臨床微生物的鑒定與藥敏

微生物檢驗的意義與流程標本采集應選擇在應用抗菌藥物之前采集標本革蘭氏染色

抗酸染色墨汁染色細菌與真菌培養(yǎng)生化鑒定儀器自動鑒定紙片法MIC法臨床細菌工作者需要從各種標本中分離識別細菌是屬于病原菌、條件致病菌或正常菌群，要正確鑒定分離出的微生物的歸屬或種。因為只有明確歸屬的細菌，才有可能根據(jù)特定的形態(tài)、培養(yǎng)和生化特征，確立未知細菌的分類屬相，藥敏實驗的判斷規(guī)則，并作為感染疾病治療的依據(jù)。鏡檢接種培養(yǎng)鑒定藥敏實驗

血液及骨髓標本尿液標本穿刺液標本導管臨床標本主要包括：無菌體液，有不引起疾病的正常菌群寄居糞便標本痰及上呼吸道標本燒傷標本生殖道標本組織標本無菌體液正常菌群寄居臨床標本的分類細菌分類的依據(jù)和方法·細菌的著色性，形態(tài)，芽孢、鞭毛和莢膜結(jié)構(gòu)等·細菌的生物化學特征如：營養(yǎng)方式、代謝產(chǎn)物特點和對氧分子的需求等細菌的生理、生物化學與細菌分類遺傳物的特征與細菌分類細菌的生理、生化表型是由其所含的遺傳基因所決定若對細菌作分型，常采用的抗原結(jié)構(gòu)、噬菌體和細菌素敏感性抗原結(jié)構(gòu)、噬菌體和細菌素細菌分類要綜合其細胞學、生理學、生物化學、免疫學等特征。同時以抗原結(jié)構(gòu)特點，遺傳物質(zhì)DNA分子的結(jié)構(gòu)來闡明各種細菌間的親緣關(guān)系。臨床細菌的主要分類革蘭氏陽性桿菌革蘭氏陽性球菌

觸酶試驗革蘭氏陰性球菌革蘭氏陰性桿菌

氧化酶實驗病原菌ADBC革蘭氏陽性球菌葡萄球菌凝固酶陰性葡萄球菌腸球菌鏈球菌

A群鏈球菌B群鏈球菌

C群鏈球菌草綠色鏈球菌肺炎鏈球菌

金黃色為葡萄球菌涂片：革蘭陽性球菌，葡萄狀排列觸酶試驗陽性血漿凝固酶陽性接種于血平皿有金黃色素透明溶血環(huán)發(fā)酵甘露醇MRSA肺炎、偽膜性腸炎、腎盂腎炎、心包炎、化膿性感染、敗血癥、膿毒血癥M1M2M4M3凝固酶陰性葡萄球菌廣泛存在于皮膚表面、口腔及腸道中菌血癥患者占10%心內(nèi)膜炎的主要致病菌重要的院內(nèi)感染菌耐藥性高于凝固酶陽性的葡萄球菌

腸球菌涂片：革蘭陽性球菌，呈短鏈排列觸酶試驗陰性膽汁七葉苷陽性接種于血平皿5%羊血平皿生長好灰白色、濕潤、光滑中等大小有γ–溶血或β-溶血尿路感染：尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎糖尿病、惡性腫瘤并發(fā)M1M2M4M3感染主要為糞腸球菌，其次為屎腸球菌和鳥腸球菌鏈球菌A群鏈球菌

又稱化膿性鏈球菌，廣泛存在于自然界，正常人的鼻咽部和皮膚。能產(chǎn)生多種毒素及毒性物質(zhì)，侵襲力強。其M蛋白抗原，具有吞噬作用，與毒力有關(guān)。

