1蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是指資料文檔

蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是指蛋白質(zhì)等電點(diǎn)是指在特定條件下，蛋白質(zhì)分子的凈電荷為零的pH值。在生化學(xué)中，蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)常常與其等電點(diǎn)密切相關(guān)。了解蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的概念和特點(diǎn)對(duì)于研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能以及相互作用等方面具有重要意義。蛋白質(zhì)是生物體中最重要的有機(jī)分子之一，它們?cè)诰S持生命活動(dòng)和調(diào)節(jié)生物功能中起到至關(guān)重要的作用。蛋白質(zhì)分子由氨基酸組成，而氨基酸具有酸性基團(tuán)和氨基組分。這些功能基團(tuán)賦子蛋白質(zhì)分子特定的化學(xué)性質(zhì)，例如在特定叫條件下可以帶正電荷或負(fù)電荷。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶于水中時(shí)，化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，其酸性和堿性基團(tuán)可以釋放或接受質(zhì)子(即氫離子)，從而影響蛋白質(zhì)的凈電荷。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分子的凈電荷為零時(shí)，稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)可以通過(guò)計(jì)算或?qū)嶒?yàn)測(cè)定得到。蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定常使用凝膠電泳或電荷分離技術(shù)。在電泳實(shí)驗(yàn)中，蛋白質(zhì)溶液被施加在電場(chǎng)下，會(huì)向正極或負(fù)極遷移。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分子的凈電荷為零時(shí)，遷移速度最慢，達(dá)到等電點(diǎn)。通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)在不同pH值下的遷移率，可以畫(huà)出等電點(diǎn)曲線。蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的確定對(duì)于研究蛋白質(zhì)功能十分重要。在特定的生物環(huán)境中，蛋白質(zhì)可能具有特定的電荷狀態(tài)，影響蛋白質(zhì)的溶解度、穩(wěn)定性、交互作用和酶活性等。通過(guò)了解蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，可以更好地理解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。此外，蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)還可以用于分離和純化蛋白質(zhì)。在離子交換層析等技術(shù)中，選擇合適的pH條件可以幫助將帶有特定電荷的蛋白質(zhì)與其他組分分離開(kāi)來(lái)。因此，對(duì)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的研究對(duì)于生物醫(yī)學(xué)研究和生物技術(shù)應(yīng)用具有重要意義。總而言之，蛋白質(zhì)等電點(diǎn)是蛋白質(zhì)分子在特定條件下凈電荷為零的pH值。通過(guò)了解蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，可以推斷蛋白質(zhì)的電荷狀態(tài)，進(jìn)而理解其結(jié)構(gòu)與功能。蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定不僅在生化學(xué)研究中發(fā)揮重要作用，還可以用于蛋白質(zhì)分離和純化。深入研究蛋白質(zhì)等電點(diǎn)有助于揭示生物體內(nèi)復(fù)雜的生理過(guò)程和疾病發(fā)展機(jī)制，對(duì)于人類健康和疾病治療具有重要的意義。

蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是指由于膜污染現(xiàn)象的復(fù)雜性，對(duì)于控制污染的方法只能做一般性討論。對(duì)于每一具體分離問(wèn)題均需要特殊的處理方法。料液預(yù)處理預(yù)處理是指在原料液過(guò)濾前向其中加入一種或幾種物質(zhì)，使原料液的性質(zhì)或溶質(zhì)的特性發(fā)生變化，或進(jìn)行預(yù)絮凝、預(yù)過(guò)濾、吸附、加阻垢劑、加熱或改變料液pH值等方法，以脫除一些與膜存在相互作用的物質(zhì)，從而提高膜通量。恰當(dāng)?shù)念A(yù)處理有助于降低膜污染、提高膜透過(guò)性和膜的截留性能，減少膜清洗的頻率和難度。（1）預(yù)過(guò)濾去除顆粒物，以防堵塞流道或損傷膜、泵和儀表。作為一種規(guī)則，大于組件內(nèi)最小流道尺寸1/5的粒子必須脫除。用自然沉降、格柵(篩)去除大塊碎片和水中生物。粗篩或水力離心過(guò)濾器可脫除大粒子。浮選脫除輕懸浮物(如浮游生物、微生物等)和輕絮凝體。筒式微濾或多介質(zhì)過(guò)濾去除細(xì)粒子。粗過(guò)濾器分離粒徑大于10μm的顆粒和機(jī)械雜質(zhì)、微生物超濾或微濾去除大腸桿菌和細(xì)菌。氣體分離中采用高效氣-液分離技術(shù)脫除氣體中的固體顆粒、液態(tài)水或液態(tài)烴，包括旋風(fēng)分離器、超濾技術(shù)與毛細(xì)管凝聚技術(shù)結(jié)合的高效過(guò)濾。一般來(lái)講，卷式組件的進(jìn)水應(yīng)經(jīng)20~50μm過(guò)濾，而中空纖維殼層進(jìn)料應(yīng)經(jīng)5μm過(guò)濾。（2）絮凝膠體是直徑<1μm的荷電粒子，如不脫除，會(huì)嚴(yán)重影響膜通量。常用的脫除方法是絮凝或絮凝后進(jìn)行常規(guī)過(guò)濾。常用的絮凝劑有FeCl3、明礬或聚電解質(zhì)(聚合氯化鋁)等。其原理是改變懸浮顆粒的特性來(lái)影響膜通量，其作用是產(chǎn)生蓬松的無(wú)黏聚性的絮狀物來(lái)顯著減輕膜污染；在油水分離中，原料液中加入絮凝劑進(jìn)行預(yù)處理不僅可以提高膜通量，而且能提高膜的截留率，可以用微濾代替常規(guī)的超濾。（3）除有機(jī)物活性炭過(guò)濾可去除痕量油和烴類物質(zhì)。紫外線也可以分解有機(jī)物，對(duì)低分子有機(jī)物的去除，紫外線氧化比離子交換、反滲透更合適臭氧+紫外線處理還有殺菌、使膠狀物微粒化、使膠狀氧化硅氧化分解等效果。（4）調(diào)節(jié)pH值在處理含重金屬離子廢水時(shí)，可預(yù)先加入堿性物質(zhì)調(diào)節(jié)溶液的pH值或加入硫化物或其他一些物質(zhì)，使重金屬離子形成氫氧化物沉淀或難溶性的硫化物或其他物質(zhì)而除去。如投加H2SO4將pH值調(diào)到6左右，去除海水中的二氧化碳，防止膜上形成碳酸鈣垢。為了避免增加SO?2ˉ濃度而形成CaSO4垢，用Cl調(diào)pH值。也可以用NaOH、Na2CO3、BaCl2、石灰去除高價(jià)離子，以沉淀形式脫除。在甲氧頭孢菌素C的發(fā)酵液中加酸，能穩(wěn)定料液黏度和防止菌體污染。對(duì)于蛋白質(zhì)，pH值的調(diào)節(jié)很重要。溶液pH值對(duì)蛋白質(zhì)在水中溶解性、荷電性及構(gòu)形有很大影響。一般來(lái)講，蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)，溶解度最低，偏離等電點(diǎn)時(shí)，溶解度增加，并帶電荷。在等電點(diǎn)時(shí)的蛋白質(zhì)吸附量最高，膜通量最低。因此用膜分離、濃縮蛋白質(zhì)或酶時(shí)，一般把pH值調(diào)至遠(yuǎn)離等電點(diǎn)(以不使蛋白質(zhì)變性失活為限)，結(jié)合選擇合適的膜，可以減輕膜污染。（5）滅菌防止生物污染，用氯氣或次氯酸鹽、臭氧、甲醛、雙氧水、濃亞硫酸氫鈉溶液、異噻唑啉酮等，或者紫外、電子殺菌器。熱處理滅菌時(shí)，需注意熱處理溫度，尤其對(duì)蛋白質(zhì)，要防止高溫下的蛋白質(zhì)變性。（6）除氯反滲透膜不耐氯，在原水進(jìn)入反滲透工藝前投加NaSO3，除氯。（7）除氨合成氨弛放氣中膜法H2回收時(shí)，先用水洗塔除氨。（8）除水從沼氣中分離甲烷時(shí)，先通過(guò)消霧器脫除沼氣夾帶的水氣，因?yàn)樗畷?huì)比甲烷更快透過(guò)膜。（9）離子交換用螯合樹(shù)脂去除多價(jià)離子。（10）加入離子隱蔽劑添加阻垢劑，如六偏磷酸鈉等，減慢成垢速度，避免離子與有機(jī)大分子形成復(fù)合物污染膜，讓體系可在高于飽和溶解度的濃度下操作。（11）加入穩(wěn)定劑主要對(duì)酶育多肽，以防失活。（12）降低粘度在高粘度溶液的過(guò)濾過(guò)程中，可以加入適當(dāng)?shù)脑噭┦谷芤旱恼扯认陆?，提高剪切速率，從而提高膜過(guò)濾性能。（13）加熱或冷卻氣體分離中通過(guò)加熱原料氣使其遠(yuǎn)離露點(diǎn)，避免水蒸氣在膜內(nèi)冷凝，制備無(wú)菌空氣時(shí)，需先將原料空氣加熱至30~35℃，天然氣脫濕則升溫至5~10℃。原料液的預(yù)處理必須考慮體系的特點(diǎn)，對(duì)于不能改變性質(zhì)的體系則不能進(jìn)行預(yù)處理。

什么叫做蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也可以在機(jī)體外進(jìn)行。抗原抗體反應(yīng)的過(guò)程是經(jīng)過(guò)一系列的化學(xué)和物理變化，包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個(gè)階段，以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化。由于抗體主要存在于血清中，在抗原或抗體檢測(cè)中多以血清為試驗(yàn)材料，故將體外抗原抗體的免疫學(xué)反應(yīng)也稱作血清學(xué)反應(yīng)(serologicalreaction)。