腸桿菌科及檢驗(yàn)考點(diǎn)總結(jié)

腸桿菌科及檢驗(yàn)考點(diǎn)總結(jié)一、概述（共性）大多數(shù)腸道桿菌屬于正常菌群。當(dāng)機(jī)體免疫力降低或侵入腸道外組織時(shí)成為條件致病菌而引起疾病。腸桿菌科細(xì)菌的種類繁多。主要根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)、生化反應(yīng)、抗原性質(zhì)以及核酸相關(guān)性進(jìn)行分類。根據(jù)《伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》（1984年）將腸桿菌科的細(xì)菌分為20個(gè)屬即埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬、哈夫尼亞菌屬、愛德華菌屬、普羅威登斯菌屬、變形桿菌屬、摩根菌屬、耶爾森菌屬等。（二）生物學(xué)特性液體培養(yǎng)基：渾濁生長(zhǎng)。3.生化反應(yīng)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、或產(chǎn)酸產(chǎn)氣；乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：非致病菌+，致病菌-（除外變形桿菌）。觸酶陽性；氧化酶陰性；硝酸鹽還原為亞硝4.抗原構(gòu)造）：鞭毛H～O變異耐藥性變異生化反應(yīng)性質(zhì)的改變6.抵抗力7.腸桿菌科的初步分類1.致病性腸道桿菌：以腸內(nèi)感染為主，腹瀉為共顯癥狀，引起急慢性腸道感染、食物中毒、旅游者腹2.條件致病菌：為醫(yī)院感染主要病原菌，出現(xiàn)移位感染。大腸埃希菌、變形桿菌及克雷伯菌等條件致病菌可引起泌尿生殖道、傷口等部位的感染。（四）微生物檢驗(yàn)①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧化-發(fā)酵試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細(xì)菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)，將腸桿菌科的細(xì)菌分為三個(gè)類群；根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果初步定屬、種，再用診斷血清做凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。二、埃希菌屬臨床最常見的是大腸埃希菌。（一）生物學(xué)性狀G-，短桿菌1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm。多數(shù)有周鞭毛，有菌毛，有莢膜或微莢膜。2.培養(yǎng)特性普通營(yíng)養(yǎng)肉湯：渾濁生長(zhǎng)。血瓊脂平板：少數(shù)菌株產(chǎn)生β-溶血環(huán)。伊紅亞甲藍(lán)瓊脂：菌落呈藍(lán)紫色并有金屬光澤（發(fā)酵乳糖）。麥康凱和SS瓊脂：粉紅色菌落。3.生化反應(yīng)吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗(yàn)（IMViC試驗(yàn)）為++--。2動(dòng)力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基為++-。24.抗原結(jié)構(gòu)菌體抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三種構(gòu)成。一個(gè)菌株的抗原類型由特殊的O、K和H抗原的代碼表示，其血清型別的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58:H2。致病物質(zhì)：主要是侵襲力、內(nèi)毒素、腸毒素等。1.腸道外感染以泌尿系統(tǒng)感染常見，還有菌血癥，膽囊炎，腹腔膿腫。2.腸道感染（致病性大腸埃希菌）腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。腸致病性大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）：可侵入結(jié)腸黏膜上皮，引起痢疾樣腹瀉（黏液膿血便）。腸出血性大腸埃希菌（EHEC又稱產(chǎn)志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。