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生物化學(xué)內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)2014年8月緒論教課目標(biāo)與要求:1、認(rèn)識(shí)生物化學(xué)的發(fā)展史,明確生物化學(xué)的觀點(diǎn)、任務(wù);2、認(rèn)識(shí)生物化學(xué)與各學(xué)科之間的聯(lián)系及研究生物化學(xué)現(xiàn)實(shí)意義;3、認(rèn)識(shí)生物化學(xué)與其余學(xué)科的關(guān)系、應(yīng)用與遠(yuǎn)景和學(xué)習(xí)方法。教課要點(diǎn):生物化學(xué)的觀點(diǎn)、研究對(duì)象和內(nèi)容教課難點(diǎn):生物化學(xué)的研究?jī)?nèi)容教課時(shí)數(shù):1學(xué)時(shí)教課手段:講解法,利用多媒體與傳統(tǒng)方法的相聯(lián)合。教課內(nèi)容:一、生物化學(xué)的觀點(diǎn)、研究對(duì)象和內(nèi)容1、生物化學(xué)是介于生物和化學(xué)之間的一門邊沿科學(xué),它是用化學(xué)的理論和方法作為主要手段來(lái)研究生命現(xiàn)象,進(jìn)而揭露生命的神秘。它是從分子水平來(lái)研究生物體(包含人類、動(dòng)物、植物和微生物)內(nèi)基本物質(zhì)的化學(xué)構(gòu)成和生命活動(dòng)所進(jìn)行的化學(xué)變化(即代謝反響)的規(guī)律及其與生理機(jī)能的關(guān)系的一門科學(xué)。生物化學(xué)的任務(wù)就是研究構(gòu)成生物體基本物質(zhì)的性質(zhì),構(gòu)造與功能,以及這些物質(zhì)在生命活動(dòng)過(guò)程中所進(jìn)行的化學(xué)變化的規(guī)律及其與生理機(jī)能的關(guān)系,進(jìn)而說(shuō)明生命現(xiàn)象的實(shí)質(zhì),并把這些知識(shí)應(yīng)用到社會(huì)實(shí)踐和生產(chǎn)實(shí)踐中去,以達(dá)到征服自然和改造自然的目的。2、生物化學(xué)研究的主要內(nèi)容1).生物體的物質(zhì)構(gòu)成、構(gòu)造與功能:高等生物體主要由蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類以及水、無(wú)機(jī)鹽等構(gòu)成,經(jīng)過(guò)對(duì)生物大分子構(gòu)造的理解,揭露構(gòu)造與功能之間的關(guān)系。2).物質(zhì)代謝與調(diào)控:物質(zhì)代謝的基本過(guò)程主要包含三大步驟:消化、汲取→中間代謝→排泄。此中,中間代謝過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的,是最為復(fù)雜的化學(xué)變化過(guò)程,它包含合成代謝,分解代謝,物質(zhì)互變,代謝調(diào)控,能量代謝幾方面的內(nèi)容。3).遺傳信息的傳達(dá)與表達(dá):對(duì)生物體遺傳與生殖的分子體制的研究,也是現(xiàn)代生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究的一個(gè)重要內(nèi)容。4).組織與器官機(jī)能生物化學(xué):生命有機(jī)體是一個(gè)一致協(xié)調(diào)整體。二、生物化學(xué)的發(fā)展第一階段從19世紀(jì)末到20世紀(jì)30年月,主假如靜態(tài)的描繪性階段,對(duì)生物體各樣構(gòu)成成分進(jìn)行分別、純化、構(gòu)造測(cè)定、合成及理化性質(zhì)的研究。此中菲舍爾測(cè)定了好多糖和氨基酸的構(gòu)造,確立了糖的構(gòu)型,并指出蛋白質(zhì)是以肽鍵連結(jié)的。1926年薩姆納制得了脲酶結(jié)晶,并證明它是蛋白質(zhì)。第二階段約在20世紀(jì)30~50年月,主要特色是研究生物體內(nèi)物質(zhì)的變化,即代謝門路,所以稱動(dòng)向生化階段。此間突出成就是確立了糖酵解、三羧酸循環(huán)以及脂肪分解等重要的分解代謝門路。對(duì)呼吸、光合作用以及腺苷三磷酸(ATF)在能量變換中的要點(diǎn)地點(diǎn)有了較深入的認(rèn)識(shí)。第三階段是從20世紀(jì)50年月開(kāi)始,主要特色是研究生物大分子的構(gòu)造與功能。