高效液相色譜法測(cè)定羅布麻茶中槲皮素的含量

高效液相色譜法測(cè)定羅布麻茶中槲皮素的含量

高效液相色譜法測(cè)定羅布麻茶中槲皮素的含量高效液相色譜法測(cè)定羅布麻茶中槲皮素的含量

:-%50∶50。

18250,5μ℃。

——=+=。

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:;;;

,具有平肝安神、清熱利水作用。

臨床用于肝陽(yáng)眩暈、心悸失眠、浮腫尿少,高血壓病,神經(jīng)衰弱,腎炎浮腫。

現(xiàn)已被《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》收載,該標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定項(xiàng)下規(guī)定以蘆丁為對(duì)比品,采納分光光度法測(cè)定。

鑒于該含量測(cè)定方法操作比較繁瑣、重現(xiàn)性差,因此選擇蘆丁水解苷元槲皮素作為羅布麻茶含量測(cè)定的掌握成分。

本試驗(yàn)報(bào)道高效液相色譜法測(cè)定羅布麻茶中槲皮素含量的方法學(xué)討論,結(jié)果表明,該方法簡(jiǎn)便、精確?????、重現(xiàn)性好,可以掌握羅布麻的質(zhì)量[1].

1儀器與試劑

島津-10高效液相色譜儀,-10紫外檢測(cè)器,-230柱溫箱;18色譜柱250,5μ;島津-2401紫外分光光度計(jì);211電子天平。

槲皮素對(duì)比品批號(hào)102081-202306,購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

甲醇為色譜純,水為重蒸水,其余試劑均為分析純。

羅布麻茶樣品山東省百草藥業(yè)有限公司供應(yīng)。

2方法與結(jié)果

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-%磷酸溶液50∶50為流淌相;檢測(cè)波長(zhǎng)為371;柱溫30℃。

理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000[2-3].見圖1.

,置于102量瓶中,加流淌相溶解并稀釋至刻度,搖勻,得對(duì)比品溶液。

取本品內(nèi)容物過(guò)3號(hào)篩,精密稱定,置圓底燒瓶中,加甲醇-25%鹽酸溶液4∶120,加熱回流1,取出,放冷,濾過(guò),將濾液轉(zhuǎn)移至102量瓶中,加甲醇-25%鹽酸溶液4∶1稀釋至刻度,搖勻,即得。

分別精密吸取對(duì)比品溶液1、2、4、6、8,置于10量瓶中,加流淌相稀釋至刻度,得對(duì)比品溶液1、2、3、4、5、、、、。

每份溶液進(jìn)2針,記錄峰面積,以峰面積為縱坐標(biāo),對(duì)比品濃度為橫坐標(biāo),計(jì)算回歸方程。

得回歸方程:=+=,——.

取重復(fù)性試驗(yàn)中批號(hào)06040102的供試品溶液為穩(wěn)定性試驗(yàn)考察對(duì)象,分別在0、1、2、4、6進(jìn)行,平均峰面積=%,結(jié)果表明供試品在8內(nèi)測(cè)定穩(wěn)定。

取批號(hào)為06040102的供試品溶液6份,按上述色譜條件測(cè)定峰面積,連續(xù)測(cè)定6次。

平均峰面積為305797,=%=6。

取批號(hào)為06040102的樣品9份,,精密稱定,置于圓底燒瓶中,分別加入對(duì)比品適量,按“供試品溶液的制備”方法配制9份供試品溶液,每份溶液進(jìn)2針,采納標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法依法測(cè)定,計(jì)算,%,=%.表明本方法回收率良好見表1。

表1加樣回收率測(cè)定結(jié)果略表2羅布麻茶樣品含量測(cè)定結(jié)果略

3爭(zhēng)論

槲皮素溶于甲醇、乙醇,微溶于水。

本試驗(yàn)考察了不同提取溶劑和水解條件,結(jié)果表明,選擇甲醇-25%鹽酸4∶1溶液為提取溶劑,直接回流水解60,對(duì)羅布麻茶中槲皮素提取效果好。

對(duì)槲皮素甲醇溶液于200——400波長(zhǎng)下掃描,結(jié)果最大汲取波長(zhǎng)為371,因此,選用371作為檢測(cè)波長(zhǎng),結(jié)果供試液中槲皮素與其它組分色譜峰得到較好