低劑量納洛酮對氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響

低劑量納洛酮對氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響

羅依卡因是一種新型的長期酰胺引起的麻醉劑，具有麻醉和鎮(zhèn)痛作用。與kane相比，它具有低毒性。盡管如此,也無法避免臨床上羅哌卡因中毒事件的意外發(fā)生。有文獻報道氯胺酮和納洛酮都有抗驚厥作用。我們課題組研究發(fā)現(xiàn)低劑量納洛酮能增強氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,但低劑量納洛酮能否增強氯胺酮的抗驚厥作用尚鮮有報道。本實驗旨在觀察低劑量納洛酮對氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響。1數(shù)據(jù)和方法1.1實驗動物及環(huán)境昆明種小鼠150只(徐州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供,雌雄均可,21～25g),在實驗前一天讓其熟悉環(huán)境,自由取食,第2天下午2:00開始試驗。1.2鹽酸納洛酮注射液甲磺酸羅哌卡因注射液,規(guī)格:每支89.4mg/10mL,批號0706030,海南斯達制藥有限公司生產(chǎn)。鹽酸納洛酮注射液,規(guī)格:每支0.4mg/mL,批號20071105,北京凱因生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。鹽酸氯胺酮注射液,規(guī)格:每支0.1g/2mL,批號KH071001,江蘇省恒瑞股份有限公司生產(chǎn)。將藥品配成相應(yīng)濃度,均按0.1mL/10g注射。1.3組和方法1.3.1羅哌卡因致驚厥的ed50組1小鼠30只隨機分成NS組(生理鹽水組)和氯胺酮組,每組15只,分別以序貫法測定預(yù)先皮下注射生理鹽水或氯胺酮的各組羅哌卡因致驚厥的ED50。將濃度為89.4mg/10mL羅哌卡因按1:0.8比例配制成不同濃度的等比溶液,即等比劑量分別為89.4、71.52、57.22、45.77和36.62mg/kg。從最大劑量開始序貫給藥,先皮下注射氯胺酮,5min后腹腔注射羅哌卡因,分別計算氯胺酮組和NS組的羅哌卡因致驚厥ED501.3.2量表1:不同四亞組亞組5.10和20.20g/l組2小鼠40只隨機分為NS組及KT1、KT2和KT3組(氯胺酮劑量分別為5、10和20mg/kg)四亞組,每組各10只。先皮下注射生理鹽水或氯胺酮,5min后腹腔注射羅哌卡因(85.9mg/kg),分別記錄每只小鼠驚厥次數(shù)、驚厥持續(xù)時間以及死亡情況。1.3.3酮用量的確定組3小鼠40只隨機分為NS組及NL1、NL2和NL3組(納洛酮劑量分別為1、10和100ng/kg)四亞組,每組各10只。先皮下注射生理鹽水或納洛酮,5min后腹腔注射羅哌卡因(85.9mg/kg),觀察納洛酮對羅哌卡因致驚厥作用的影響。1.3.4納洛酮和nl+kt組組4小鼠40只隨機均分為NS組、NL組(納洛酮10ng/kg)、KT組(氯胺酮10mg/kg)和NL+KT組(納洛酮10ng/kg與氯胺酮10mg/kg合用)四亞組,每組各10只。前三組按方法1.3.2步驟操作。第四組先皮下注射納洛酮,5min后皮下注射氯胺酮,再過5min腹腔注射羅哌卡因。羅哌卡因均為85.9mg/kg,觀察納洛酮與氯胺酮配伍對羅哌卡因致驚厥作用的影響。1.4肢體陣發(fā)性肌動學(xué)小鼠驚厥評價指標(biāo):動物興奮性明顯增高,活動增強,跳躍,奔跑,因肢體陣發(fā)性痙攣體位不能平衡而倒地。驚厥持續(xù)時間以驚厥開始致肌張力下降并能自主活動的時間計。1.5組患者治療前后血壓變異性檢驗采用SPSS13.0進行數(shù)據(jù)處理和分析。羅哌卡因致小鼠驚厥ED50的比較采用t檢驗;對驚厥持續(xù)時間和驚厥次數(shù)用表示;將計量數(shù)據(jù)進行秩變換后,組間比較采用單因素方差分析,多組之間比較采用q檢驗;死亡數(shù)和驚厥數(shù)用似然比X2檢驗,以P<0.05判斷為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1羅哌卡因致驚厥羅哌卡因致小鼠驚厥ED50及加用氯胺酮的ED50見表1。