法醫(yī)學(xué)-生物性檢材的個(gè)體識(shí)別

生物性檢材的個(gè)體識(shí)別1.概述2.血痕檢驗(yàn)3.精液斑檢驗(yàn)4.唾液斑檢驗(yàn)5.毛發(fā)檢驗(yàn)6.骨骼檢驗(yàn)7.牙齒檢驗(yàn)8.其他組織檢驗(yàn)9.個(gè)體識(shí)別結(jié)果評(píng)估個(gè)體識(shí)別（Personalidentification）

應(yīng)用醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的理論和技術(shù)判斷生物性檢材是否同一來源。一、概述生物性檢材的個(gè)體識(shí)別意義生物性檢材通常細(xì)小且分布范圍廣罪犯難以徹底毀掉或掩蓋身份不明的尸體、活體或檢材辨明身份為偵查提供線索為審判提供證據(jù)

生物性檢材是經(jīng)歷了環(huán)境調(diào)節(jié)作用的人體組織與器官或人體體液、分泌物、排泄物及由它們形成的生物性斑痕，由于環(huán)境的作用使生物性檢材具有不確定性，對法醫(yī)鑒定人是一個(gè)嚴(yán)峻的考驗(yàn)。生物性檢材的法醫(yī)學(xué)特點(diǎn)常見生物性檢材種類血痕精斑（混合斑）毛發(fā)唾液和唾液斑軟組織硬組織（骨和牙齒）低溫或晾干保存，盡快送檢紙帶、紗布或玻璃容器包裝或存放，勿用塑料膜袋包裝物外注明物品名稱、來源、數(shù)量、采集日期等送檢同時(shí)附必要的對照樣本，如被害人或嫌疑人的血液、唾液必須附有委托書，且寫明送檢機(jī)關(guān)和聯(lián)系人、送檢物品清單、案情介紹、送檢目的要求等。包裝和送檢生物性檢材的個(gè)體識(shí)別過程肉眼檢查預(yù)試驗(yàn)確證試驗(yàn)種屬鑒定個(gè)體識(shí)別二、血痕(bloodstains)血痕檢驗(yàn)的目的：1．是否血痕2．是人血還是動(dòng)物血3．血痕的個(gè)人識(shí)別4．與案情有關(guān)的其他問題1.肉眼觀察現(xiàn)場地面、墻壁、家具、衣服、兇器、指甲縫等。黑暗現(xiàn)場用魯米諾噴射（發(fā)出熒光）。需要觀察血痕的數(shù)量、分布、位置、大小、形狀、范圍、色澤、相互關(guān)系，從而達(dá)到推斷案情的目的。顏色：鮮紅色暗紅色紅褐色褐色綠褐色灰褐色腐敗：淡綠褐色、污綠色區(qū)別：醬油、油漆、色素、顏料、染料形狀滴狀：因高度及方向而異；同等量血液落下時(shí)，落差越高，形成的斑點(diǎn)越大，周緣的小突起也越多。鋸齒狀突起指示行走方向，突起大小多少---行走速度流柱狀：血液從身體高位流向低位時(shí)形成，一般由靜脈出血引起----體位噴濺狀：似感嘆號(hào)，尖端是噴射方向---受傷時(shí)位置擦拭狀：染有血液的物體或出血部位與其他物體接觸磨擦后形成----死后移尸血印痕：染有血液的部位直接與某物體接觸形成。血指紋、血掌紋、血鞋印、血足印、兇器印痕血泊：原始現(xiàn)場距地50cm，70度距地50cm，25度距地100cm，70度距地100cm，25度現(xiàn)場奔走血痕現(xiàn)場血痕現(xiàn)場拖血痕現(xiàn)場擦拭血痕血痕的提取血痕：必須同時(shí)取周邊無斑痕部分做對照新鮮血：活體，靜脈血，EDTA抗凝；尸體，末梢血管血。4℃保存或干凈紗布、濾紙上晾干小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整塊取下，襯以消毒棉花于盒內(nèi)以防震碎2.預(yù)試驗(yàn)

預(yù)試驗(yàn)即篩選試驗(yàn)，特點(diǎn)：是血痕一定呈陽性反應(yīng)，預(yù)試驗(yàn)陰性即可認(rèn)定不是血痕或血痕已被破壞。所需的檢材量少，靈敏度高，即使肉眼看不見，也呈陽性反應(yīng)。操作簡便快速。聯(lián)苯胺試驗(yàn)Benzidinetest原理:H2O2

