
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急性腎功能衰竭【摘要】目的:復(fù)制家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的動(dòng)物模型。觀察升汞中毒的一般狀態(tài),尿質(zhì)和量的變化,以及腎臟人體形態(tài)及病理組織學(xué)改變。根據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)判斷、分析和討論急性腎功能衰竭的發(fā)病機(jī)制及病理生理變化。方法:復(fù)制家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的動(dòng)物模型,觀察其病理特征。結(jié)果:尿蛋白含量增高,出現(xiàn)管型。結(jié)論:學(xué)習(xí)了制作了家兔升汞中毒致急性腎功能衰竭的模型,該模型的建立助于掌握急性腎功能衰竭的特點(diǎn)及其對(duì)動(dòng)物機(jī)體的影響。關(guān)鍵字:重金屬類毒物、腎小管壞死、血尿素氮。材料及方法:實(shí)驗(yàn)前一天取家兔12只,其中10只做為實(shí)驗(yàn)組,另外2只作為對(duì)照組,在實(shí)驗(yàn)組家兔的皮下注射1%氯化汞適量,在對(duì)照組家兔皮下注射等量的生理鹽水作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)時(shí)將家兔稱重后,以20%烏拉坦溶液以5ml/kg的劑量由耳緣靜脈慢慢推注,進(jìn)行全身麻醉,期間觀察動(dòng)物的肌張力、呼吸頻率、角膜反射作為觀察麻醉的深度指標(biāo)。將家兔仰臥固定于兔試驗(yàn)臺(tái)上,自尿道口插入導(dǎo)尿管導(dǎo)尿,如果尿量過(guò)少,下腹剪毛在恥骨聯(lián)合上1.5厘米處正中切口,長(zhǎng)約4厘米,分離皮下組織沿腹白線切開腹膜,暴露膀胱,用注射器取適量尿液備測(cè)尿蛋白、尿沉渣鏡檢。頸部剪毛,做頸部切口,分離右側(cè)頸總動(dòng)脈、左側(cè)頸靜脈,分別做頸總動(dòng)脈插管和頸靜脈插管,經(jīng)總動(dòng)脈放血5ml,離心后取血清備測(cè)尿素氮。尿蛋白定性檢查:用吸管吸取尿液3ml加入試管內(nèi),用試管夾夾著在酒精燈外焰上加熱至沸,多數(shù)情況下尿液煮沸后會(huì)變渾濁此時(shí)加入5%醋酸溶液3-5滴,繼續(xù)加熱煮沸,若尿液由渾濁變?yōu)橥该鲃t為尿酸所致;若仍渾濁則表示尿液中含有尿蛋白,依據(jù)渾濁程度推斷尿蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)如下表所示:結(jié)果煮沸后的表現(xiàn)蛋白含量(g/L)—清晰,無(wú)渾濁無(wú)+黑色背景下輕微渾濁<0.1+輕度白色渾濁,無(wú)顆粒及絮狀沉淀0.1-0.5++明顯白色渾濁,無(wú)絮狀沉淀0.5-2+++絮狀白色沉淀,無(wú)凝塊2-5++++凝固成塊,大量絮狀沉淀>56.尿液沉渣鏡檢:⑴取收集的尿液2ml至于離心管內(nèi)離心5分鐘,使尿液中的有形成分沉淀,離心后去掉上清液。⑵將試管內(nèi)的尿沉渣混勻,吸取一滴加于載玻片中央,用蓋玻片覆蓋后鏡檢。⑶暗視野下先低倍鏡后高倍鏡,移動(dòng)視野,尋找并觀察管型。(注:管型是蛋白質(zhì)、細(xì)胞及其碎片等物質(zhì)在遠(yuǎn)曲小管、集合管中凝固形成的圓柱體蛋白聚體)7.血清尿素氮的測(cè)定:所需試劑:動(dòng)物的血清、尿素氮標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液I、尿素氮標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II、蒸餾水、二乙酰一污一氨硫脲液(試劑I)、酸混合液(試劑II)配置方法如下:
試劑或樣品(ml)測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管血清0.02尿素氮標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II0.1蒸餾水0.50.40.5試劑I0.50.50.5試劑II4.04.04.0加完上述試劑后,混勻置沸水鍋中煮沸10分鐘,置流水中冷卻3分鐘,于721型分光光度計(jì)上用520mm波長(zhǎng)比色,以空白管調(diào)零,讀取各測(cè)定管及標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度。按下列公式計(jì)算:血清尿素氮二(測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)X5'X5‘‘(注:'為測(cè)定管血清稀釋倍數(shù)/標(biāo)準(zhǔn)管尿素氮應(yīng)用液稀釋倍數(shù)‘‘為尿素氮標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II濃度)結(jié)果:⑴尿蛋白定性檢查結(jié)果:尿液的蛋白含量為2-5g/L⑵血清尿素氮測(cè)定結(jié)果圖表如下:實(shí)驗(yàn)組測(cè)定管1測(cè)定管2平均值標(biāo)準(zhǔn)管空白管尿素氮10.1530.1060.12950.0050647.520.1470.1230.1350.0040843.7530.4090.3910.40.0370270.270340.1480.1570.15250.0040953.12550.280.2560.2680.0330203.030360.3350.4140.37450.0180520.138970.6560.7460.7010.0540324.53780.360.3990.37950.0170558.088290.3290.1890.2590.0140462.5100.3180.4170.39450.0410240.5488平均值502.3489對(duì)照組測(cè)定管1測(cè)定管2平均值標(biāo)準(zhǔn)管空白管尿素氮10.0320.0420.0370.0070132.142920.0340.0390.03650.0060152.0833平均值142.1131尿素氮合蛆1 2組別實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的血清尿素氮的含量
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