TNAIA 0218-2023 污水中11種毒品及其代謝物和人口標記物可替寧的測定 液相色譜-三重四極桿質譜法

ICS13.060.30CCSZ16

TB團 體 標 準T/NAIA0218-2023污水中11種毒品及其代謝物和人口標物可替寧的測定 液相色譜-三重四極桿質譜法Determinationof11illicitdrugsandtheirmetabolitesresidues&cotinineofdemographicmarkerinsewageLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2023-08-28發(fā)布 2023-08-31實施寧夏化學分析測試協(xié)會 發(fā)布前言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由寧夏化學分析測試協(xié)會提出并歸口。（寧夏寧夏凱普檢測有限公司、寧夏化學分析測試協(xié)會。宏、楊永剛、曹偉、何曉麗、周晶晶、李寧軍、孫飛、撒世軍、李超、張小飛。本文件為首次發(fā)布。PAGEPAGE1污水中11種毒品及其代謝物和人口標記物可替寧的測定液相色譜-三重四極桿質譜法范圍11（O6-愛康寧、嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、3,4-亞甲基二氧甲基苯丙胺（MDMA）、3,4-亞甲二氧基苯丙胺（MDA）、甲基苯丙胺、苯丙胺）和人口標記物可替寧含量的液相色譜-三重四極桿質譜測定方法。本文件適用于污水中11種毒品及其代謝物和人口標記物可替寧含量的測定。規(guī)范性引用文件（有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法HJ91.1污水監(jiān)測技術規(guī)范GA/T122毒物分析名詞術語術語和定義GA/T122界定的術語和定義適用于本文件。原理凈化、濃縮，采用液相色譜-三重四極桿質譜法在多反應監(jiān)測模式下檢測，以保留時間和特征離子對進行定性，內標法定量。試劑與材料除非另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，實驗用水符合GB/T6682中規(guī)定的一級水。鹽酸（HCl）。甲醇（CH3OH）：HPLC級。乙腈（C2H3N）：HPLC級。甲酸（HCOOH）：HPLC級。氨水（NH3·H2O）：HPLC級。甲酸水溶液：0.1%(CH3OH)。移取1000μL甲酸（5.4）于1000mL水中。5.7氨水-甲醇溶液(5+95)：用氨水（5.5）和甲醇（5.2）按5+95體積比混合。標準溶液以下所有標準溶液應恢復至室溫并搖勻后使用。標準貯備液：ρ=100μg/mLO6-嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺，溶劑為甲醇。貯備液于-20℃冷凍密封避光保存或參照制造商的產品說明保存?？商鎸帢藴寿A備液：ρ=1000μg/mL購買市售有證可替寧標準貯備溶液，溶劑為甲醇。-20℃冷凍密封避光保存或參照制造商的產品說明保存?；旌蠘藴饰镔|中間液：5.9.15.9.2116個月?；旌蠘藴饰镔|使用液：5.9.30.5~50L5~500L，1個月。氘代內標溶液：氘代內標標準貯備液：ρ=100μg/mL購買市售氘代內標標準貯備液，推薦組分為O6-單乙酰嗎啡-D3、可卡因-D3、可待因-D3、苯甲酰愛康寧-D3、嗎啡-D3、氯胺酮-D4、去甲氯胺酮-D4、MDMA-D5、MDA-D5、甲基苯丙胺-D5-D5-D3-20℃冷凍密封避光保存或參照制造商的產品說明保存。氘代內標混合中間液：5.10.110μg/mL氘代內標混合中間液，溶劑為甲醇。密封，置于冰箱-206個月。氘代內標混合使用液：250μg/L的氘代內標混合使用液，溶劑為甲醇。密封，置于冰箱-201個月。