與NS組相比,氯胺酮組羅哌卡因致驚厥劑量明顯提高,兩組ED50差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明氯胺酮有抗羅哌卡因致小鼠驚厥的作用。2.2組小鼠ld-ns的ld-pcr檢測氯胺酮對羅哌卡因致驚厥作用的影響試驗結(jié)果見表2。KT3組驚厥持續(xù)時間、驚厥次數(shù)和驚厥數(shù)與NS組相比均差別顯著(P<0.05),小鼠死亡數(shù)組間比較無差別(P=0.890)。20mg/kg氯胺酮不僅能減少驚厥的持續(xù)時間和驚厥次數(shù),還能降低驚厥的發(fā)生率,抗驚厥效果明顯。2.3納洛酮對羅哌卡因致驚厥作用的影響納洛酮對羅哌卡因致驚厥作用的影響研究結(jié)果見表3。各組間驚厥持續(xù)時間、驚厥次數(shù)、死亡數(shù)和驚厥數(shù)均未見顯著差異(P>0.05),提示納洛酮對羅哌卡因致驚厥作用無影響。2.4納洛酮對氯胺酮致驚厥作用的影響試驗結(jié)果見表4。將數(shù)據(jù)進行秩變換后進行檢驗,驚厥持續(xù)時間、驚厥次數(shù)、驚厥數(shù)和死亡數(shù)組間均未見顯著差異(P>0.05),納洛酮對氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用無影響。3納洛酮和氯胺酮聯(lián)用對驚厥發(fā)生的影響本實驗表明氯胺酮能提高羅哌卡因致驚厥的閾值,即氯胺酮有抗羅哌卡因致驚厥的作用。有文獻報道,氯胺酮為非競爭性NMDA受體阻斷劑,其抗驚厥作用與阻斷NMDA受體濃度極度相近。還有試驗證明這種抗驚厥作用可能與GABA-苯二氮受體有關(guān),故推測氯胺酮的抗驚厥作用可能與NMDA和GABA系統(tǒng)有關(guān)。本研究表明,低劑量納洛酮無抗羅哌卡因的致驚厥作用。但有文獻報道,內(nèi)阿片肽在調(diào)節(jié)驚厥發(fā)作中起致驚厥和抗驚厥的雙重作用,而這種雙重作用都可被預(yù)先給予阿片受體阻斷劑納洛酮所阻斷。其可能機制為納洛酮影響內(nèi)阿片肽改變GABA能神經(jīng)元活動,進而產(chǎn)生對驚厥發(fā)作的調(diào)節(jié)。無論是氯胺酮的抗驚厥作用還是納洛酮對驚厥發(fā)作的調(diào)節(jié),其可能的機制都與GABA系統(tǒng)有關(guān)。卓九五等已證實低劑量納洛酮能增強氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,納洛酮和氯胺酮配伍對驚厥發(fā)生的影響值得關(guān)注。如果兩者伍用能增強氯胺酮的抗驚厥作用,一則進一步證明了GABA系統(tǒng)對驚厥發(fā)生起作用,二則可以指導(dǎo)臨床的麻醉用藥,從而減少驚厥的發(fā)生。如果兩者合用能降低氯胺酮的抗驚厥作用,那么臨床增強鎮(zhèn)痛作用時,納洛酮和氯胺酮的合用就要謹(jǐn)慎了。再者就是兩者合用對驚厥的發(fā)作無影響。本研究中NL+KT組與NS組和KT組比較,驚厥持續(xù)時間、驚厥次數(shù)、死亡數(shù)和驚厥數(shù)均無顯著差異(P>0.05),說明低劑量納洛酮對氯胺酮抗羅哌卡因致小鼠驚厥無影響。筆者認(rèn)為本試驗結(jié)果可能與下面幾點原因有關(guān):(1)氯胺酮的抗驚厥作用與GABA系統(tǒng)有關(guān)以及納洛酮對驚厥發(fā)生的雙重調(diào)節(jié)通過GABA系統(tǒng)完成這兩個結(jié)論可能至少有一個是錯誤的;(2)納洛酮的劑量偏低。納洛酮阻斷阿片肽對驚厥發(fā)作的雙重作用所需劑量為10～40mg/kg,要想達到一個既能增強氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,又能增強其抗驚厥作用的劑量需要繼續(xù)摸索;(3)羅哌卡因的致驚厥作用既與NMDA受體無關(guān),也與GABA系統(tǒng)無關(guān),而恰恰氯胺酮能通過某種途徑抑制這種機制的發(fā)生。遺憾的是這種機制目前還沒有被發(fā)現(xiàn)和證實。雖然本實驗得到陰性結(jié)果,但至少證明了一點:低劑量納洛酮在氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥方面是無效的。繼續(xù)探索如何增強氯胺酮抗驚厥作用,可能還應(yīng)從納洛酮的劑量或羅哌卡因致驚厥的發(fā)生機制上著手。本試驗考慮到小鼠的個體差異和氯胺酮令人滿意的抗驚厥效果(方法1.3.2中KT3組有8只小鼠未出現(xiàn)驚厥),故各組之