薯類種子生產(chǎn)基本知識-薯類種子脫毒的方法與基本原理

《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》植物脫毒方法與原理目錄CONTENTS一二莖尖培養(yǎng)脫毒熱處理脫毒三熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)脫毒一、莖尖培養(yǎng)脫毒（一）原理病毒在感染植株上的分布是不均勻的，即老葉片及成熟的組織和器官中病毒含量較高，而幼嫩的及未成熟的組織和器官中病毒含量較低，生長點（約0.1～1.0mm區(qū)域）則幾乎不含或含病毒很少。一、莖尖培養(yǎng)脫毒（二）莖尖培養(yǎng)的方法1.材料的選取選擇具有原品種典型特征、病毒危害較輕的健壯植株采集外植體。一、莖尖培養(yǎng)脫毒（二）莖尖培養(yǎng)的方法2.外植體的表面消毒。3.培養(yǎng)基配制大多數(shù)植物的莖尖培養(yǎng)以MS＋NAA0.1～1.0mg/L＋CM（椰乳）5%～10%。也可加0.1~1mg/L的KT和活性炭，進行固體培養(yǎng)或液體濾紙橋培養(yǎng)。一、莖尖培養(yǎng)脫毒（二）莖尖培養(yǎng)的方法4.莖尖剝離與接種在超凈臺下，先用肉眼剝離外面的幼葉，至0.5cm大小時，再移至雙筒解剖鏡下，用鑷子夾住莖部，用解剖針輕輕剝掉幼葉和葉原基，當剝到看見一個閃亮半圓球的頂端分生組織點，只剩兩枚葉原基時，可用解剖刀將微莖尖切下來，然后接到培養(yǎng)基中,注意隨切隨接，防止變干變褐。一、莖尖培養(yǎng)脫毒（二）莖尖培養(yǎng)的方法5.莖尖培養(yǎng)培養(yǎng)條件為25℃，光照16h，光照強度為2000Lx。微莖尖培養(yǎng)須經(jīng)歷較長的時間，一般要持續(xù)2個月以上才能見到莖尖的分化，一般由莖尖直接分化出芽叢。6.病毒鑒定7.脫毒苗的保存8.脫毒苗的繁殖二、熱處理脫毒（一）原理利用病毒耐熱性差的特點，將植物組織置于高于正常溫度的環(huán)境中，組織內(nèi)部的病毒受熱以后部分或全部鈍化，但寄主植物的組織很少或不會受到傷害。（二）熱處理的方法1.溫湯浸漬處理適用于休眠器官、剪下的接穗或種植材料的脫毒處理。方法是將材料放在50～55℃的溫水中浸漬數(shù)分鐘至數(shù)小時。此方法簡便易行，但易造成材料受傷。二、熱處理脫毒（二）熱處理的方法2.熱空氣處理適用于生長期植物材料的脫毒處理。設(shè)備可采用有照明、通風、調(diào)溫、給水動能的培養(yǎng)箱。方法是將待處理植株先進行盆栽，成活后移入35～40℃的培養(yǎng)箱中處理幾十分鐘至幾個月。3.熱處理脫毒的優(yōu)點與局限性（1）優(yōu)點：對設(shè)備要求不高，技術(shù)簡單，短時間可除去病毒。二、熱處理脫毒（二）熱處理的方法3.熱處理脫毒的優(yōu)點與局限性（2）局限性：●熱處理不能脫除所有病毒，此法只對那些球形病毒和線形病毒有效，而對桿狀病毒不起作用?！裢瑫r同樣的處理效果也不一樣（具有不確定性）。●對植株有傷害，只有部分植株成活?！裼锌赡茆g化植物組織中的阻抗因子，使寄主植物中抗病毒因子難于活化，從而增加無效植株的發(fā)生率。三、熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)脫毒1.特點：既可縮短熱處理時間，提高植株成活率，又可剝離較大的莖尖，提高莖尖培養(yǎng)的成活率和脫毒率。2.適用：大多數(shù)植物，并可除去一般培養(yǎng)難以去除的紡錘塊莖類病毒《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》植物組織培養(yǎng)概述主要內(nèi)容一二什么是植物組織培養(yǎng)常見的組織培養(yǎng)類型三植物組織培養(yǎng)的特點（一）植物組織培養(yǎng)含義在無菌條件下，將植物的離體生活器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給于適當?shù)臈l件，使其長成完整植株的過程。又稱為植物無菌培養(yǎng)、離體培養(yǎng)或試管培養(yǎng)。一、什么是植物組織培養(yǎng)（二）如何理解1.無菌條件2.離體生活器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體3.人工配制的培養(yǎng)基4.適當?shù)臈l件：人工控制的條件5.長成完整植株一、什么是植物組織培養(yǎng)正常污染（三）什么是外植體1.外植體（Explant）指在組織培養(yǎng)中，從活植物體上切取下來以進行培養(yǎng)的那部分組織或器官等。2.主要包括：器官：根、莖、葉、花、果實、種子等；組織：形成層，分生組織等；細胞：體細胞、性細胞。原生質(zhì)體一、什么是植物組織培養(yǎng)（一）按培養(yǎng)材料分類1.植株培養(yǎng)2.胚胎培養(yǎng)3.器官培養(yǎng)4.組織培養(yǎng)5.細胞培養(yǎng)6.原生質(zhì)體培養(yǎng)二、常見的組織培養(yǎng)類型植株培養(yǎng)器官培養(yǎng)組織培養(yǎng)（二）按培養(yǎng)方式分類1.固體培養(yǎng)2.液體培養(yǎng)二、常見的組織培養(yǎng)類型（三）按培養(yǎng)過程分類1.初代培養(yǎng)：指外植體的最初培養(yǎng)。二、常見的組織培養(yǎng)類型取材材料整理材料清洗滅菌-接種-初代培養(yǎng)（三）按培養(yǎng)過程分類2.繼代培養(yǎng)：將初代培養(yǎng)得到的培養(yǎng)體移植于新鮮培養(yǎng)基中這種反復多次移植的培養(yǎng)，稱為繼代培養(yǎng)。二、常見的