B群鏈球菌又稱無乳鏈球菌，易引起新生兒的敗血癥草綠色群鏈球菌是亞急性心內(nèi)膜炎的主要病原菌，常定居在扁桃體、鼻咽部或牙齦腫，可發(fā)生局部病灶性感染。肺炎鏈球菌人體口腔、鼻咽部的正常菌群，并不會引起疾病。當機體抵抗力下降時，可引起大葉性肺炎、支氣管肺炎，如處理不當可導致血流播散，導致敗血癥。肺炎鏈球菌涂片：革蘭陽性球菌，矛頭狀尖端相背或短鏈排列，有莢膜血平板上為灰白色、扁平光滑、濕潤半透明、草綠色溶血環(huán)。培養(yǎng)久后，菌落中央凹陷臍窩狀菊糖發(fā)酵試驗陽性、膽汁溶菌試驗陽性引起肺炎鏈球菌腦膜炎，支氣管肺炎、心內(nèi)膜炎、胸膜炎、中耳炎和關(guān)節(jié)炎M1M2M4M3奈瑟菌屬奈瑟菌屬屬于奈瑟菌科，除奈瑟菌屬外，還包括莫拉菌屬、不動桿菌屬、金氏菌屬。奈瑟菌屬共含10個種。淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌嗜乳糖奈瑟菌干燥奈瑟菌淺黃奈瑟菌金黃奈瑟菌粘膜奈瑟菌灰色奈瑟菌細長奈瑟菌多糖奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌奈瑟菌屬腦膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌前列腺炎、睪丸炎、尿道周圍膿腫、附件炎、盆腔炎和關(guān)節(jié)炎革蘭陰性雙球菌，呈卵圓形或腎形。只發(fā)酵葡萄糖。氧化酶、觸酶陽性

流行性腦脊髓膜炎

腦膜炎球菌菌血癥革蘭陰性球菌，成雙排列，菌體呈腎形或豆形只分解葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)少量酸。氧化酶陰性在巧克力平皿上培養(yǎng)24~48小時或72小時生長較好。菌落隆起、光滑、濕潤、邊緣整齊。易乳化、無色素、生理鹽水不自凝。在5%CO2條件下生長良好.

革蘭氏陰性桿菌腸桿菌

傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、大腸埃希菌、氣單胞菌、肺炎克雷伯、變形桿菌、布魯菌和沙雷菌等。在血平皿、中國藍培養(yǎng)基上都能生長。非發(fā)酵革蘭陰性桿菌

是指一群不能利用葡萄糖或僅能以氧化形式利用葡萄糖的革蘭陰性桿菌。

包括：銅綠假單胞菌、不動桿菌屬、沙麥芽窄食單胞菌、洋蔥克雷伯菌大腸埃希菌引起腸道感染的大腸埃希菌腸致病性大腸埃希菌腸道聚集-粘附性大腸埃希菌產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌腸侵襲性大腸埃希菌腸出血性大腸埃希菌發(fā)熱，嘔吐，腹瀉，便中多粘液無血痙攣性腹痛等革蘭氏陰性桿菌，氧化酶試驗陰性

API，compact進一步鑒定，血清O1，O139臨床表現(xiàn)鏡檢與趨向性試驗鑒定可見中等大小、圓形、凸起的灰白色菌落少數(shù)呈β-溶血，發(fā)酵乳糖，硝酸鹽還原試驗陽性接種及生化銅綠假單胞菌術(shù)后傷口感染、褥瘡、膿腫、燒傷后感染、化膿性中耳炎，菌血癥和院感的主要致病菌革蘭陰性桿菌，菌體呈多形體，球桿狀和長絲狀，成對或成鏈排列，有鞭毛氧化酶、觸酶試驗陽性，有動力精氨酸水解酶陽性，氧化分解葡萄糖，但不發(fā)酵臨床鏡檢染色鑒定菌落周圍有透明溶血環(huán)，金屬光澤。特殊生姜氣味的灰綠色或藍綠色菌落。多數(shù)產(chǎn)生綠膿素或熒光素接種血平皿嗜血桿菌屬隸屬于巴斯德菌科流感嗜血桿菌副流桿嗜血桿菌溶血嗜血桿菌副嗜沫嗜血桿菌杜克雷嗜血桿菌埃及嗜血桿菌副溶血嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌遲緩嗜血桿菌流感嗜血桿菌臨床致病物質(zhì)主要為內(nèi)毒素和莢膜的抗吞噬作用主要引起呼吸道感染，腦膜炎，關(guān)節(jié)膿腫和其他化膿感染接種與鏡檢接種于巧克力平皿上5%CO2,35°培養(yǎng)菌落為細小，灰白，光滑，濕潤，半透明菌落，革蘭陰性小桿菌，呈多形性生長因子把可疑菌密涂于腦心浸液瓊脂平皿上，把X、V和X+V因子紙片貼在平皿上，細菌只在X+V因子周圍生長，不在X因子或V因子周圍生長衛(wèi)星現(xiàn)象把可疑菌株涂在平皿上，將金黃色葡萄球菌點種于培養(yǎng)基劃線區(qū)，在葡萄球菌落周圍的菌落大，遠離金葡菌的菌落小真菌檢驗目前自然界已發(fā)現(xiàn)超過10萬種真菌，廣泛分布于土壤、水和空氣中，也可見于正常人的皮膚及與外界相通的腔道中真菌的分類一.按真菌菌落形態(tài)分類

