生物技術(shù)制藥課后思考題

第一章：緒論思慮題什么是生物技術(shù)？生物技術(shù)所包含的內(nèi)容及定義。答：1）生物技術(shù)又稱生物工程，指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，聯(lián)合先進的工程技術(shù)手段和其余基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，依據(jù)早先的設(shè)計改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某種目的的技術(shù)。2）包含基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程、酶工程、蛋白質(zhì)工程、抗體工程、糖鏈工程、大海生物技術(shù)及生物轉(zhuǎn)變等。（詳細定義見P1）。生物技術(shù)藥物的觀點及分類。答：1）指采納DNA重組技術(shù)或其余生物技術(shù)生產(chǎn)的用于預(yù)防、治療和診療疾病的藥物，主假如重組蛋白或核酸類藥物。2）a.依據(jù)用途：預(yù)防、診療、治療；b.按作用種類：細胞因子類、激素類、酶類、疫苗、單克隆抗體類、反義核酸、RNA擾亂類、基因治療藥物；c.依據(jù)生化特征：多肽類、蛋白質(zhì)類、核酸類、聚乙二醇化多肽或蛋白質(zhì)。生物技術(shù)藥物在理化性質(zhì)、藥理學(xué)與作用、生產(chǎn)制備和質(zhì)量控制方面的特征。答：1）理化性質(zhì)（從藥物多是蛋白質(zhì)或核酸出發(fā)）：a.相對分子質(zhì)量大；b.結(jié)構(gòu)復(fù)雜；c.穩(wěn)固性差；2）藥理學(xué)作用：a.活性與作用體制明確；b.作用針對性強；c.毒性低；d.

體內(nèi)半衰期短；e.有種屬特異性；f.可產(chǎn)生免疫原性；

3）生產(chǎn)制備特征：

a.