生物化學(xué)在這一階段的發(fā)展,以及物理學(xué)、技術(shù)科學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞學(xué)等其余學(xué)科的浸透,產(chǎn)生了分子生物學(xué),并成為生物化學(xué)的主體。三、生物化學(xué)與其余學(xué)科的關(guān)系世紀(jì)從古人們主假如經(jīng)過(guò)生物體內(nèi)的化學(xué)變化來(lái)認(rèn)識(shí)生物體的生理機(jī)能,直到二十世紀(jì)初才發(fā)展成為一門獨(dú)立的新式學(xué)科。它是介于生物和化學(xué)之間的一門學(xué)科,它和有機(jī)化學(xué)、生理學(xué)、生物物理學(xué)和分子生物學(xué)等學(xué)科的關(guān)系極為親密。深入認(rèn)識(shí)各樣生物的生長(zhǎng)、生殖、生理、遺傳、衰老、疾病、生命發(fā)源和演化等理解,都需要用生物化學(xué)的原理和方法進(jìn)行商討。所以,生物化學(xué)是各弟子物科學(xué)的基礎(chǔ),特別是生理學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞學(xué)等各科的基礎(chǔ),在分子生物學(xué)中據(jù)有特別重要的地點(diǎn)。若以不一樣的生物為對(duì)象,生物化學(xué)可分為動(dòng)物生化、植物生化、微生物生化、昆蟲(chóng)生化、醫(yī)學(xué)生化等;若以生物體的不一樣組織或過(guò)程為研究對(duì)象,則可分為肌肉生化、神經(jīng)生化、免疫生化、生物力能學(xué)等;因研究的物質(zhì)不一樣,又可分為蛋白質(zhì)化學(xué)、核酸化學(xué)、脂化學(xué)、糖化學(xué)、酶學(xué)平分支;研究各樣天然物質(zhì)的化學(xué)稱為生物有機(jī)化學(xué);研究各樣無(wú)機(jī)物的生物功能的學(xué)科則稱為生物無(wú)機(jī)化學(xué)或無(wú)機(jī)生物化學(xué)。四、生物化學(xué)的應(yīng)用與發(fā)展遠(yuǎn)景介紹生物化學(xué)在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥、食品等各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用。聯(lián)合實(shí)例側(cè)重介紹在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及科研中的應(yīng)用。本世紀(jì)與生物化學(xué)相關(guān)的最重要的領(lǐng)域主要有以下幾個(gè)方面:1)生物大分子構(gòu)造與功能的關(guān)系;(2)生物膜的構(gòu)造與功能;3)機(jī)體自己調(diào)控的分子機(jī)理;(4)生化技術(shù)的創(chuàng)新與發(fā)明;5)功能基因組、蛋白質(zhì)組、代謝組等;6)分子育種與分子農(nóng)業(yè)(工廠化農(nóng)業(yè));(7)生物凈化;8)生物電子學(xué);(9)生化藥物;(10)生物能源的開(kāi)發(fā)等。五、生物化學(xué)的學(xué)習(xí)方法在學(xué)習(xí)理論知識(shí)的同時(shí),注意理論聯(lián)系實(shí)質(zhì),重視實(shí)驗(yàn)教課,掌握各學(xué)科間的交錯(cuò)與聯(lián)系。思慮題:1、生物化學(xué)的觀點(diǎn)及研究的內(nèi)容。課后總結(jié):本次課教課目標(biāo)明確,基礎(chǔ)知識(shí)正確,切合大綱領(lǐng)求。適合地選擇和運(yùn)用教課方法,調(diào)換學(xué)生學(xué)習(xí)的踴躍性使學(xué)生對(duì)生物化學(xué)產(chǎn)生很大興趣。學(xué)生反應(yīng)很好。存在問(wèn)題、改良舉措:一些學(xué)生化學(xué)基礎(chǔ)較差,需復(fù)習(xí)相關(guān)知識(shí)。第二章蛋白質(zhì)化學(xué)教課目標(biāo)與要求1、掌握蛋白質(zhì)的觀點(diǎn)和化學(xué)構(gòu)成;蛋白質(zhì)的基本構(gòu)造單位——氨基酸的分類及構(gòu)造;蛋白質(zhì)各級(jí)分子構(gòu)造的內(nèi)容和特色。2、熟習(xí)氨基酸、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及分別判定方法。3、認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)的分子構(gòu)造與功能的關(guān)系。