腸黏附性大腸埃希菌（EAggEC新近報(bào)道能引起腹瀉。3.CDC將大腸埃希菌O157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目在北美許多地區(qū)，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見6、7、8三個(gè)月O157：H7感染的發(fā)生率最高。腸道感染可采集糞便；腸道外感染可根據(jù)臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。2.檢驗(yàn)方法及鑒定最后鑒定：補(bǔ)充系列生化試驗(yàn)致病性大腸埃希菌◆鑒別試驗(yàn)：醋酸鈉、葡萄糖銨、粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸試驗(yàn)。血清學(xué)試驗(yàn)三、志賀菌屬人類細(xì)菌性痢疾最常見的病原菌，通稱痢疾桿菌。根據(jù)生化反應(yīng)與血清學(xué)試驗(yàn)該屬細(xì)菌分為痢疾、福氏、鮑氏和宋內(nèi)志賀菌四群。我國以福氏和宋內(nèi)志賀菌引起的菌痢最為常見。（一）生物學(xué)特性G-，短小桿菌2～3）μm×（0.5～0.7）μm，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。2.培養(yǎng)特性3.生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)陰性，動(dòng)力陰性，不產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶；KIA：K/A，HS（-2IMViC：-、+、-、-。志賀菌屬的細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖（宋內(nèi)志賀菌可遲緩分解乳糖吲哚試驗(yàn)陰性，H2S4.抗原結(jié)構(gòu)O抗原分群特異性抗原和型特異性抗原兩類。與相應(yīng)抗血清的凝集作用。加熱100℃、60分鐘可消除K抗原對(duì)O抗原的阻斷作用，在一定條件下可產(chǎn)生S-R變異及耐藥性變異。（二）臨床意義致病物質(zhì)：傳染源為病人和帶菌者，經(jīng)糞口傳播。盡可能在發(fā)病早期及治療前采集新鮮糞便，選擇膿血便或黏液便，必要時(shí)可用肛拭子采集。2.檢驗(yàn)方法及鑒定靛基質(zhì)賴氨酸黏液酸、醋酸鹽、枸櫞酸鹽 +大腸埃希菌++++ 志賀菌類志賀鄰單胞菌志賀菌傷寒沙門菌-+-+硫化氫-+氧化酶試驗(yàn)-+A-FO診斷血清-+人工主動(dòng)免疫用于預(yù)防目前尚不理想。預(yù)防的主要措施是防止進(jìn)食被污染的食品、飲料及水，及早發(fā)現(xiàn)及早積極治療攜帶者。治療細(xì)菌性痢疾一般首選氟喹諾酮類抗生素。播，污染水和食物可引起暴發(fā)流行。（一）生物學(xué)性狀2.培養(yǎng)特性 3.生化反應(yīng)數(shù)菌株產(chǎn)生H2S，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）。4.抗原結(jié)構(gòu)表面抗原：已證實(shí)沙門菌屬有Vi、M和5抗原三種。5.變異性H～O變異相位變異：具有雙相H抗原（第Ⅰ相為特異相，第Ⅱ相為非特異相）的沙門菌變成只有其中某一相H所致疾?。?.腸熱癥即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發(fā)熱癥狀。為法定傳染病之一。2.食物中毒3.慢性腸炎4.敗血癥5.沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。（三）微生物檢驗(yàn)根據(jù)不同疾病采取不同的標(biāo)本進(jìn)行分離與培養(yǎng)。食物中毒采集食物與糞便。2.檢查方法及鑒定沙門菌血清學(xué)鑒定主要借助于沙門菌O抗原多價(jià)血清與O、H、Vi抗原的單價(jià)因子血清。血清學(xué)診斷——肥達(dá)試驗(yàn)用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗(yàn)，以檢測(cè)患者血清中抗體的含量，來判斷機(jī)體是否受沙門菌感染而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙門菌的種類。