Hb/hamatinPoH2O+

無色[O]藍(lán)色聯(lián)苯胺聯(lián)苯胺藍(lán)靈敏度20~30萬倍，極微量血痕即可出現(xiàn)陽性（+）,陰性（-）可否定血痕/血痕已被完全破壞3.確證試驗(yàn)

特異性強(qiáng)，靈敏度不高陰性不能否定血痕，只能說未發(fā)現(xiàn)血痕。血色原結(jié)晶試驗(yàn)方法：氯化血紅素結(jié)晶試驗(yàn)光譜分析血色原結(jié)晶試驗(yàn)原理：血紅蛋白在堿性溶液中分解為正鐵血紅素和變性珠蛋白，在還原劑作用下，正鐵血紅素還原為血紅素，后者與變性珠蛋白或其他含氮化合物（如吡啶煙堿）等結(jié)合，形成血色原結(jié)晶。試劑：高山氏試劑

10%NaOH3ml混合置棕色瓶中

30%葡萄糖10ml

吡啶3ml

試劑配置好第二日使用較好，久置則反應(yīng)緩慢，甚至失效。操作結(jié)果桃紅色的星狀、菊花狀或針狀結(jié)晶4.種屬檢驗(yàn)(Speciesidentification)

沉淀環(huán)試驗(yàn)抗原抗體反應(yīng)瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)免疫電滲電泳酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)----ELISA法

膠體金標(biāo)記McAb-Hb試紙法

血清學(xué)方法細(xì)胞學(xué)方法生化方法血紅蛋白等電聚焦抗-人球蛋白消耗試驗(yàn)?zāi)z體金標(biāo)記McAb-Hb試紙法血痕血型測定紅細(xì)胞血型：ABO、MNSs、Rh、Kell、Kidd、Duffy等紅細(xì)胞酶型：EsD(酯酶D）、EAP（紅細(xì)胞酸性磷酸酶）、PGM1（磷酸葡萄糖變位酶）、GLOI（乙二醛酶I）、ADA（腺苷脫氨酶）、GPT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）等血清型：Hp、Gc、Gm、Km白細(xì)胞型：HLA-A、B5.血痕的個(gè)體識(shí)別血痕的DNA分析

DNA指紋圖技術(shù)STR-PCR技術(shù)

各種各樣的生物檢材分泌物獲得檢材中細(xì)胞經(jīng)物理化學(xué)作用釋放DNA經(jīng)過一系列實(shí)驗(yàn)操作及儀器分析得到分型結(jié)果應(yīng)用PCR反應(yīng)的對DNA進(jìn)行幾何級(jí)數(shù)放大統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算得出結(jié)論DNA分型的應(yīng)用以人找物

發(fā)現(xiàn)犯罪嫌疑人在先，獲取證實(shí)及犯罪事實(shí)的物證在后。以物找人

發(fā)現(xiàn)證實(shí)犯罪的物證在先，獲取犯罪嫌疑人再后。以物找物

對發(fā)生在不同時(shí)間、不同地點(diǎn)的案件所獲取的犯罪物證進(jìn)行串并。（如精斑、血跡、毛發(fā)等檢材的串并）以人找人

尸源的尋找與認(rèn)定。（如無名尸、碎尸、空難、焚尸等的認(rèn)定）血痕其它檢驗(yàn)