教課要點(diǎn):蛋白質(zhì)的分子構(gòu)造、主要性質(zhì)以及構(gòu)造與功能的關(guān)系,蛋白質(zhì)的幾種二級(jí)構(gòu)造、超二級(jí)構(gòu)造與構(gòu)造域。教課難點(diǎn):蛋白質(zhì)的幾種二級(jí)構(gòu)造、超二級(jí)構(gòu)造與構(gòu)造域。教課時(shí)數(shù):8學(xué)時(shí)教課方法:講解法,利用多媒體與傳統(tǒng)方法的相聯(lián)合。教課內(nèi)容2.1蛋白質(zhì)分類一、蛋白質(zhì)的化學(xué)構(gòu)成與分類1、元素構(gòu)成碳50%、氫7%、氧23%、氮16%、硫0.3%微量的磷、鐵、銅、碘、鋅、鉬凱氏定氮:均勻含氮16%,粗蛋白質(zhì)含量=蛋白氮×6.252、氨基酸構(gòu)成氨基酸是蛋白質(zhì)的基本構(gòu)成單位,蛋白質(zhì)主要由20種常有氨基酸構(gòu)成,此中有8種人體不可以合成的氨基酸一定由食品中獲取,為人體必要氨基酸,評(píng)論蛋白質(zhì)食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值主要要看它的必要氨基酸的含量。別的蛋白質(zhì)中還有一些罕有氨基酸,如羥基脯氨酸、賴氨酸,甲基甘氨酸、賴氨酸等,他們都是主要氨基酸的衍生物,在一些特別的蛋白及組織中發(fā)揮作用。二、蛋白質(zhì)的分類依據(jù)生物學(xué)功能分:酶、抗體、運(yùn)輸?shù)鞍?、激素等蛋白質(zhì)功能的多樣性1、酶2、構(gòu)造成分(結(jié)締組織的膠原蛋白、血管和皮膚的彈性蛋白、膜蛋白)3、儲(chǔ)藏(卵清蛋白、種子蛋白)4、物質(zhì)運(yùn)輸(血紅蛋白、Na+K+ATPase、葡萄糖運(yùn)輸載體、脂蛋白、電子傳達(dá)體)5、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)(肌肉縮短的肌球蛋白、肌動(dòng)蛋白)6、激素功能(胰島素)7、防守(抗體、皮膚的角蛋白、血凝蛋白)8.接受、傳達(dá)信息(受體蛋白,味覺(jué)蛋白)9.調(diào)理、控制細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、和遺傳信息的表達(dá)(組蛋白、隔絕蛋白依據(jù)化學(xué)構(gòu)成成分分類:簡(jiǎn)單蛋白:僅由aa構(gòu)成聯(lián)合蛋白:簡(jiǎn)單蛋白與其余生物分子的聯(lián)合物。依據(jù)分子形狀分類:球蛋白:長(zhǎng)/寬≤3~4,血紅蛋白纖維蛋白:長(zhǎng)/寬>10,血纖蛋白、絲蛋白膜蛋白質(zhì):生物膜構(gòu)成2.2蛋白質(zhì)的基本構(gòu)造單位—氨基酸蛋白質(zhì)的水解:蛋白質(zhì)能夠受酸、堿或酶的作用而水解成氨基酸。1、酸水解:用6MHCl或4MH2SO4,105℃回流20小時(shí)即可完整水解。酸水解不惹起氨基酸的消旋,但色氨酸完整被損壞,絲氨酸和蘇氨酸部分損壞,天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解。如樣品含有雜質(zhì),在酸水解過(guò)程中常產(chǎn)生腐黑質(zhì),使水解液變黑。(用3mol/L對(duì)甲苯磺酸取代鹽酸,獲取色氨酸許多,可像絲氨酸和蘇氨酸同樣用外推法求其含量。)2、堿水解:用5MNaOH,水解10-20小時(shí)可水解完整。堿水解使氨基酸消旋,很多氨基酸被損壞,但色氨酸不被損壞。常用于測(cè)定色氨酸含量。(可加入淀粉以防備氧化。)3、酶水解:酶水解既不損壞氨基酸,也不惹起消旋。但酶水解時(shí)間長(zhǎng),反響不完整。一般用于部分水解,若要完整水解,需要用多種酶共同作用。一、氨基酸的構(gòu)造、分類氨基酸的構(gòu)造特色:都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基且連在同一個(gè)碳原子上。兩個(gè)例外:(1)脯氨酸和羥脯氨酸是α-亞氨基酸;(2)除甘氨酸沒(méi)有手性碳原子外,沒(méi)有旋光性,其余蛋白質(zhì)氨基酸均屬于L型。氨基酸的分類:1)依據(jù)R基團(tuán)的化學(xué)構(gòu)造:脂肪族氨基酸、芬芳族氨基酸、雜環(huán)族氨基酸2)依據(jù)R基團(tuán)的酸堿性分為:中性氨基酸、酸性氨基酸、堿性氨基酸3)依據(jù)R基團(tuán)的帶電性質(zhì)分為:疏水性氨基酸、帶電荷極性氨基酸、不帶電荷的極性氨基酸。3.蛋白質(zhì)中氨基酸的修飾:4-羥脯氨酸4.非蛋白質(zhì)中的氨基酸:L-鳥(niǎo)氨酸、L-瓜氨酸不對(duì)稱碳原子:是連結(jié)四個(gè)不一樣原子或基團(tuán)的碳原子。