加強(qiáng)飲食衛(wèi)生，防止污染食品及水源經(jīng)口感染，攜帶者的積極治療，皮下注射死菌苗或口服減毒活菌這三個(gè)屬的細(xì)菌為腸道寄居的正常菌群，在一定條件下能引起各種感染，也是醫(yī)源性感染的重要條件（一）生物學(xué)特性G-，桿菌，兩端鈍圓，有明顯的多形性，呈球狀或絲狀；周身鞭毛（摩根菌屬的部分菌株在30℃以上培養(yǎng)條件下不形成鞭毛無芽胞，無莢膜。2.培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，生長(zhǎng)溫度10～43℃。營(yíng)養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平板：普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴(kuò)散生長(zhǎng)現(xiàn)象。產(chǎn)黏變形桿菌具有產(chǎn)生黏液狀薄膜層的能力及溶血性質(zhì)。普羅威登斯菌和摩根菌無遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象。含有膽鹽的培養(yǎng)基：菌落呈扁平、圓形、半透明。含有鐵或鉛離子的培養(yǎng)基：產(chǎn)硫化氫菌株菌落中心呈黑色。液體培養(yǎng)基：迅速生長(zhǎng)，早期培養(yǎng)物呈渾濁，有部分沉淀。3.生化反應(yīng)三屬菌共同特點(diǎn)是氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶陽性的革蘭陰性桿菌。變形桿菌屬普羅威登斯菌屬摩根菌屬遷徙生長(zhǎng)+--硫化氫產(chǎn)生+--液化明膠鳥氨酸脫羧酶枸櫞酸鹽利用++-----++奇異變形桿菌奇異變形桿菌--+產(chǎn)黏變形桿菌 + 普通變形桿菌++-靛基質(zhì)麥芽糖鳥氨酸脫羧酶產(chǎn)堿普羅威登斯菌產(chǎn)堿普羅威登斯菌斯氏普羅威登斯菌雷氏普羅威登斯菌脲酶 +-+-側(cè)金盞花醇+-+普通變形桿菌和奇異變形桿菌引起尿道、創(chuàng)傷、燒傷的感染。普通變形桿菌還可引起多種感染及食物中毒；奇異變形桿菌還可引起嬰幼兒腸炎。產(chǎn)黏變形桿菌尚無引起人類感染的報(bào)道。外-斐（Weil-Felix）反應(yīng)：普通變形桿菌OX、OX、OX的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原，是 用以診斷某些立克次體病的依據(jù)。2.普羅威登斯菌屬本屬菌可引起燒傷、創(chuàng)傷與尿道感染。3.摩根菌屬本屬細(xì)菌為醫(yī)源性感染的重要病原菌之一。（三）微生物檢驗(yàn)2.檢驗(yàn)方法及鑒定（1）直接涂片瓊脂平板上。變形桿菌屬在血瓊脂上呈遷徙生長(zhǎng)，在腸道菌選擇培養(yǎng)基上形成不發(fā)酵乳糖菌落，在SS瓊脂上常為有黑色中心的菌落。六、耶爾森菌屬其中鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌與人類致病有關(guān)。（一）鼠疫耶爾森菌（一）鼠疫耶爾森菌俗稱鼠疫桿菌，是烈性傳染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性傳染病，通過直接接觸染疫動(dòng)物或節(jié)肢動(dòng)物叮咬而感染。（1）形態(tài)與染色：有莢膜，無鞭毛，無芽胞。需氧和兼性厭氧。最適生長(zhǎng)溫度是28～30℃,培養(yǎng)基最適pH為6.9～7.1。培養(yǎng)16～18h，用顯微鏡觀察可見一層形狀不一，淺灰色小菌落，這是鼠疫耶爾森菌培養(yǎng)初期的菌落特培養(yǎng)24～48h后可形成直徑0.1～0.2mm，圓形，中心突出，透明的淺灰色小菌落。KIA：K（A）/A，HS（-）2MIU：-、-、-2.微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：主要采集血液、痰和淋巴結(jié)穿刺液。注：鼠疫耶爾森菌為甲類病原菌，傳染性極強(qiáng)，故應(yīng)嚴(yán)格遵守檢驗(yàn)操作規(guī)程，要求實(shí)驗(yàn)室有隔離設(shè)施，直接涂片檢查；分離培養(yǎng)；鑒定；最后鑒定(①噬菌體裂解試驗(yàn)；②動(dòng)物試驗(yàn)；③免疫學(xué)方法）。（二）小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（1）形態(tài)與染色菌體大小為（1.0～2.0）μm×（0.5～1.0）μm，25℃培養(yǎng)時(shí)形成周鞭毛，呈翻滾旋轉(zhuǎn)狀運(yùn)動(dòng)，37℃培養(yǎng)無動(dòng)力，無芽胞，無莢膜的革蘭陰性球桿菌。