出血部位出血時(shí)間出血量出血者年齡出血者性別兩份血的同一認(rèn)定

三、精液斑(seminalstain)案情強(qiáng)奸猥褻非法性關(guān)系離婚檢材

褲頭衛(wèi)生紙床單毛巾陰道拭子新鮮精液鑒定

是否精斑個(gè)人識(shí)別生育能力鑒定一、精液的組成精子精漿

精漿水90%

有機(jī)物精素黃素膽堿卵磷脂蛋白質(zhì)氨基酸酶離子Na+K+Ca++P++Cl-Zn+SO42-特有蛋白P30

β—MSPβ—SM

α2

–SGP血型物質(zhì)ABH

Gc

TfGmKm

AcpPGM1DIA3

精子的形態(tài)正常精子分頭、體、尾三部分，長50－60um,外形似蝌蚪。頭部正面觀呈卵圓形，側(cè)面觀呈扁平形，由細(xì)胞核和頂體組成。頭長3-5um，寬2-3um，厚1-2um。頸部圓柱形，長約6um。尾部細(xì)長而彎曲，長達(dá)40-50um。HE染色：精子頭呈藍(lán)色，頭前半部不著色或淺染，尾部呈紅色?？梢姰愋途?。精子在女性生殖道的檢測時(shí)限性交后陰道內(nèi)3-8H,宮頸2-5天，子宮、輸卵管1-10天可檢活精子。陰道內(nèi)3-5天，宮頸14天可檢見死精子。精子檢出時(shí)限與被害人的體位、活動(dòng)情況有關(guān)。精子檢出率的高低與陰道內(nèi)容物的提取部位有關(guān)，宮頸刮片和陰道后穹隆擦拭物的精子檢出率較高。

三、精液檢驗(yàn)

一般性狀

乳白色，粘稠狀液體,PH7.2—8.9

比重：1.021—1.040，滲透壓：0.55—0.58數(shù)量

2-2.5ml/次，1-1.5億個(gè)/ml，總數(shù)4-6億個(gè)形態(tài)、活動(dòng)度。

頭、體、尾，50-60um。

不正常的標(biāo)準(zhǔn)

數(shù)量：<0.6億/ml，總數(shù)<1億總量<1.5ml

活動(dòng)不良的精子>40%

畸型精子>15%四、精斑檢驗(yàn)一）肉眼檢查

二）預(yù)實(shí)驗(yàn)三）確證實(shí)驗(yàn)四）血型測定和DNA檢測

1.肉眼觀察可附于衣褲、被褥、草紙、被害人腹壁、大腿和陰毛上。必要時(shí)用紫外線照射（銀白色帶淡紫暈的熒光）2.提取方法奸殺或死因不明女性尸體：取陰道內(nèi)容物，必要時(shí)取肛門、會(huì)陰、口腔標(biāo)本紙巾上的精斑精液樣本被單上的精斑

內(nèi)褲上的可疑斑痕3.精斑的預(yù)試驗(yàn)酸性磷酸酶檢驗(yàn)原理

Acp

磷酸苯二鈉萘酚

+

氨基安替比林結(jié)果鐵氫化鉀紅色醌類特點(diǎn)陽性結(jié)果說明含有酸性磷酸酶，可能是精斑。陰性結(jié)果說明檢材不是精斑或精斑酸性磷酸酶被破壞。由于酸性磷酸酶非前列腺獨(dú)有，因此陽性結(jié)果不可輕易認(rèn)定為精斑。室溫條件下酸性磷酸酶較穩(wěn)定。4.精斑的確證實(shí)驗(yàn)一）形態(tài)學(xué)檢查精子的檢出二）免疫學(xué)檢驗(yàn)抗人精沉淀實(shí)驗(yàn)抗P30沉淀實(shí)驗(yàn)其他三）生化檢驗(yàn)LDH—XGD—DAP

（甘氨酰脯氨酰二肽基氨肽酶）一）精子的檢出方法結(jié)果

HE染色頂部不著色藍(lán)頸紅尾品紅-美藍(lán)紅頭藍(lán)尾藻紅染色紅色確證標(biāo)準(zhǔn)一個(gè)完整的精子數(shù)個(gè)典型的精子頭二）免疫學(xué)方法抗人精血清沉淀實(shí)驗(yàn)抗P30血清沉淀實(shí)驗(yàn)高度的種屬特異性與器官特異性無精子的精斑亦可為陽性

P30性質(zhì)穩(wěn)定檢出時(shí)間長其他抗β—微精蛋白沉淀實(shí)驗(yàn)抗P30單克隆抗體ELISA法抗人前列腺特異性抗原p30的膠體金標(biāo)記試紙法精斑預(yù)實(shí)驗(yàn)和確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.精斑的個(gè)人識(shí)別ABO血型酶型血清型DNA多態(tài)性STR

Y-STR混合斑三）DNA分型

混合斑（精子、陰道上皮細(xì)胞

SDS、蛋白酶K完整精子DNA（陰道上皮細(xì)胞）

DDT二次消化SDS、蛋白酶DNA（精子）Y-STR基因座的特點(diǎn)1.呈單倍型父系遺傳

2.突變率低

3.特別適用于法醫(yī)學(xué)中混合斑的分析和父系家族成員的親權(quán)鑒定NSampleDYS393DYS19DYS389ⅡDYS390DYS391DYS3854嫌犯甲131729231012/18嫌犯乙121630231012/19精斑121630231012/195嫌犯131531231013/17衛(wèi)生紙131531231013/176嫌犯121528231113/13受害人內(nèi)褲121528231113/137嫌犯121629231011/16受害人內(nèi)褲121629231011/168嫌犯甲121529231012/12嫌犯乙121428241013/21嫌犯丙131528231012/12混合斑12/131528/29231012/12刑事案件的Y-STR分型結(jié)果四、唾液和唾液斑(salivarystain)