旋光異構(gòu)現(xiàn)象:當(dāng)光波經(jīng)過(guò)尼克棱鏡時(shí),因?yàn)槔忡R的構(gòu)造經(jīng)過(guò)的不過(guò)沿某一平面振動(dòng)的光波,其余都被遮斷,這類光稱為“平面偏振光”。當(dāng)它經(jīng)過(guò)擁有眩光性質(zhì)的某異構(gòu)物溶液時(shí),則偏振面會(huì)向右或向左旋轉(zhuǎn)?!?”和“-”分別表示右旋和左旋。二、氨基酸的性質(zhì)氨基酸的化學(xué)性質(zhì)取決于其分子中的羧基、氨基、側(cè)鏈基團(tuán)以及這些基團(tuán)的互相影響。1、一般物理性質(zhì)溶解度:水中溶解度差異較大,不溶于有機(jī)溶劑。光汲取性:可見(jiàn)光區(qū)無(wú)光汲取,紫外光區(qū)Phe、Thy、Trp有光汲取。旋光性:AA的物理常數(shù),與構(gòu)造、PH值相關(guān)。味感:不一樣滋味(與構(gòu)型相關(guān)).2、兩性電離及等電點(diǎn)各種氨基酸的pI值范圍:中性氨基酸的等電點(diǎn)一般在5.0~6.5之間,酸性氨基酸為2.7~3.2,堿性氨基酸為9.5~10.7。[思慮題]為何中性氨基酸的等電點(diǎn)不等于7?中性氨基酸的羧基的酸式電離略大于其氨基的堿式電離,因此溶液的pH值一定達(dá)到偏酸時(shí),才能使其兩種電離趨勢(shì)恰巧相等。3、化學(xué)性質(zhì):1)與茚三酮的反響:Pro產(chǎn)生黃色物質(zhì),其余為藍(lán)紫色。在570nm(藍(lán)紫色)或440nm(黃色)定量測(cè)定(幾μg)。反響后藍(lán)紫色的深度或二氧化碳的體積可作為a-氨基酸定量剖析的依照。肽類和蛋白質(zhì)也有此反響。因?yàn)榉错懱貏e敏捷,是判定氨基酸、肽類和蛋白質(zhì)最快速而又簡(jiǎn)易的方法,寬泛用于a-氨基酸、肽類和蛋白質(zhì)的比色測(cè)定或紙層析與薄層層析的顯色。2)與甲醛的反響:氨基酸的甲醛滴定法3)與2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反響用于測(cè)定蛋白質(zhì)或多肽N-端氨基酸的方法,稱為二硝基苯法,簡(jiǎn)稱為DNP法。利用此法不停降解蛋白質(zhì)或多肽,頻頻用DNFB標(biāo)志其氨基尾端,便可確立蛋白質(zhì)或多肽鏈中氨基酸的擺列次序。(4)與異硫氰酸苯酯(PITC)的反響在弱堿性條件下,氨基酸的a-氨基易于異硫氰酸酯(PITC)反響,生成苯胺基硫甲酰衍生物,后者在硝基甲烷中與酸作用而環(huán)化,生成苯乙內(nèi)酰硫脲(PTH)衍生物。蛋白質(zhì)多肽鏈N端氨基酸的a-氨基也能夠與PITC發(fā)生上述反響生成OTH-肽,在酸性溶液中開(kāi)釋出尾端的PTH-氨基酸和比本來(lái)少一個(gè)氨基酸殘基的多肽鏈,所得的PTH-氨基酸用層析法堅(jiān)定,即可確立肽鏈N端氨基酸的種類。依據(jù)此原理設(shè)計(jì)出的蛋白質(zhì)次序測(cè)定儀,大大提升了蛋白質(zhì)測(cè)序的效率。(5)與亞硝酸反響:α-氨基酸與亞硝酸作用,可開(kāi)釋氮?dú)狻H舳繙y(cè)定反響中所開(kāi)釋出的N2的體積,即可計(jì)算出氨基酸的含量,此種方法稱為vanSlyke氨基氮測(cè)定法,常用于氨基酸和多肽的定量剖析。(6)與熒光胺反響:依據(jù)熒光強(qiáng)度測(cè)定氨基酸含量(ng級(jí))。激發(fā)波長(zhǎng)λx=390nm,發(fā)射波長(zhǎng)λm=475nm。(7)與5,5′-雙硫基-雙(2-硝基苯甲酸)反響:2.3肽一、肽鍵及肽肽鍵:一個(gè)氨基酸的—羧基與另一個(gè)氨基酸的—氨基縮合脫水而形成的酰胺鍵稱為肽鍵。肽鍵是蛋白質(zhì)分子中氨基酸之間的主要連結(jié)方式。肽:氨基酸經(jīng)過(guò)肽鍵連結(jié)形成的化合物稱為肽,2個(gè)氨基酸形成的肽稱為二肽,10個(gè)以下稱寡肽,10個(gè)以上稱多肽,所以蛋白質(zhì)的構(gòu)造是多肽鏈構(gòu)造。二、肽的命名及構(gòu)造介紹肽的命名原則和表示方法及構(gòu)造。含有游離的α—NH2基一端稱氨基端,或N—尾端,含有游離的α—羧基尾端稱羧基尾端,或C—尾端。三、天然存在的活性寡肽生物體中有很多游離的肽擁有生理功能。(以谷胱甘肽為例介紹谷胱甘肽(glutathione)可命名為γ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸。)2.4蛋白質(zhì)的分子構(gòu)造蛋白質(zhì)的構(gòu)造可分為四個(gè)層次來(lái)研究。