的有經驗的專業(yè)人員進行

5微生物危害分級微生物危害通常分為以下4級生物危害１級：對個體和群體危害程度低，已知的不能對健康成年人和動物致病的微生物。生物危害２級：對個體危害程度為中度，對群體危害較低，主要通過皮膚、粘膜、消化道傳播。對人和動物有致病性，但對實驗人員、動物和環(huán)境不會造成嚴重危害的動物致病微生物，具有有效的預防和治療措施。

5微生物危害分級微生物危害通常分為以下4級生物危害３級：對個體危害程度高，對群體危害程度較高。能通過氣溶膠傳播的，引起嚴重或致死性疫病，導致嚴重經濟損失的動物致病微生物，或外來的動物致病微生物。對人引發(fā)的疾病具有有效的預防和治療措施。生物危害４級：對個體和群體的危害程度高，通常引起嚴重疫病的、暫無有效預防和治療措施的動物致病微生物。通過氣溶膠傳播的，有高度傳染性、致死性的動物致病微生物；或未知的危險的動物致病微生物。

5微生物危害分級根據對象微生物本身的致病特征確定微生物的危害等級時必須考慮下列因素微生物的致病性和毒力宿主范圍所引起疾病的發(fā)病率和死亡率疾病的傳播媒介動物體內或環(huán)境中病原的量和濃度

5微生物危害分級根據對象微生物本身的致病特征確定微生物的危害等級時必須考慮下列因素排出物傳播的可能性病原在自然環(huán)境中的存活時間病原的地方流行特性交叉污染的可能性獲得有效疫苗、預防和治療藥物的程度

5微生物危害分級除考慮特定微生物固有的致病危害外，危害評估還應包括產生氣溶膠的可能性操作方法（體外、體內或攻毒）對重組微生物還應評估其基因特征（毒力基因和毒素基因）、宿主適應性改變、基因整合、增殖力和回復野生型的能力等。

5獸醫(yī)實驗室的分類、分級及

其適用范圍分類基礎動物實驗室

是指對病原微生物進行試驗操作時所產生的生物危害具有物理防護能力的獸醫(yī)實驗室。適用于獸醫(yī)微生物的臨床檢驗檢測、分離培養(yǎng)、鑒定以及各種生物制劑的研究等工作。生物安全動物實驗室

是指對病原微生物的動物生物學試驗研究時所產生的生物危害具有物理防護能力的獸醫(yī)實驗室。也適用于動物傳染病臨床診斷、治療、預防研究等工作。

5獸醫(yī)實驗室的分類、分級及

其適用范圍分級（生物安全水平分級依據）一級生物安全水平（BSL－1）二級生物安全水平（BSL－2）三級生物安全水平（BSL－3）四級生物安全水平（BSL－4）能夠安全地從事國內和國外的，能通過氣溶膠傳播，實驗室感染高度危險，嚴重危害人和動物生命和環(huán)境的，沒有特效預防和治療方法的微生物工作的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關系的，但尚未完全認識的病原體也應在此種水平條件下進行操作，直到取得足夠的數據后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在低一級安全水平下工作

5獸醫(yī)實驗室的分類、分級及

其適用范圍分級（動物實驗生物安全水平）一級動物實驗生物安全水平（ABSL－1）二級動物實驗生物安全水平（ABSL－2）三級動物實驗生物安全水平（ABSL－3）四級動物實驗生物安全水平（ABSL－4）

6實驗室生物安全的物理防護分級和組合初級物理防護屏障實驗室生物安全必須配備初級物理防護屏障，它包括各級生物安全設備和個人防護器具。

6實驗室生物安全的物理防護分級和組合次級物理防護屏障實驗室的設施結構和通風設計構成次級物理防護屏障。一般把實驗室分為潔凈、半污染和污染三個區(qū)。實驗室保持密閉，通風的氣流方向始終保持：外界→ＨＥＰＡ→潔凈區(qū)→半污染區(qū)→污染區(qū)→ＨＥＰＡ→外界。三級和四級生物安全水平的實驗室中，污染區(qū)和半污染區(qū)的氣壓相對于大氣壓的壓差分別不應小于－50Pa和－30Pa

6實驗室生物安全的物理防護分級和組合生物安全水平（BSL）的構成生物安全水平依賴于初級防護屏障、次級防護屏障和操作規(guī)程。三者不同形式的組合構成了４個級別生物安全水平，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級安全水平逐級提高，從而構成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級實驗室生物安全。應根據實驗的生物安全要求進行各種組合的設計。

7各級動物安全實驗室要求一級動物安全實驗室指按照BSL-1標準建造的實驗室，也稱基礎生物實驗室。在建筑物中，實驗室無需與一般區(qū)域隔離。實驗室人員需經一般生物專業(yè)訓練。其具體標準、微生物操作、安全設備、實驗室設施要求如下：

7各級動物安全實驗室要求一級動物安全實驗室工作一般在桌面上進行，采用微生物的常規(guī)操作。工作臺面至少每天消毒一次。工作區(qū)內不準吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個人物品（化妝品、食品等）。嚴禁用嘴吸取試驗液體，應該使用專用的移液管。防止皮膚損傷。所有操作均需小心，避免外溢和氣溶膠的產生。所有廢棄物在處理之前用公認有效的方法滅菌消毒。

7各級生物安全實驗室要求一級動物安全實驗室工作一般在桌面上進行，采用微生物的常規(guī)操作。工作臺面至少每天消毒一次。工作區(qū)內不準吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個人物品（化妝品、食品等）。嚴禁用嘴吸取試驗液體，應該使用專用的移液管。防止皮膚損傷。所有操作均需小心，避免外溢和氣溶膠的產生。所有廢棄物在處理之前用公認有效的方法滅菌消毒。

7各級生物安全實驗室要求一級動物安全實驗室工作時應穿著實驗室專用長工作服。戴乳膠手套。可佩戴防護眼鏡或面罩

7各級生物安全實驗室要求四級動物安全實驗室指按照ABSL－４標準建造的實驗室，適用于本國和外來的、通過氣溶膠傳播或不知其傳播途徑的、引起致死性疾病的高度危害病原體的操作。必須使用Ⅲ級生物安全柜系列的特殊操作和正壓防護服的操作。

7各級生物安全實驗室要求四級動物安全實驗室應該制定特殊的生物安全手冊或措施未經培訓的人員不得進入動物實驗室。所有進入ＡＢＳＬ－４設施的人必須建立醫(yī)療監(jiān)督，監(jiān)督項目必須包括適當免疫接種、血清收集及暴露危險等有效性協(xié)議和潛在危害預防措施。負責人要告知工作人員工作中特殊的危險，讓他們熟讀安全規(guī)程并遵照執(zhí)行。設施內禁止吃、喝、抽煙、處理隱形眼鏡、使用化妝品和儲藏食品。

7各級生物安全實驗室要求四級動物安全實驗室外溢污染一旦發(fā)生，應由具有從事傳染性實驗工作訓練和有經驗的人處理。全部廢棄物（含動物組織、尸體和污染墊料）、其它處理物和需要洗的衣服均需用安裝在次級屏障墻壁上的雙扉高壓蒸汽滅菌器消毒。廢棄物要焚燒。進行傳染性實驗必須指派２名以上的實驗人員。獸醫(yī)實驗室標志設置原則