第五章血型與輸血學(xué)檢驗

第五章

血型與輸血學(xué)檢驗

第五章血型與輸血學(xué)檢驗KEYPOINTS

1.Theintroductionaboutbloodgroup,bloodgroupantibodiesandtheclinicalvaluationofdifferentbloodcellmarkers.2.ThemeasurementofABOantigen/antibody,Rhantigen/antibody,irregularantibodyandHLAantigen,thetestingofbloodcellandserummarkersunderdifferentclinicalconditions.3.Reasonabletransfusionandbloodcomponenttherapyisthesignofmoderntransfusion,thetraditionalandnon-traditionalclinicalapplicationofdifferentbloodcomponents.4.Thetestingofbloodcellandserummarkersbeforeandafterstemcelltransplantation.5.Thetechnologyandapplicationaboutautologoustransfusion,therapeutichematopheresisandtherapeuticbloodcomponentsexchange,thetestingneededtopreventadverseeffectsofbloodtransfusionbeforetransfusion.第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型、血型抗原與抗體第一節(jié)紅細(xì)胞血型第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)第三節(jié)白細(xì)胞血型第四節(jié)血小板血型第五節(jié)新生兒溶血病第六節(jié)臨床輸血第七節(jié)發(fā)展趨勢主要內(nèi)容第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型、血型抗原與抗體

血型

是人類血液的主要特征之一，表達(dá)了血液各種成分的遺傳性狀。血型抗原分類1.紅細(xì)胞血型抗原:ABO、Rh、MNS等

2.白細(xì)胞血型抗原:CD、HLA等

3.血小板血型抗原:HPA等

4.其他血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗完全抗體(completeantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成，與紅細(xì)胞生理鹽水懸液混合后能引起紅細(xì)胞凝集的特異性抗體。

血型抗體不完全抗體(low-orderantibody)

只可使紅細(xì)胞致敏而不能使紅細(xì)胞凝集的抗體。血型抗體與紅細(xì)胞的表面抗原結(jié)合后，產(chǎn)生血管內(nèi)或血管外溶血。血型抗體(Bloodgroupantibody)

在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成的免疫球蛋白。紅細(xì)胞血型抗體可分為完全抗體和不完全抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第一節(jié)紅細(xì)胞血型是紅細(xì)胞上的遺傳性標(biāo)志。包括ABO、Rh、MNS、P、Lutheran、Kell等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、ABO血型系統(tǒng)

1901年，Landsteiner發(fā)現(xiàn)了人類的第一個血型系統(tǒng)——ABO血型系統(tǒng)，含抗原成分不同將人的紅細(xì)胞分成A、B、O和AB四種血型。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型合成

第五章血型與輸血學(xué)檢驗血型物質(zhì)存在的臨床應(yīng)用：

a.測定唾液中的血型物質(zhì)輔助鑒定血型；

b.中和ABO血型系統(tǒng)中的“天然抗體”；

c.預(yù)測胎兒ABO血型等。發(fā)生及分布:胎兒在5～6周已可測出，表達(dá)相對穩(wěn)定。存在于多種細(xì)胞的細(xì)胞膜和其他體液中。ABO血型分布及存在的意義第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型系統(tǒng)獨特的性質(zhì)1.血清存在反應(yīng)強的抗體。2.組織細(xì)胞及各種體液中存在著ABH物質(zhì)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO亞型紅細(xì)胞上的A抗原第五章血型與輸血學(xué)檢驗1.孟買型：無ABH抗原,血清中有其抗體2.B（A）型和A（B）型：紅細(xì)胞上同時存在B抗原和很弱的A抗原，容易誤判為AxB型。

其他特殊類型的ABO亞型

第五章血型與輸血學(xué)檢驗

ABO血型的遺傳第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、Rh血型系統(tǒng)概述

抗Rh抗體一般指抗-D。Rh血型抗原及抗體

1.Rh抗原：含D、C、E、c和e五種，D抗原性最強。

2.Rh抗體：主要通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。Rh抗體臨床意義：引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病。

第五章血型與輸血學(xué)檢驗亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸第五章血型與輸血學(xué)檢驗Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、其它血型１.P血型系統(tǒng):

P抗原除存在于紅細(xì)胞，還存在于纖維母細(xì)胞和淋巴細(xì)胞上。通常不引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)。２.Kell血型系統(tǒng)：

主要抗原是K和k，引起嚴(yán)重溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。３.Kidd血型系統(tǒng)：抗原為Jka，Jkb。第五章血型與輸血學(xué)檢驗第二節(jié)紅細(xì)胞血型檢測技術(shù)凝集反應(yīng)（agglutination）沉淀反應(yīng)（precipitation）溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、凝集反應(yīng)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、沉淀反應(yīng)第五章血型與輸血學(xué)檢驗1.單擴與雙擴原理第五章血型與輸血學(xué)檢驗2.對流免疫電泳第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、溶血反應(yīng)（hemolysis）第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、紅細(xì)胞血型鑒定ABO血型鑒定