一、蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造(一)蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造(介紹蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造的觀點(diǎn))(二)蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造的測(cè)定(簡(jiǎn)單介紹蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的策略,聯(lián)合圖介紹牛胰島素和牛胰核糖核酸酶的一級(jí)構(gòu)造)二、蛋白質(zhì)的二級(jí)構(gòu)造第一介紹基本觀點(diǎn):蛋白質(zhì)的二級(jí)構(gòu)造、構(gòu)象,并將構(gòu)象和構(gòu)型兩個(gè)觀點(diǎn)加以比較。(一)肽鍵的幾何學(xué)(介紹肽平面的3個(gè)特色)肽單位是一個(gè)剛性的平面;肽平面中羰基上的氧與亞氨基上的氫幾乎老是處于相反地點(diǎn);3.Cα和亞氨基N及Cα與羰基C之間的鍵是單鍵,可自由旋轉(zhuǎn)。(二)蛋白質(zhì)的二級(jí)構(gòu)造要點(diǎn)介紹α—螺旋構(gòu)造和β—折疊構(gòu)造α—螺旋構(gòu)造(聯(lián)合圖介紹其構(gòu)造特色)1)α—螺旋構(gòu)造是一個(gè)近似棒狀的螺旋構(gòu)造,R在外側(cè),右手螺旋。2)每個(gè)螺旋有3.6個(gè)氨基酸,螺距為0.54nm,氨基酸之間的軸心距為0.15nm,每個(gè)氨基酸殘基旋轉(zhuǎn)100度。(3)氫鍵是保持α—螺旋構(gòu)造穩(wěn)固的主要作使勁。β—折疊構(gòu)造(聯(lián)合圖介紹其構(gòu)造特色)(1)多肽鏈幾乎完整伸展,相鄰氨基酸之間軸心距為0.35nm;2)相鄰肽鏈主鏈上的C=O和N—H之間形成氫鍵,保持構(gòu)造的穩(wěn)固;3)肽鏈的擺列能夠是平行或反平行的。β—轉(zhuǎn)角構(gòu)造(聯(lián)合圖介紹其觀點(diǎn))β—突出無(wú)規(guī)則卷曲三、超二級(jí)構(gòu)造和構(gòu)造域介紹兩個(gè)觀點(diǎn)。超二級(jí)構(gòu)造是二級(jí)構(gòu)造的齊集體,有不一樣種類,拜見(jiàn)書(shū)中的圖。構(gòu)造域是介于二級(jí)構(gòu)造和三級(jí)構(gòu)造之間的一種構(gòu)造層次(見(jiàn)圖)。四、蛋白質(zhì)的三級(jí)構(gòu)造(一)蛋白質(zhì)的三級(jí)構(gòu)造及特色介紹蛋白質(zhì)三級(jí)構(gòu)造的觀點(diǎn),以肌紅蛋白為例說(shuō)明蛋白質(zhì)三級(jí)構(gòu)造的特色。剖析肌紅蛋白的一級(jí)構(gòu)造、二級(jí)構(gòu)造、三級(jí)構(gòu)造,說(shuō)明蛋白質(zhì)的構(gòu)造是怎樣從初級(jí)構(gòu)造發(fā)展到高級(jí)構(gòu)造的。(二)保持蛋白質(zhì)構(gòu)象的作使勁要點(diǎn)介紹次級(jí)鍵,包含氫鍵、離子鍵、疏水鍵和范德華力的觀點(diǎn)。說(shuō)明次級(jí)鍵在穩(wěn)固蛋白質(zhì)空間構(gòu)象中的重要作用。五、蛋白質(zhì)的四級(jí)構(gòu)造介紹蛋白質(zhì)四級(jí)構(gòu)造的觀點(diǎn),以血紅蛋白為例介紹蛋白質(zhì)四級(jí)構(gòu)造的特色。剖析血紅蛋白的一級(jí)構(gòu)造、二級(jí)構(gòu)造、三級(jí)構(gòu)造、四級(jí)構(gòu)造。比較肌紅蛋白和血紅蛋白的同樣點(diǎn)和不一樣點(diǎn)及性質(zhì)的差異。2.5蛋白質(zhì)構(gòu)造與功能的關(guān)系一、蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造與功能的關(guān)系經(jīng)過(guò)以下幾個(gè)方面說(shuō)明蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造與功能的關(guān)系:(一)分子病與構(gòu)造的關(guān)系(二)同源蛋白質(zhì)中氨基酸次序的種屬差異(三)蛋白質(zhì)的激活二、蛋白質(zhì)的空間構(gòu)造與功能的關(guān)系從以下幾個(gè)方面說(shuō)明蛋白質(zhì)空間構(gòu)造與功能之間的關(guān)系:(一)核糖核酸酶的變性與復(fù)性(二)蛋白質(zhì)的變構(gòu)現(xiàn)象經(jīng)過(guò)以上實(shí)例說(shuō)明蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造和空間構(gòu)造與蛋白質(zhì)的功能有相適應(yīng)性和一致性。