血瓊脂平板上，形成直徑為1～2mm，圓形光滑，凸起的菌落。SS瓊脂板上生長(zhǎng)不良。液體培養(yǎng)基中呈渾濁生長(zhǎng)，液體表面可形成白色菌膜或有沉淀生成。2.致病性（1）致病因素：侵襲力和腸毒素。小腸結(jié)腸炎、末端回腸炎、胃腸炎、闌尾炎和腸系膜淋巴結(jié)炎。除腸道感染外尚可發(fā)生敗血癥，結(jié)節(jié)性紅斑及關(guān)節(jié)炎等。3.微生物檢驗(yàn)菌落形態(tài)→G→氧化酶（-）→初步鑒定→血清學(xué)鑒定30℃以下動(dòng)力（+）脲酶（+）（三）假結(jié)核耶爾森菌菌落：圓形，中心凸起，呈顆粒狀，灰黃色，半透明的菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長(zhǎng)者為光滑型菌株，沉淀生長(zhǎng)為粗糙型菌株。七、腸桿菌科的其他菌屬在臨床感染標(biāo)本中具有較高的分離率，大多屬于條件致病菌。枸櫞酸桿菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬沙雷菌屬枸櫞酸桿菌屬包括弗勞地枸櫞酸桿菌、異型枸櫞酸桿菌和無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌三個(gè)種，屬正常菌群成員。發(fā)酵乳糖，在液體培養(yǎng)基中呈渾濁生長(zhǎng)。（3）生化反應(yīng)：靛基質(zhì)硫化氫丙二酸鹽弗勞地枸櫞酸桿菌-/++-異型枸櫞酸桿菌+-+無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌+--2.致病性本菌為條件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或醫(yī)療插管術(shù)后的泌尿道、呼吸道中檢出，可引起敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、中耳炎和心內(nèi)膜炎等。3.微生物檢驗(yàn)（2）檢驗(yàn)方法及鑒定賴氨酸脫羧酶賴氨酸脫羧酶-+++-／+-枸櫞酸鹽利用++-枸櫞酸桿菌屬沙門菌屬愛德華菌屬2）種的鑒別：根據(jù)產(chǎn)生靛基質(zhì)、硫化氫、丙二酸鹽與否鑒別。（二）克雷伯菌屬伯菌次之。在腸道菌選擇培養(yǎng)基中為乳糖發(fā)酵型菌落。觸酶陽性、脲酶陽性、氧化酶陰性、鳥氨酸脫羧酶陰性。其中動(dòng)力和鳥氨酸脫羧酶陰性是本菌的最大特點(diǎn)。2.致病性肺炎克雷伯菌肺炎亞種引起嬰兒腸炎、肺炎、腦膜炎、腹膜炎、外傷感染、敗血癥和成人醫(yī)源性尿道臭鼻克雷伯菌引起臭鼻癥。鼻硬節(jié)克雷伯菌引起鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬節(jié)病。催娩克雷伯菌可引起呼吸道和泌尿道感染、創(chuàng)傷感染與敗血癥等。-，短而粗的桿菌，有周鞭毛，部分菌株有莢膜，無芽胞。（2）培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，最適溫度為30℃,營(yíng)養(yǎng)要求不高。在普通瓊脂上形成大而濕潤(rùn)的黏液狀菌落；在血瓊脂板上不溶血；2.致病性癥，引起新生兒腦膜炎。（四）沙雷菌屬臨床標(biāo)本中以粘質(zhì)沙雷菌最常見。G-，細(xì)小桿菌，有周鞭毛，有些菌種有微莢膜，無芽胞。粘質(zhì)沙雷菌是最小的細(xì)菌。各種沙雷菌株可以產(chǎn)生兩種色素：靈菌紅素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。2.致病性粘質(zhì)沙雷菌可導(dǎo)致呼吸道與泌尿道感染。液化沙雷菌存在于植物和嚙齒類動(dòng)物的消化道中，是人的條件致病菌，主要引（五）哈夫尼亞菌屬營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上易生長(zhǎng)。（六）愛德華菌屬（七）泛菌屬致病性：成團(tuán)泛菌是人類的條件致病菌。A.大腸埃希菌B.肺炎克雷伯菌C.陰溝腸桿菌D.銅綠假單胞菌E.傷寒沙門菌『答案解析』大腸埃希菌是超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的主要產(chǎn)酶株。大腸埃希菌以泌尿系統(tǒng)感染常見，高位嚴(yán)重尿道感染與特殊血清型大腸埃希菌有關(guān)。發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