藥物分子在原猜中含量低；

b.原猜中常存在降解目標(biāo)產(chǎn)物的雜質(zhì)；

c.制備工藝條件平和；

d.分別純化困難；e.產(chǎn)品易受有害物質(zhì)污染；4）質(zhì)量控制特征：a.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的特別性；b.制造項下的特別規(guī)定；c.檢定項下的特別規(guī)定。生物技術(shù)制藥的觀點和主要研究內(nèi)容與任務(wù)。答：1）指利用基因工程、細胞工程等生物技術(shù)的原理和方法，來研究、開發(fā)和生產(chǎn)預(yù)防、治療和診療疾病的藥物的一門科學(xué)。2）主要研究內(nèi)容與任務(wù)：a.生物制藥技術(shù)的研究、開發(fā)與應(yīng)用；b.利用生物技術(shù)研究、開發(fā)和生產(chǎn)藥物。第二章：基因工程制藥思慮題簡述基因工程制藥的基來源理和基本流程。答：1）利用重組DNA技術(shù)將外源基因?qū)氲剿拗骶蛩拗骷毎M行大規(guī)模培育和引誘表達以獲取蛋白質(zhì)藥物的過程稱為基因工程制藥。2）目的基因的獲取、表達載體的選擇、目的基因與載體的連結(jié)、重組DNA轉(zhuǎn)入到宿主細胞、重組子的挑選與判定、工程菌的發(fā)酵表達重組蛋白、表達產(chǎn)物的分別純化、重組蛋白制劑的生產(chǎn)。與化學(xué)藥物對比較，基因工程藥物有什么特色？答：a.基因工程藥物是由活細胞代謝產(chǎn)生的；b.基因工程藥物的相對分子質(zhì)量要遠遠大于一般的小分子化學(xué)藥物；c.在制備基因工程藥物時，需要除掉宿主蛋白和核酸殘留，同時還要防備其余物質(zhì)的污染，而化學(xué)藥物大多是經(jīng)過組合合成的，雜質(zhì)是原料殘留及反響副產(chǎn)物等。原核與真核表達系統(tǒng)各有什么優(yōu)弊端？哪些蛋白質(zhì)需要用真核表達系統(tǒng)？答：1）原核表達系統(tǒng)長處：宿主遺傳背景清楚，商品化菌種齊備，方便購置；原核細胞操作簡易、生殖快、周期短；大規(guī)模生產(chǎn)成本低，產(chǎn)量較高；下游純化工藝簡單，易于控制，生產(chǎn)效率高；弊端：缺少蛋白質(zhì)折疊和翻譯后加工系統(tǒng)；分泌能力不足，真核蛋白質(zhì)常形成不溶性的包含體，表達產(chǎn)物需經(jīng)變性、復(fù)性才恢復(fù)生性；有的表達系統(tǒng)，如大腸桿菌有內(nèi)毒素，很難除掉；大腸桿菌中的表達不存在信號肽，產(chǎn)品多為胞內(nèi)產(chǎn)物，提取困難。2）真核表達系統(tǒng)：長處：擁有轉(zhuǎn)錄后加工能力，外源基因能夠是DNA也能夠是cDNA；擁有蛋白質(zhì)折疊和翻譯后加工系統(tǒng)，可形成正確折疊、裝置和糖基化等修飾的蛋白質(zhì)；但是重組蛋白分泌表達，有益于純化；弊端：生長遲緩、操作復(fù)雜、產(chǎn)量較低、生產(chǎn)成本較高等。3）某些需要修飾的蛋白質(zhì)需要采納真核表達系統(tǒng)。4.重組蛋白類藥物的質(zhì)量控制要考慮哪幾個方面?答：蛋白質(zhì)含量測定、純度檢查、理化性質(zhì)的判定（分子量、等電點、序列、肽圖、二硫鍵、氨基酸構(gòu)成）、生物學(xué)活性判定、內(nèi)毒素剖析、宿主蛋白與核酸殘留剖析。基因工程藥物怎樣提升其療效？此后的發(fā)展趨向有哪些？答：1）提升蛋白質(zhì)藥物的穩(wěn)固性；減少蛋白質(zhì)藥物的免疫原性；延伸半衰期；提升組織的特異性。2）提升基因工程藥物的產(chǎn)量；一些此刻還沒有使用基因工程的手段的藥物，實現(xiàn)基因工程化生產(chǎn)；建立突變體，改造已知的藥物，加強療效，減少臨床上療效弱、易產(chǎn)生抗性等不足。第三章：動物細胞工程制藥思慮題離體培育的動物細胞有哪些種類？答：貼壁細胞、懸浮細胞和兼性貼壁細胞。生產(chǎn)用動物細胞有哪些種類？各有何特色？答：1）原代細胞：直接取自動物組織器官,經(jīng)過粉碎消化而獲取的細胞懸液。需要大批動物，花錢、費勞力。2）傳代細胞系：染色體組型是2n核型；貼壁依靠，接觸克制；可傳代培育50代；無致癌性。