蛋白質(zhì)的特異構(gòu)造決定了蛋白質(zhì)的特別功能。2.6蛋白質(zhì)的重要性質(zhì)一、蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)和等電點(diǎn)蛋白質(zhì)是由氨基酸構(gòu)成的,所以蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),各樣蛋白質(zhì)有其特異的等電點(diǎn)。介紹蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的觀點(diǎn)以及應(yīng)用。電泳:帶電顆粒在電場(chǎng)中挪動(dòng)的現(xiàn)象。分子大小不一樣的蛋白質(zhì)所帶凈電荷密度不一樣,遷徙率即異,在電泳時(shí)能夠分開(kāi)。蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)偏酸溶液中帶正電荷,在偏堿溶液中帶負(fù)電荷,在等電點(diǎn)pH時(shí)為兩性離子。二、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)布郎運(yùn)動(dòng)、丁道爾現(xiàn)象、電泳現(xiàn)象,不可以透過(guò)半透膜,擁有吸附能力蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)固的原由:1)表面形成水膜(水化層)2)帶同樣電荷。三、蛋白質(zhì)的積淀反響介紹以下觀點(diǎn):蛋白質(zhì)的積淀作用、鹽析、鹽溶、分段鹽析。介紹保持蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)固的原由以及蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)在生產(chǎn)和研究中的應(yīng)用。四、蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性要點(diǎn)介紹變性和復(fù)性的觀點(diǎn)以及理化性質(zhì)的改變,聯(lián)合生活和生產(chǎn)中的實(shí)例加以解說(shuō)。請(qǐng)學(xué)生舉出生活中碰到的蛋白質(zhì)變性或復(fù)性的例子,并說(shuō)明其實(shí)質(zhì)。五、蛋白質(zhì)的顏色反響P55作業(yè)與思慮題:作業(yè):1蛋白質(zhì)構(gòu)造層次的觀點(diǎn)?保持蛋白質(zhì)空間構(gòu)造穩(wěn)固的作使勁有哪些?氨基酸的構(gòu)造式。教課反省建議:在學(xué)習(xí)氨基酸的構(gòu)造時(shí)聯(lián)系有機(jī)化學(xué)的羧酸構(gòu)造;在學(xué)習(xí)氨基酸的化學(xué)性質(zhì)時(shí)聯(lián)系氨基酸的構(gòu)造,再將氨基酸的構(gòu)造和特征與蛋白質(zhì)的構(gòu)造和特征聯(lián)系起來(lái)。同時(shí)注意氨基酸的某些特別反響在蛋白質(zhì)的合成工作中的實(shí)質(zhì)意義,認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)的重要生物學(xué)意義和生產(chǎn)實(shí)踐意義。第三章核酸教課目標(biāo)與要求:掌握核酸的構(gòu)造與功能,重要的理化性質(zhì)。教課要點(diǎn):核酸的種類和化學(xué)構(gòu)成,核酸的分子構(gòu)造和主要性質(zhì),DNA的雙螺旋構(gòu)造模型和tRNA的“三葉草”構(gòu)造。教課難點(diǎn):DNA的雙螺旋構(gòu)造模型教課時(shí)數(shù):6學(xué)時(shí)教課方法:利用多媒體與傳統(tǒng)方法的相聯(lián)合教課內(nèi)容:3.1核酸的分類及構(gòu)成一、分類1.核酸是由堿基、戊糖、磷酸構(gòu)成的,按其所含的戊糖種類的不一樣分為兩大類:核糖核酸(ribonucleicacid即RNA):戊糖為核糖脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid即DNA):戊糖為脫氧核糖2.核糖核酸(RNA)按其功能的不一樣分為三大類:1)核糖體RNA(ribosomalRNAs,rRNAs),rRNAs的功能是作為核糖體的重要構(gòu)成成分參加蛋白質(zhì)的生物合成。