該反應(yīng)既可用已知的抗原檢測(cè)未知的抗體，這是臨床上常用的血清學(xué)診斷方法；也可用已知的抗體檢測(cè)未知的抗原，如微生物及其代謝產(chǎn)物、激素、藥物鑒定等的檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)反應(yīng)特點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)主要有四性：即特異性、比例性、可逆性，階段性。特異性:是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征，這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步，還將在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域得到更加深入和廣泛的應(yīng)用，比如腫瘤的診斷和特異性治療等。比例性:是指抗原與抗體發(fā)生可見(jiàn)反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系，只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)，在抗原抗體比例相當(dāng)或抗原稍過(guò)剩的情況下，反應(yīng)最徹底，形成的免疫復(fù)合物沉淀最多、最大。而當(dāng)抗原抗體比例超過(guò)此范圍時(shí)，反應(yīng)速度和沉淀物量都會(huì)迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)?？赡嫘?是指抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離恢復(fù)為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應(yīng)是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合，所形成的復(fù)合物并不牢固，可以隨時(shí)解離，解離后的抗原抗體仍保持原來(lái)的理化特征和生物學(xué)活性。階段性：抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段，第一個(gè)階段為抗原抗體的特異性結(jié)合階段，此階段是抗原與抗體間互補(bǔ)的非共價(jià)結(jié)合，反應(yīng)迅速，可在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成，一般不出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的反應(yīng)現(xiàn)象。第二個(gè)階段為可見(jiàn)反應(yīng)階段，是小的抗原抗體復(fù)合物間靠正、負(fù)電荷吸引形成較大復(fù)合物的過(guò)程。此階段反應(yīng)慢，需要時(shí)間從數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)至數(shù)日不等，且易受多種因素和反應(yīng)條件的影響?？乖贵w反應(yīng)影響因素電解質(zhì)：抗原和抗體通常為蛋白質(zhì)分子，等電點(diǎn)分別為pH3～5和pH5～6，在中性或:弱堿性的環(huán)境中，表面均帶負(fù)電荷，適當(dāng)濃度的電解質(zhì)會(huì)使他們失去一部分負(fù)電荷而相互結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集或沉淀現(xiàn)象：在抗原抗體反應(yīng)中，常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液，以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。溫度：抗原抗體反應(yīng)必須在適宜的溫度中進(jìn)行，一般為15～40℃，通常最適為37℃。一定范圍內(nèi)，溫度升高，可促進(jìn)抗原抗體分子問(wèn)的碰撞機(jī)會(huì)，加速抗原抗體復(fù)合物的形成，加快可見(jiàn)反應(yīng)的速度，若溫度高于56℃，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞；溫度越低，結(jié)合速度越慢，但結(jié)合牢固，易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應(yīng)，對(duì)反應(yīng)溫度有特殊要求，如冷凝集素在4℃左右與紅細(xì)胞結(jié)合最好，20℃以上反而解離。酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的酸堿度環(huán)境中進(jìn)行，pH過(guò)高或過(guò)低都將影響抗原:抗體的理化性質(zhì)，抗原抗體反應(yīng)的最適酸堿度為pH6～8。此外，當(dāng)pH達(dá)到或接近顆粒性抗原的等電點(diǎn)時(shí)，即使沒(méi)有相應(yīng)抗體存在時(shí)，也會(huì)引起抗原非特異性凝集，即自凝，造成假陽(yáng)性反應(yīng)，嚴(yán)重影響試驗(yàn)的可靠性?？乖贵w反應(yīng)反應(yīng)原理抗體能特異性地識(shí)別相應(yīng)的抗原，并與之結(jié)合。這種結(jié)合在體外也能發(fā)生，這種特性就是許多免疫檢測(cè)方法的基礎(chǔ)?？乖c抗體相互作用是非共價(jià)的，可逆的，其特性符合許多化學(xué)反應(yīng)的基