3）轉(zhuǎn)變細胞系：轉(zhuǎn)變過程能夠是自覺的和人工的，也可從腫瘤組織中獲取；具備無窮的生命力；較短的倍增時間；較低的培育條件要求；合適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的要求；基因工程藥物表達的宿主細胞，主假如轉(zhuǎn)變細胞。4）工程細胞系：利用細胞交融技術(shù)或基因工程技術(shù)對轉(zhuǎn)變細胞系的遺傳物質(zhì)進行修飾改造或重組，獲取的擁有穩(wěn)固遺傳特征的細胞系。常用的動物細胞培育基有哪幾類？答：天然培育基、合成培育基及無血清培育基。動能細胞大規(guī)模培育有哪幾種方式？答：懸浮培育法、微載體培育法、多孔載體培育法、微囊化培育法、中空纖維培育法。利用動物細胞生產(chǎn)的藥物主要有哪些？答：疫苗、單克隆抗體、激素、淋巴因子、多肽生長因子、酶類等。第四章：抗體工程制藥思慮題傳統(tǒng)的鼠抗體在治療應(yīng)用上有哪些限制？答：傳統(tǒng)的鼠抗體在人體中頻頻使用會出現(xiàn)人抗鼠抗體反響（HAMA），致使抗體在人體內(nèi)會快速被消除，半衰期縮短，甚至出現(xiàn)出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反響。怎樣對鼠源性單抗進行改造？答：將抗體的Fc段用人源替代，僅保存CDR區(qū)（超可變區(qū)）是鼠源的，即為結(jié)構(gòu)成嵌合抗體；或許生產(chǎn)全人源化抗體。怎樣制備雜交瘤細胞？答：用免疫原與免疫小鼠，從小鼠體內(nèi)獲取淋巴B細胞，制成細胞懸液，而后與骨髓瘤細胞一同混淆，使用聚乙二醇引誘細胞交融，將交融后的細胞混淆液在HAT選擇性培育基上生長，在培育基上生長的即為雜交瘤細胞，進行抗體檢測和克隆化培育，能夠獲取既能夠產(chǎn)生單調(diào)性抗體，又能夠無窮增殖的雜交瘤細胞。在制備單抗時為何要進行兩次挑選？答：第一次挑選：獲取淋巴B細胞與骨髓瘤細胞的交融細胞；第二次挑選：獲取能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞。制備單抗時為何要采納B淋巴細胞與骨髓瘤細胞交融形成雜交細胞？答：能夠產(chǎn)生抗體的淋巴B細胞不可以夠無窮增殖，而骨髓瘤在體外培育擁有無窮增殖的特征，但是不可以產(chǎn)生抗體，將兩者交融，交融細胞繼承了兩個親代細胞的特征，形成了能夠產(chǎn)生抗體又能夠無窮增殖。第五章：疫苗及其制備技術(shù)思慮題簡述疫苗的觀點、構(gòu)成及其作用原理。答：1）是將病原微生物（如細菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預(yù)防傳得病的自動免疫制劑。2）構(gòu)成：擁有免疫保護性的抗原，如蛋白質(zhì)、多肽、多糖及核酸等，與免疫佐劑混淆制成。3）當(dāng)機體經(jīng)過注射或口服等門路接種疫苗后，疫苗中的抗原分子就會發(fā)生免疫原性作用，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生高效價特異性的免疫保護物質(zhì)，如特異性抗體、免疫細胞及細胞因子等，當(dāng)機體再次接觸到同樣的抗原時候，機體的免疫系統(tǒng)便會依循免疫記憶，快速制造出更多的保護物質(zhì)來阻斷病原菌的入侵，進而使機體獲取針對病原體特異性的免疫力，使其免受損害而獲取保護。傳統(tǒng)的滅活疫苗和減毒活疫苗在實質(zhì)應(yīng)用中存在哪些限制？答：傳統(tǒng)的減毒活疫苗，假如減毒程度不夠，在使用時有致病的可能性，過分減毒又會使得免疫原性不足或喪失，失掉活疫苗的效勞。滅活疫苗經(jīng)常需要多次接種，抗體滴度隨時間而降落。簡述基因工程亞單位疫苗的主要特色及制備方法。答：1）長處：產(chǎn)量高、純度高、安全性好，用于難以培育或擁有潛伏致癌性病毒的疫苗制備。弊端：生產(chǎn)成本比較高（純化），產(chǎn)品研發(fā)成本高，免疫接種成本高（多次注射），與傳統(tǒng)疫苗對比，免疫成效較差。2）制備方法：在分別出病原體特異抗原編碼基因的基礎(chǔ)上，將外源基因轉(zhuǎn)入此外一個非致病微生物或細胞中表達，而后經(jīng)過分別純化而獲取特異的蛋白質(zhì)。表達系統(tǒng)有大腸桿菌、酵母菌和高等植物。何為治療性疫苗？請比較治療性疫苗與預(yù)防性疫苗的主要差別？答：1）治療性疫苗是指在已感得病原微生物或已患有某些疾病的機體中，經(jīng)過引誘特異性的免疫應(yīng)答