原核生物中主要有5SrRNAs、16SrRNAs和23SrRNAs三種,真核生物中主要有5SrRNAs、5.8SrRNAs、18SrRNAs和28SrRNAs四種。2)信使RNA(messengerRNAs,mRNAs)。mRNAs是以DNA為模板合成的,又是蛋白質(zhì)合成的模板。3)轉(zhuǎn)移RNAs(transferRNAs,tRNAs)。tRNAs是最小的RNA分子。它的主要功能是在蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程中把mRNA的信息正確地翻譯成蛋白質(zhì)中氨基酸次序的適配器(adapter)分子,擁有轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的作用。4)別的,在細(xì)胞中還含有其余的RNA,如真核細(xì)胞中還有少許核內(nèi)小RNA(smallnuclearRNA,縮寫(xiě)成snRNA)、染色體RNA(chRNA)。二、散布(一)DNA的散布核酸寬泛散布于各種生物細(xì)胞中。在真核細(xì)胞中,95%~98%的DNA散布于細(xì)胞核中,在原核細(xì)胞中,DNA存在于細(xì)胞質(zhì)中的核質(zhì)區(qū)。(二)RNA的散布RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,約占總量的90%,細(xì)胞核中也有少許的存在,約占總量的10%。上述兩大類核酸在細(xì)胞內(nèi)的散布狀況是與它們的功能相一致的。細(xì)胞中的DNA起著儲(chǔ)存和傳達(dá)遺傳信息的作用。細(xì)胞質(zhì)中的RNA在核內(nèi)接受了DNA的“指令”,到細(xì)胞質(zhì)指導(dǎo)并直接參加蛋白質(zhì)的合成。三、核酸的化學(xué)構(gòu)成核酸的基本構(gòu)造單位是核苷酸(nucleotide)。部分水解可產(chǎn)生核苷酸,如經(jīng)完整水解則產(chǎn)生磷酸、堿基和戊糖。一、堿基核酸中的堿基有兩類:嘌呤堿(pyrimidine)和嘧啶堿(purine)。它們是含氮的雜環(huán)化合物,稱為堿基,也稱含氮堿。(一)嘌呤堿聯(lián)合教材中嘌呤堿的構(gòu)造分子式,介紹DNA和RNA中含有的兩種同樣的主要嘌呤堿:腺嘌呤和鳥(niǎo)嘌呤,分別用A和G表示。(二)嘧啶堿聯(lián)合教材中嘧啶堿的構(gòu)造分子式,介紹核酸中的三種嘧啶堿,即胞嘧啶cytosine)、尿嘧啶(uracil)和胸腺嘧啶(thymine),分別用C、U和T表示。RNA中含有的是胞嘧啶和尿嘧啶,DNA含有胞嘧啶和胸腺嘧啶。二、戊糖核酸是按其所含戊糖不一樣而分為兩大類的。DNA所含的戊糖是D-2'-脫氧核糖,RNA所含的戊糖是D-核糖。三、磷酸任何核酸都含有磷酸,參加形成3',5'-磷酸二酯鍵,使核酸連成多核苷酸鏈。四、核苷核苷(由戊糖和堿基縮合而成,并以N-C糖苷鍵連結(jié)。核苷能夠分紅核糖核苷與脫氧核糖核苷兩大類。五、核苷酸核苷中的戊糖羥基被磷酸酯化,就形成核苷酸。核苷酸分紅核糖核苷酸與脫氧核糖核苷酸兩大類。生物體內(nèi)存在的游離核苷酸多是5'-核苷酸。用堿水解RNA時(shí),可獲取2'-核糖核苷酸與3'-核糖核苷酸的混淆物。六、細(xì)胞中的游離核苷酸及其衍生物生物體細(xì)胞中還有一些以游離形式存在的核苷酸。如腺嘌呤核苷二磷酸(ADP)和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。別的,在生物細(xì)胞中,還存在著環(huán)化核苷酸,此中研究得最多的是3',5'-環(huán)腺苷酸(cAMP)。3.2脫氧核糖核酸的構(gòu)造一、DNA的堿基構(gòu)成Chargaff定章:1950年1.全部DNA中[A]=[T];[G]=[C]。所以,[A]+[G]=[C]+[T]。2.DNA的堿基構(gòu)成擁有種的特異性,即不一樣生物種的DNA擁有自己獨(dú)到的堿基組成比率(又稱不對(duì)稱率dissymmetryratio)。同一種生物DNA的堿基構(gòu)成沒(méi)有組織和器官的特異性。年紀(jì)、營(yíng)養(yǎng)狀況、環(huán)境等要素不影響DNA的堿基構(gòu)成。二、DNA的一級(jí)構(gòu)造核酸構(gòu)造依據(jù)一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)分級(jí)議論。核酸的一級(jí)構(gòu)造是它的共價(jià)構(gòu)造和核苷酸次序,是由數(shù)目極其宏大的四種脫氧核糖核苷酸,經(jīng)過(guò)3',5'-磷酸二酯鍵連結(jié)起來(lái)的直線形或環(huán)形多聚體。