儀器與設備液相色譜-三重四極桿質譜儀：帶有梯度洗脫功能，質譜為帶電噴霧離子源（ESI）的。1.8μm100mm2.1mmC18反向液相色譜柱，或及其它等效柱?；旌闲蛷婈栯x子交換反相柱：MCX，30mg/3mL或等效固相萃取柱。固相萃取裝置：自動或手動，流速可調節(jié)。氮吹濃縮或真空濃縮裝置。一般實驗室常用儀器和設備。樣品樣品采集與保存HJ/T911000mL。PP時間不超過10d。試樣制備預處理將污水樣品完全解凍后，充分搖勻。過0.45μm玻璃纖維濾膜，并量取50.00mL加入20μL氘代內標混合使用液（5.10.2）。固相萃取及濃縮4mL甲醇（5.2）、4mL4mLpH2的水對固相萃取小柱（6.3）進行通過活化好的固相萃取小柱，控制24mL4mL4并增加固相萃取裝置（6.3）4mL氨水-甲醇溶液（5.7）1mL/min。250μL0.1%甲酸溶液（5.6）0.22μm濾膜，待測?？瞻讟悠芬宰詠硭疄榭瞻讟悠?，與污水樣品平行操作，得到空白提取液。分析步驟儀器參考條件液相色譜參考條件A：0.1%甲酸水溶液B：乙腈10.2mL/min，柱溫：35℃，進樣體積：5μL。表1 推薦梯度洗脫條件時間/min流動相A/%流動相B/%195528515870308.559513595質譜參考條件電離方式：電噴霧離子源（ESI），正離子模式。監(jiān)測方式：多反應離子監(jiān)測（MRM）。其余參考條件見附錄B。儀器調諧質譜進行儀器質量數和分辨率的校正，以確保儀器處于最佳質量狀態(tài)。校準標準工作曲線的建立取與污水等量自來水過膜，并量取50.0mL20μL氘代內標標準使用液（5.10.3），添加混合標準使用液（5.9.4），使其目標物（除可替寧）1ng/L~500ng/L10ng/L~5000ng/L標準工作曲線提取液，待測。按照儀器參考條件1—O61—O6單乙酰嗎啡，2—O6D3，3—苯丙胺，4—D5，5—苯甲酰安康寧，6—苯甲酰愛康D3，7—可卡因，8—D3，9—可待因，10—D3，11—可替寧，12—D3，13—氯胺酮，14—氯胺酮D4，15—MDA，16—MDA-D5，17—MDMA，18—MDMA-D5，19—甲基苯丙胺，20—甲基苯丙胺D5，21—嗎啡，22—嗎啡D3，23—去甲氯胺酮，24—去甲氯胺酮D4圖111種毒品及代謝物和人口標記物可替寧總離子流圖在本標準推薦的儀器參考條件下，目標化合物的總離子流圖見圖1（除可替寧濃度為500ng/L，其余目標物濃度為50ng/L，氘代內標物濃度均為20ng/L）。8.3試樣測定按照與標準工作曲線的建立（8.2.1）相同的儀器條件進行試樣（7.2）的測定。8.4空白試驗響應值時間（min）1—O6單乙酰嗎啡，2—O6D3，3—苯丙胺，4—D5，5—苯甲酰安康寧，6—苯甲酰愛康D3，7—可卡因，8—D3，9—可待因，10—D3，11—可替寧，12—D3，13—氯胺酮，14—D4，15—MDA，16—MDA-D5，17—MDMA，18—MDMA-D5，19—甲基苯丙胺，20—甲基苯丙胺D5，21—嗎啡，22—嗎啡D3，23—去甲氯胺酮，24—去甲氯胺酮D4圖1目標化合物總離子流圖在本方法推薦的儀器參考條件下，目標化合物的總離子流圖見圖1（除可替寧濃度為500ng/L，其余目標物濃度為50ng/L，氘代內標物濃度均為100ng/L）。試樣測定按照與標準工作曲線的建立（8.2.1）相同的儀器條件進行試樣（7.2）的測定。空白試驗按照與試樣測定（8.3）相同的儀器條件進行空白試樣（7.2）的測定。結果計算和表示定性測定12標化合物的保留時間與標準工作溶液中該目標化合物的保留時間的相對偏差的絕對值應小2.5%，且對試樣中目標化合物定性子離子的相對離子豐度（Ksam）與濃度接近的標準工作溶液中對應的定性子離子的相對豐度（Kstd）2規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在對應的目標化合物。Kstd=

