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第八章吸光光度法7.1概述
基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立的分析方法,稱為吸光光度法,包括比色法、可見紫外分光光度法及紅外光譜法等。7.1.1比色分析法和分光光度法的特點(diǎn)和適用范圍1.靈敏度高;測定濃度的下限一般為10-5~10-6mol/L2.準(zhǔn)確度較高;比色分析法的相對誤差為5%~10%,分光光度法為2%~5%3.快速簡便,應(yīng)用廣泛;7.1.2光的基本性質(zhì)光是一種電磁波,具有波動性和粒子性。400nm760nm可見光區(qū)域紫外區(qū)紅外區(qū)在可見光區(qū)域各種光的波長范圍:紅光650~760nm橙光600~650nm黃光580~600nm黃綠光560~580nm綠光500~560nm藍(lán)綠光480~500nm藍(lán)光450~480nm紫光400~450nm7.1.3光的選擇吸收與溶液顏色1.光的互補(bǔ)色紅橙黃綠青青藍(lán)藍(lán)紫白光2.物質(zhì)對光的選擇吸收與物質(zhì)顏色當(dāng)一束白光通過溶液時(shí),溶液能夠選擇性地吸收白光中的某一種波長的光,而讓其余波長的光透過,我們看到的溶液顏色是吸收光的互補(bǔ)色。例如:CuSO4溶液呈蘭色,是由于該溶液選擇性的吸收了白光中的黃色光。又例:KMnO4溶液呈紫色,是由于溶液選擇性的吸收了白光中的綠光。例、某溶液在陽光(白光)下呈蘭色,在鈉光(黃光)下呈()A、黃色B、蘭色
C、無色D、黑色7.2吸光光度法基本原理7.2.1光吸收定律當(dāng)一束平行的單色光通過某一溶液時(shí),由于溶液對光的吸收,透過光的強(qiáng)度必小于入射光的強(qiáng)度,單色光通過溶液被吸收的程度稱為吸光度,用“A”表示。實(shí)驗(yàn)證明:式中:T——透光率,I0——入射光強(qiáng)度;It——透過光強(qiáng)度;a——吸光系數(shù);b——液層厚度;c——溶液濃度;如果濃度c單位為mol/L,液層厚度b單位為cm,吸光系數(shù)a用表示,稱為摩爾吸光系數(shù),單位為——稱為光吸收定律,又叫朗伯-比耳定律。例1:某溶液遵循光吸收定律,當(dāng)濃度為C時(shí)透光率為T,當(dāng)濃度為2C,液層厚度不變時(shí),透光率為()A、2TB、TC、D、T2例2:一束單色光通過厚度為1cm的有色溶液后,強(qiáng)度減弱20%,當(dāng)它通過厚度為5cm的相同溶液時(shí),強(qiáng)度將減弱()A、42%B、58%C、67%D、78%例3、已知Fe2+的濃度為560ug/l的溶液,顯色后在2.00cm的比色皿中測得吸光度為0.2,則有色化合物的摩爾吸光系數(shù)為____L·mol-1·cm-1.(已知Fe的式量為55.85)例4、某有色溶液在2.00cm吸收池中,測得百分透光率T%=50,若改用(1)1cm(2)3cm厚的吸收池時(shí),其T%和A各為多少?
7.2.2吸收光譜曲線同一溶液對不同波長的光,其吸光度不同,將不同波長的光通過某一固定溶液,測得每一波長下的吸光度,如果以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),所得曲線叫吸收光譜曲線。由圖可知,(1)不同濃度的KMnO4溶液,其最大吸收波長相同,為525nm.即對綠光產(chǎn)生最大程度的吸收。(2)同一物質(zhì),吸收光譜曲線形狀類似。例、下列表述不正確的是()A、吸收光譜曲線表明了吸光度隨波長的變化;B、吸收光譜以波長為縱坐標(biāo),吸光度為橫坐標(biāo);C、吸收光譜曲線中,最大吸收處的波長為最大吸收波長;D、吸收光譜曲線表明了吸光物質(zhì)的光吸收特性。某一物質(zhì)的最大吸收波長是吸光光度分析中選擇入射光的依據(jù)。7.3顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇有些物質(zhì)本身具有明顯的顏色,如KMnO4,可以直接進(jìn)行比色分析。但大多數(shù)物質(zhì)本身無顏色或顏色淺,進(jìn)行吸光
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