紫外光譜分析實(shí)驗(yàn)

紫外光譜分析試驗(yàn)二、【試驗(yàn)?zāi)康囊蟆客ㄟ^(guò)試驗(yàn)了解苯的B正已烷進(jìn)展純度檢驗(yàn)；測(cè)量樣品中苯的濃度。要求同學(xué)把握紫外光譜儀的儀器根本構(gòu)造及分析原理；利用所學(xué)過(guò)的紫外光譜學(xué)問(wèn)，解釋苯在不同形態(tài)下B吸取帶精細(xì)構(gòu)造變化；對(duì)分析純環(huán)已烷、正已烷的純度的檢驗(yàn)，及可能含有的雜質(zhì)是什么；設(shè)計(jì)出合理的方法測(cè)出樣品中苯的濃度。三、【試驗(yàn)原理】應(yīng)用于有機(jī)化合物的定性、定量和構(gòu)造鑒定。由于紫外吸取光譜的吸取峰通常很寬，峰的數(shù)目也很少，因此在構(gòu)造分析方面不具有格外專一性。通常是1．化合物中微量雜質(zhì)檢查利用紫外光譜法可以便利地檢查出某些化合物中的微量雜質(zhì)。例如，在環(huán)己烷中含有微量雜質(zhì)苯，由于苯B220~270nm220~270nm處有苯的粗細(xì)構(gòu)造吸取帶，即可推斷環(huán)己烷中是否有微量雜質(zhì)苯存在。未知樣品的鑒定標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)展比較。在實(shí)際測(cè)定中，我們還常常利用紫外吸取峰的波長(zhǎng)和強(qiáng)度進(jìn)展定性分析。例如，煙堿〔尼古丁〕0.1N硫酸中最大吸取峰波長(zhǎng)λmax260=343λmax和與煙堿的數(shù)據(jù)全都，則該化合物構(gòu)造與煙堿構(gòu)造就根本一樣。定量分析應(yīng)用紫外光譜法進(jìn)展定量分析的方法很多，如：a.標(biāo)準(zhǔn)曲線法、b.比照法、c.吸光系數(shù)法、d.混和物的定量、e.雙波長(zhǎng)分光光度法。但最常用最簡(jiǎn)潔的方法就是“標(biāo)準(zhǔn)曲線法“。依據(jù)光的吸取定率：A=εbcε-吸光系數(shù)；b-吸取池液層厚度；c-溶液濃度b肯定，入射光波長(zhǎng)和其他條件也保持不變，則在肯定濃度范圍內(nèi)，所測(cè)得的吸光度與待測(cè)物質(zhì)的濃度成正比。配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在λmax處分別測(cè)定吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液A為縱座標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，如下圖。假設(shè)測(cè)出未知濃度樣品的吸光度值，就可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中上查出樣品的濃度。有機(jī)化合物分子構(gòu)造的推斷共軛體系確實(shí)定通過(guò)測(cè)定有機(jī)化合物的紫外光譜，可以確定分子中有無(wú)共軛體系及共軛的程度。假設(shè)一種化合物在210nm1，3丁二烯的λmax217nm，εmax21.000260～350nm區(qū)域有強(qiáng)吸取帶，表示有三至五λmax335nm，εmax118.000。隨著共軛體系的增加，最大吸取波長(zhǎng)紅移，吸取強(qiáng)度增大。互變異構(gòu)體的判別酸乙酯存在酮式和烯醇式兩種異構(gòu)體。酮式異構(gòu)體孤立羰基，不存在共軛體系，在近紫外區(qū)無(wú)強(qiáng)的吸取，只是在吸取波長(zhǎng)272nm〔εmax=16〕處243納為〔εmax=16.000〕。順?lè)串悩?gòu)體的判別當(dāng)有機(jī)化合物分子空間構(gòu)型不同時(shí)，其紫外吸取光譜也不一樣。通常反式異構(gòu)體的吸取峰波長(zhǎng)比順式異構(gòu)兩種異構(gòu)體λmaxεmax不一樣。樣品濃度與溶劑的選擇只有在稀溶液下才成立。所以，對(duì)待測(cè)物質(zhì)的濃度就要有所要求，一般用量：1cm3ml溶液，樣0.1~100mg。另外，由于溶劑效應(yīng)，即某些物質(zhì)的紫外吸取光譜特性，與所承受溶劑的極性有親熱的關(guān)系，溶劑的極性不同，同一化合物的紫外吸取光譜外形、吸取峰位置不一樣。在測(cè)試前，要正確選擇溶要使用一樣溶劑。溶劑除了對(duì)吸取波長(zhǎng)有影響外，還影響吸取強(qiáng)度和精細(xì)構(gòu)造。例如B吸取帶的精細(xì)構(gòu)造在非極性溶劑中較清楚，但在極性溶劑中則較弱，有時(shí)消逝而消滅一個(gè)寬峰。苯酚的B吸取帶就是這樣一個(gè)例子。苯酚的精溶質(zhì)吸取帶的觀看。四、【儀器與試劑】?jī)x器：Lambda35型紫外分光光度計(jì)〔美國(guó)PE〕；容量瓶10ml，25ml，移液管1ml，2ml，5ml試劑：苯；環(huán)己烷〔優(yōu)級(jí)純和分析純〕；正已烷〔分析純和優(yōu)級(jí)純〕；紫外分光光度計(jì)的構(gòu)造原理由光源(鎢絲燈或氘燈，依據(jù)波長(zhǎng)而變換使用)的單色光束。然后由反射鏡反射至由馬達(dá)轉(zhuǎn)動(dòng)的調(diào)制板及扇形鏡上。當(dāng)調(diào)制板以肯定轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)時(shí)，時(shí)而使光束通過(guò)，時(shí)而擋住光束，因而調(diào)制成肯定頻率的交變光束。之后扇形鏡在旋轉(zhuǎn)時(shí)，將此交變光束交替地投射到參比溶液(空白溶液)及試樣溶液上，后面的光電倍增管承受通過(guò)參比溶液及為試樣溶液所減弱的交變光通量，并使之轉(zhuǎn)變?yōu)闇贤ㄐ盘?hào)。此信號(hào)經(jīng)適當(dāng)放大并用解調(diào)器分別及整流。然后以電位器自動(dòng)平衡此兩直流信號(hào)的比率，并為記錄器所記錄而繪制吸取曲線?，F(xiàn)代儀器在主機(jī)中裝有微處理機(jī)或外接微型計(jì)算機(jī)，掌握儀器操作和處理測(cè)量數(shù)據(jù)，組裝有屏幕顯示、打印機(jī)和繪圖儀等。任何一種分光光度計(jì)，根本上都是由五局部組成。即光源、單色器、樣品吸取池、檢測(cè)器、記錄系統(tǒng)。五、【試驗(yàn)步驟】六、【數(shù)據(jù)處理】七、【問(wèn)題爭(zhēng)論】B吸取帶存在肯定差異的緣由。B7個(gè)不同波長(zhǎng)的吸取峰，除