唾液：現(xiàn)場煙頭、口香糖、牙簽、飲料容器及咬痕上唾液斑在白色背景上常呈淡黃色，在紫外下發(fā)出淡青色熒光唾液斑的證明淀粉酶的檢測唾液斑的個(gè)體識(shí)別五、毛發(fā)

常見于地面、被褥、兇器上；死者手中、口中和衣服；強(qiáng)奸案被害人內(nèi)衣、外陰和大腿間提取時(shí)注意要用鑷子提取，不能損壞其附著物需要解決的問題有：是毛發(fā)還是纖維；是人毛還是動(dòng)物毛；毛發(fā)來自人體何部位；是自然脫落還是暴力拔脫，推斷致傷物；毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別。毛發(fā)的個(gè)體識(shí)別形態(tài)學(xué)觀察儀器分析分子生物學(xué)方法STR分析mtDNA測序序列多態(tài)性母系遺傳六、骨骼檢驗(yàn)（一）骨的確定1．肉眼檢查2．顯微鏡檢查骨小管、骨板、哈佛氏管等骨組織學(xué)特征。3．焚燒試驗(yàn)可用燒灼方法做初步的檢查。

（二）種屬鑒定頭顱、DNA檢測（三）一人骨或多人骨的鑒別骨骼的解剖學(xué)特征、DNA分析（四）個(gè)人特征1．形態(tài)觀察方法（1）性別骨骼的性別差異以骨盆最為明顯，其次是顱骨，其他如胸骨、鎖骨、肩胛骨、四肢長骨等亦有一定的性別差異。（2）年齡未成年骨骼的年齡鑒定主要根據(jù)四肢骨骨化中心的出現(xiàn)時(shí)間及骨傷的愈合程度。20歲以后以恥骨聯(lián)合的年齡變化最有價(jià)值，其他骨骼年齡鑒定有較大誤差。（3）身高2．圖像分析方法（1）面貌復(fù)原又稱復(fù)容法(facialreconstruction)，根據(jù)顱骨的解剖學(xué)特點(diǎn)，用科學(xué)的方法重建與死者生前面貌相似的形象。（2）顱像重合顱像重合技術(shù)(superimpoingtechnique)是將顱骨用X線拍片，將失蹤人的照片放大至同樣大小，再以顱骨照片與生前照片重疊在一起，觀察外形輪廓與眼、耳、口、鼻是否吻合,并按一定的標(biāo)志點(diǎn)和審定線進(jìn)行重合，觀察審定線是否全部重合一致，判斷兩者是否同一。3.分子生物學(xué)方法骨骼可用PCR進(jìn)行DNA分析。七、牙齒檢驗(yàn)牙齒是人體最堅(jiān)硬的組織和保存時(shí)間最長的器官，不易受環(huán)境與理化因素的影響。不同個(gè)體的牙齒發(fā)育狀況及排列方式不同，隨著牙齒的使用、磨損而出現(xiàn)的局部缺損特征，使牙齒具有了唯一性。這在法醫(yī)學(xué)個(gè)人識(shí)別中有重要意義。（一）種屬鑒定人與動(dòng)物的牙齒差別較大。食肉類動(dòng)物尖牙發(fā)達(dá)，食草類動(dòng)物側(cè)切牙、磨牙發(fā)達(dá)。（二）年齡推斷1．根據(jù)牙齒的萌出順序推斷年齡2．根據(jù)牙齒的磨耗程度推斷年齡2334444444433將上述牙磨耗度代入方程牙磨耗度值

733.6263-54-444.19343.28248.2714-8.12147.59243.6634-44-3.9253-63-725.0615.25+32.75推斷年齡48（歲）實(shí)際年齡50（歲）誤差2（歲）11111111111100

牙磨耗度值

70-3.7161-1.6651-2.3341-31-2.7121-1.48119.6611-3.1921-31-6.0441-51-2.67613.1871-13