AstdAstd

×100%………（1）式中：Kstd——標準樣品中目標化合物定性子離子的相對豐度，%；Astd2——標準樣品中目標化合物二級質譜定性子離子響應值；Astd1——標準樣品中目標化合物二級質譜定量子離子響應值。表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差Kstd/%Ksam允許偏差/%Kstd＞50±2020＜Kstd≤50±2510＜Kstd≤20±30Kstd≤10±50結果計算和表達以目標物與對應內標定量離子對的峰面積比（3）計算待測樣品中目標物濃度。C=Y-a （2）b式中：C——待測樣品中目標物質量濃度，ng/L；Y——待測樣品中目標物與內標定量離子對的峰面積比；a——線性方程的截距；b——線性方程的斜率。注：測定結果小數點后位數的保留與方法檢出限一致，最多保留三位有效數字。精密度平行測定結果相對偏差應≤20%。方法檢出限和定量限方法檢出限及定量限見附錄A.1。附錄A（資料性附錄）方法的檢出限及定量限本方法中目標化合物的方法檢出限和測定下限見表A.1。序號目標物檢出限（ng/L）序號目標物檢出限（ng/L）定量限（ng/L）1O6-單乙酰嗎啡1.04.02可卡因0.52.03可待因1.56.04苯甲酰愛康寧0.52.05嗎啡1.56.06氯胺酮0.52.07去甲氯胺酮0.52.08MDMA0.52.09MDA1.04.010甲基苯丙胺0.52.011苯丙胺0.52.012可替寧1.56.0質譜參考條件:a）電噴霧電壓：4000V。b）霧化器壓力：45psi。c）離子源溫度：350℃。

附錄B（資料性附錄）質譜參考條件d）目標化合物的多反應監(jiān)測條件見表B.1。表B.1 目標化合物多反應監(jiān)測條件序號化合物名稱母離子（m/z）定量子離子（m/z）碰撞能量（V）定性子離子（m/z）碰撞能量（V）碎裂電壓（V）1O6-單乙酰嗎啡328.221128165441402可卡因304.21821682.1321203可待因300.2199.231165.3521154苯甲酰愛康寧290.11682077.1651105嗎啡286.216540152651506氯胺酮238.12201212532807去甲氯胺酮224.1206.98125.226708MDMA194.1163810524909MDA180.1163.16104.9226010甲基苯丙胺150.1119891208011苯丙胺136.1119491167012可替寧177.1982080269013O6-單乙酰基嗎啡-D3331.1211261654012514可卡因-D3307.1185201113410515可待因-D3303.2165581527811516苯甲酰愛康寧-D3293.0171.2181053610017嗎啡-D3289.1165441527012018氯胺酮-D4242.021112129347519去甲氯胺酮-D4228.1211.18129.1267520MDMA-D5198.016725138337521MDA-D5185.21686138.1167022甲基苯丙胺-D5155.2124.1496.1166523苯丙胺-D5141.1124.2493.1225524可替寧-D3180.078.1691012275附錄C（資料性附錄）檢測目標物及對應氘代內標相關信息檢測目標物及對應氘代內標相關信息見表C.1。表C.1 檢測目標物及對應氘代內標相關信息序號化合物名稱英文名或縮寫CAS號1O6-單乙酰嗎啡6-Acetylmorphine2784-73-82可卡因Cocaine50-36-23可待因Codeine76-57-34苯甲酰愛康寧Benzoylecgonine519-09-55嗎啡Morphine57-27-26氯胺酮Ketamine1867-66-97去甲氯胺酮Norketamine79499-59-583,4-亞甲基二氧甲基苯丙胺MDMA42542-10-993,4-亞甲二氧基苯丙胺MDA4764-17-410甲基苯丙胺Methamphetamine7632-10-211苯丙胺Amphetamine300-62-912可替寧Cotinine486-56-613O6-單乙?；鶈岱?D36-Acetylmorphine-D3136765-25-814可卡因-D3Cocanine-D3138704-14-015可待因-D3Codeine-D370420-71-216苯甲酰愛康寧-D3Benzoylecgonine-D3115732-6