Rh血型鑒定MN血型鑒定第五章血型與輸血學(xué)檢驗ABO血型鑒定1.正向定型2.反向定型第五章血型與輸血學(xué)檢驗3．結(jié)果判定正定型（細(xì)胞定型）抗-A抗-B抗-A，B反定型（血清定型）ACBCOC檢測結(jié)果—

—

—++—

O+—+—+—

A—++

+—

—

B+++

—

—

—

AB第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）Rh血型鑒定1．原理:（1）單克隆混合試劑檢測法用Rh各抗血清（IgM+IgG型）試劑通過凝集反應(yīng)對紅細(xì)胞上Rh抗原進行鑒定。（2）酶介質(zhì)檢測法酶介質(zhì)可破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，降低紅細(xì)胞表面負(fù)電荷，減少細(xì)胞間的靜電排斥力，使細(xì)胞間的距離縮小，有利于IgG型小分子特異性Rh血型抗體與紅細(xì)胞上的Rh抗原反應(yīng)，形成肉眼可見的凝集。返回第五章血型與輸血學(xué)檢驗（三）MN血型鑒定1．原理:用IgM類特異性抗M、抗N單克隆血清來鑒定紅細(xì)胞上有無相應(yīng)的M抗原和/或N抗原?？?M抗-N血型基因型＋－＋－＋＋MNMNMMNNMN第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、交叉配血實驗

概念分類

1.“主側(cè)”配血

2.“次側(cè)”配血

3.自身對照第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、交叉配血實驗技術(shù)1.鹽水介質(zhì)法

2.酶介質(zhì)法

3.抗人球蛋白介質(zhì)法

第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、交叉配血實驗技術(shù)4.凝聚胺法5.微柱凝膠免疫技術(shù)

第五章血型與輸血學(xué)檢驗第三節(jié)白細(xì)胞血型1.包括紅細(xì)胞血型抗原2.白細(xì)胞本身所特有的血型抗原3.人類白細(xì)胞抗原（HLA）第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、HLA系統(tǒng)基因、抗原結(jié)構(gòu)HLA基因型:

位于6號染色體短臂6p21.3區(qū)域。HLA抗原

１.分為HLA-Ⅰ類分子

２.HLA-Ⅱ類分子第五章血型與輸血學(xué)檢驗HLA抗原臨床應(yīng)用HLA多態(tài)性的研究;器官和骨髓移植前組織相容性配型;親子鑒定;HLA與某些疾病的關(guān)聯(lián);遺傳學(xué)方面。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法１.HLA血清學(xué)技術(shù)(微量淋巴細(xì)胞毒試驗)分型血清中含有的抗特定HLA抗原的細(xì)胞毒抗體與待檢淋巴細(xì)胞膜表面的HLA抗原結(jié)合后，在補體的參與下?lián)p傷細(xì)胞膜，經(jīng)伊紅或臺盼藍(lán)染色后，觀察細(xì)胞是否被染色，了解細(xì)胞損傷、死亡的情況。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法２.HLA的分子生物學(xué)檢測：PCR-SSP（PCR序列特異性引物）PCR-RFLP（PCR限制性片段長度多態(tài)性）PCR-SBT（PCR-直接測序分型

）第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、粒細(xì)胞血型分布：中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。分類：

１.HNA-1抗原：目前發(fā)現(xiàn)的唯一具有多態(tài)性的粒細(xì)胞抗原系統(tǒng)。

２.HNA-2抗原：其中HNA-2a具有臨床意義。３.HNA-3抗原：其中HNA-３a表達(dá)于淋巴細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、脾臟、腎臟、胎盤細(xì)胞，是粒細(xì)胞聚集因子，與輸血相關(guān)性肺損傷相關(guān)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(一)粒細(xì)胞抗原抗體檢測方法1.血清學(xué)方法：

a.粒細(xì)胞凝集試驗

b.單克隆抗體特異性粒細(xì)胞抗原捕獲試驗

c.粒細(xì)胞免疫熒光試驗

d.流式細(xì)胞術(shù)2.DNA分型技術(shù):

PCR-RFLP、PCR-SSP等。第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）粒細(xì)胞抗體的臨床應(yīng)用１.新生兒同種免疫粒細(xì)胞減少癥2.非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)3.輸血相關(guān)性肺損傷4.粒細(xì)胞輸注無效5.自身免疫性粒細(xì)胞減少癥第五章血型與輸血學(xué)檢驗第四節(jié)血小板血型第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五章血型與輸血學(xué)檢驗一、血小板同種抗體同種血小板抗體一般由輸血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而產(chǎn)生。最常見的抗體是HRA-lb和5b抗體。這和相應(yīng)HPA抗原在群體中的分布頻率有關(guān)。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、血小板血型抗原和抗體的臨床應(yīng)用1.新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜

2.輸血后紫癜

3.血小板輸注無效第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、血小板輸注的適應(yīng)證及禁忌證

1．預(yù)防性血小板輸注:(1)各種慢性血小板生成不良性疾病。(2)血小板低下并伴有導(dǎo)致血小板破壞或消耗增加的因素存在。2．治療性血小板輸注:（1）血小板生成減少引起的出血

（2）大量輸血所致的血小板稀釋性減少（3）脾腫大（4）感染和彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）（5）特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）（6）藥物引起的免疫性血小板低下（7）血小板功能異常所致嚴(yán)重出血第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）禁忌證1.血栓性血小板減少性紫癜（TTP）2.溶血尿毒綜合征（HUS）3.肝素誘導(dǎo)性血小板減少癥(HIT)第五章血型與輸血學(xué)檢驗四、特制血小板制劑的臨床應(yīng)用1.移除大部分血漿的血小板2.洗滌血小板3.少白細(xì)胞血小板4.輻照血小板5.冰凍血小板第五章血型與輸血學(xué)檢驗第五節(jié)新生兒溶血病第五章血型與輸血學(xué)檢驗(一)ABO新生兒溶血病ABO-HDN是由于母嬰血型不合，母體的IgG抗A(B)經(jīng)過胎盤進入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細(xì)胞所引起。第五章血型與輸血學(xué)檢驗(二)Rh血型引起的新生兒溶血第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、實驗室檢查直接抗人球蛋白試驗游離試驗:是檢測新生兒血清中的血型抗體。釋放試驗:與直接抗球蛋白相同，也是檢測新生兒紅細(xì)胞上是否存在免疫抗體。第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、新生兒溶血病治療與預(yù)防1.藥物治療與血漿置換2.提早分娩3.宮內(nèi)換血4.光照治療與換血療法5.預(yù)防第五章血型與輸血學(xué)檢驗第六節(jié)臨床輸血一、全血輸血（一）適應(yīng)證

1．心功能不全或心力衰竭及嬰幼兒、老年人慢性病體質(zhì)。

2．需要長期或反復(fù)輸血的患者，如再障等患者。（二）禁忌證

1．心功能不全或心力衰竭的貧血患者。

2．需要長期或反復(fù)輸血患者，如再生障礙性貧血等患者。

3．對血漿蛋白已致敏或?qū)ρ獫{內(nèi)某種反應(yīng)原敏感的患者。

4．因以往輸血或妊娠已產(chǎn)生白細(xì)胞或血小板抗體的患者。

5．血容量正常的慢性貧血患者。

6．可能施行骨髓移植及其它器官移植的患者。第五章血型與輸血學(xué)檢驗二、成分輸血概念適應(yīng)證1．補充血容量2．提高攜氧能力3．補充凝血因子，糾正出血4．調(diào)節(jié)免疫機能，提高機體抵抗力5．維持膠體滲透壓6．有害物質(zhì)的排除（換血或血漿置換）禁忌證:

無明確的輸血適應(yīng)證就是禁忌證。第五章血型與輸血學(xué)檢驗成分輸血的優(yōu)點1．制劑容量小，純度高，治療效果好2．針對性強，不良反應(yīng)少3．減少輸血傳播性疾病的發(fā)生4．便于保存，使用方便5．一血多用，節(jié)約血液資源第五章血型與輸血學(xué)檢驗三、自體輸血概念優(yōu)點1.避免經(jīng)輸血傳播的疾病。2.避免同種異體輸血產(chǎn)生的同種免疫反應(yīng)。3.反復(fù)放血可刺激紅細(xì)胞再生，促進患者術(shù)后造血速度加快。4.避免異體血液對受血者免疫功能的抑制。5.緩解血源緊張的矛盾。第五章血型與輸血學(xué)檢驗自體輸血種類根據(jù)血液來源和保存方法主要分為：1.貯存式自體輸血2.稀釋式自體輸血3.回收式自體輸血第五章血型與輸血學(xué)檢驗四、干細(xì)胞移植第五章血型與輸血學(xué)檢驗（二）移植流程１.供者選擇與受者移植前的準(zhǔn)備：組織配型。２.預(yù)處理預(yù)處理：超劑量化療或放療。３.移植物處理：

(1)骨髓和異體外周血造血干細(xì)胞的處理：去除骨髓中的紅細(xì)胞、ABO血型凝集原等。

(2)自體移植物的處理：體外凈化自體移植物。４.移植物的輸注：靜脈滴注，但不能超過3h。５.植活的檢測：靠檢測受者血細(xì)胞和免疫學(xué)的標(biāo)記。第五章血型與輸血學(xué)檢驗（三）移植并發(fā)癥及其防治1.感染2.移植物抗宿主?。℅VHD3.巨細(xì)胞病毒（CMV）感染及相關(guān)性間質(zhì)性肺炎（CMV-I