多核苷酸的幾種縮寫(xiě)法:因?yàn)镈NA鏈?zhǔn)怯袠O性的,書(shū)寫(xiě)堿基的次序是從5'-端到3'-端。三、DNA的空間構(gòu)造DNA分子雙螺旋構(gòu)造模型:(一)B-DNA的構(gòu)造依據(jù)Watson和Crick所提出的模型(拜見(jiàn)圖3-14),B-DNA擁有以下特色:1.兩條反向平行的多核苷酸鏈環(huán)繞同一中心軸互相環(huán)繞。2.嘌呤堿基與嘧啶堿基位于雙螺旋的內(nèi)側(cè),磷酸與核糖在外側(cè),相互經(jīng)過(guò)3',5'-磷酸二酯鍵相連結(jié),形成DNA分子的骨架。3.雙螺旋的均勻直徑為2nm,兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間相距的高度,即堿基聚積距離為0.34nm,兩個(gè)核苷酸之間的夾角為36°。所以,沿中心軸每旋轉(zhuǎn)一周有10個(gè)核苷酸。每一圈的高度(即螺距)為3.4nm。4.兩條核苷酸鏈依賴相互堿基之間形成的氫鍵相連而聯(lián)合在一同。A與T相當(dāng)對(duì);G與C相當(dāng)對(duì),稱為堿基互補(bǔ)。DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、反轉(zhuǎn)錄等的分子基礎(chǔ)都是堿基互補(bǔ)配對(duì)。對(duì)某些重要特征的議論:1.DNA分子的長(zhǎng)度;2.DNA分子構(gòu)造中的堿基互變異構(gòu)體;3.DNA分子的穩(wěn)固性:主要要素是堿基聚積力、范德華引力。DNA分子的可塑性(二)A-DNA的構(gòu)造A-DNA是當(dāng)降低濕度或在水溶液中加入乙醇,可使B-DNA轉(zhuǎn)變?yōu)锳-DNA。(三)Z-DNA分子的構(gòu)造除了A-DNA和B-DNA之外,自然界中還發(fā)現(xiàn)有一種Z-DNA。四、DNA的三級(jí)構(gòu)造環(huán)狀DNA構(gòu)造進(jìn)一步歪曲成為更復(fù)雜的三級(jí)構(gòu)造。包含線狀DNA形成的紐結(jié)、超螺旋和多重螺旋以及環(huán)狀DNA形成的結(jié)、超螺旋和連環(huán)等多種種類,此中超螺旋是最常有的,所以,DNA的三級(jí)構(gòu)造主假如指雙螺旋進(jìn)一步歪曲形成的超螺旋。超螺旋意味著在螺旋的基礎(chǔ)上再螺旋。DNA超螺旋的性質(zhì)是能夠定量的,這類量化的研究可引用拓?fù)鋵W(xué)知識(shí),以加深對(duì)DNA分子構(gòu)象和功能的認(rèn)識(shí)。議論環(huán)形DNA的一些重要的拓?fù)鋵W(xué)特征。介紹連環(huán)數(shù)(L)、環(huán)繞數(shù)(T)、超螺旋周數(shù)或歪曲數(shù)(W)的觀點(diǎn);介紹L、T、W三者之間的關(guān)系為:L=T+W。3.3核糖核酸一、RNA的構(gòu)造RNA是細(xì)胞內(nèi)核酸的第二種主要種類,它在把DNA中的遺傳信息變?yōu)楣δ苄缘鞍椎倪^(guò)程中起中介作用。構(gòu)成RNA的核苷酸也是以3',5'-磷酸二酯鍵相互連結(jié)起來(lái)的。天然RNA只有局部地區(qū)為雙螺旋構(gòu)造,稱為莖環(huán)構(gòu)造。二、分別議論三類主要的RNA分子構(gòu)造。(一)tRNA1.tRNA的一級(jí)構(gòu)造(tRNA的一級(jí)構(gòu)造有五個(gè)特色)。(第二次課達(dá)成以上內(nèi)容,要點(diǎn)講解相關(guān)DNA一級(jí)構(gòu)造的觀點(diǎn);B-DNA二級(jí)構(gòu)造的觀點(diǎn)及特色,保持二級(jí)構(gòu)造的作使勁)課后要求:①掌握核酸的構(gòu)成,比較DNA與RNA核苷、核苷酸的差異。②掌握DNA一級(jí)構(gòu)造的縮寫(xiě)法;描繪B-DNA二級(jí)構(gòu)造的特色及保持構(gòu)造的穩(wěn)固要素,簡(jiǎn)單描繪Z-DNA、A-DNA的突出特色。③分清DNA雙螺旋與超螺旋的關(guān)系。④聯(lián)合習(xí)題集,練習(xí)相關(guān)DNA構(gòu)造的習(xí)題。tRNA的二級(jí)構(gòu)造聯(lián)合教材的圖解,介紹tRNA的二級(jí)構(gòu)造(呈三葉草形)的四個(gè)基本特色。3.tRNA的三級(jí)構(gòu)造tRNA三級(jí)構(gòu)造的形狀象一個(gè)倒寫(xiě)的L字母。(二)mRNAmRNA是以DNA為模板合成的。
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