--霉菌多細胞，產(chǎn)生菌絲和孢子，一般為毛樣菌落

--酵母單細胞，菌落為乳酪樣

--雙相真菌受環(huán)境因素改變的影響，形態(tài)由霉菌型變?yōu)榻湍感投?按感染部位分類

--淺部真菌感染指侵犯皮膚、指甲、毛發(fā)

--深部真菌感染指侵犯皮下組織、內(nèi)臟及全身的感染三.按真菌致病性分類

--致病性真菌

--條件致病性真菌指在機體免疫力低下時才致病的真菌，通常與人處于共生狀態(tài)，為人體正常菌群的一部分真菌檢驗念珠菌屬-屬酵母樣真菌，產(chǎn)生假菌絲，與酵母菌不同而稱其為類酵母菌，也成為假絲酵母菌。常見12種。

隱球菌屬新型隱球菌白色隱球菌羅倫隱球菌淺黃隱球菌地生隱球菌指甲隱球菌

其他酵母及酵母樣真菌-包括9個屬，與人類感染有一定關(guān)系厭氧菌—難辨梭菌接種

在CCFA平板上呈不透明、淡黃色、邊緣不整齊的粗糙型菌落染色

革蘭陽性粗大桿菌，卵圓形芽胞位于次極端生化

發(fā)酵果糖毒素篩查

接種的同時做minividas的上機操作

抗生素概念概念

抗生素是能抵抗致病微生物的藥物，是抗菌消炎藥中最大的一類來源

抗生素是由細菌、真菌或其他微生物在生活過程中所產(chǎn)生的物質(zhì)，具有抑制或殺滅細菌、真菌、螺旋體、支原體、依原體等致病微生物的作用，故能治病?？股胤诸?1)β-內(nèi)酰胺類：這是品種最多，用得最多、最廣的一類，此類包括兩部分。①青霉素：主要對不產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的需氧革蘭陽性菌、部分苛養(yǎng)菌、需氧革蘭陰性桿菌以及部分厭氧菌具有抗菌活性。常用的品種有青霉素鈉、青霉素鉀、氨芐西林鈉、阿莫西林、哌拉西林、青霉素V鉀等。②頭孢菌素：對需氧和厭氧的革蘭陽性和陰性菌的抗菌譜不盡相同。常用品種有頭孢氨芐、頭孢羥氨芐、頭孢唑啉鈉、頭孢拉定、頭孢曲松鈉等。(2)氨基糖苷類：是結(jié)構(gòu)相關(guān)的抗菌藥物，可在核糖體水平上抑制細菌蛋白的合成。主要治療革蘭陰性桿菌。常用品種有鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、小諾米星等?？股胤诸?3)四環(huán)素類：在核糖體水平上抑制某些革蘭陽性和革蘭陰性菌的蛋白的合成。常用四環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素等。(4)大環(huán)內(nèi)酯類：在核糖體水平上抑制細菌蛋白的合成。常用地紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素、泰利霉素等。(5)氯霉素類：常用的品種即氯霉素。(6)林可霉素類：林可霉素、克林霉素。