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3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1精子的發(fā)生卵子的發(fā)生受精過程準備階段受精階段卵子成熟精子獲能穿越透明帶穿越放射冠進入卵黃膜雌雄原核形成合子形成早期胚胎發(fā)育減數(shù)分裂受精卵2細胞4細胞8細胞桑椹胚囊胚原腸胚知識回顧精子的發(fā)生卵子的發(fā)生受精準備階段受精階段卵子成熟精子獲能穿越2第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國的奧爾德姆市醫(yī)院誕生,她的名字叫路易絲.布朗。路易絲.布朗的母親梅.布朗因輸卵管阻塞而不能生育。首例試管嬰兒醫(yī)生從梅.布朗(時年31歲)體內(nèi)提取卵子,再取她丈夫(時年38歲)的精液,經(jīng)處理在體外使卵子受精,受精卵分裂形成16細胞胚后重新植入梅.布朗的子宮內(nèi)。9個多月后就生下了路易絲.布朗。第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國的奧爾德姆31988年3月10日我國首例試管嬰兒誕生著名婦產(chǎn)科專家張麗珠教授與中國首例試管嬰兒1988年3月10日我國首例試管嬰兒誕生著名婦產(chǎn)科專家張麗珠41992年我國首例三胞胎試管嬰兒1992年我國首例三胞胎試管嬰兒51982年世界首例試管牛犢問世試管牛(兩頭小牛)1982年世界首例試管牛犢問世試管牛(兩頭小牛)6

是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術??焖俜敝硠游飪?yōu)良品種4、目的:3、技術手段:體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。精子卵子受精卵早期胚胎子宮個體1、概念:2、過程:一、試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過7體外受精其中包含哪幾個關鍵步驟?1、卵母細胞的采集和培養(yǎng)2、精子的采集和獲能3、體外受精胚胎培養(yǎng)4、胚胎的早期培養(yǎng)體外受精其中包含哪幾個關鍵步驟?1、卵母細胞的采集和8二、體外受精1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)2.精子的收集和獲能3.受精二、體外受精1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)2.精子的收集和獲能3.9采集方法采集部位適宜動物操作卵子可否直接受精超數(shù)排卵法用促性腺激素處理,使其排出更多的卵子,然后從輸卵管中沖取卵子小鼠、兔、豬、羊采集的卵子可直接參與體外受精卵巢取卵法大家畜或大型動物,如牛①已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞②借助工具,直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞采集的卵母細胞,要體外人工培養(yǎng)成熟后,才能參與受精輸卵管卵巢1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)采集采集適宜操作卵子可否直接受精超數(shù)排卵法用促性腺激素處理,10采集方法適宜動物操作假陰道法手握法電刺激法體型小,易控制的家畜,如,豬、犬野生動物或經(jīng)濟動物麻醉動物,用特制電極伸入動物直腸,直接刺激射精中樞神經(jīng)(腰骶部)無需設備,徒手或戴上橡膠手套,直接把握雄性動物的陰莖,給予適當?shù)膲毫痛碳げ捎梅律鷮W方法,模仿發(fā)情雌性動物陰道環(huán)境,滿足雄性動物交配時對壓力、溫度和潤滑度的要求,同時配有活臺畜或假臺畜體型較大的家畜2.精子的采集和獲能(1).精子的采集采集方法適宜動物操作假陰道法手握法電刺激法體型小,易控制的家11獲能方法適宜動物培養(yǎng)液嚙齒類動物、家兔和豬等人工配制的獲能液牛、羊等家畜一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中培養(yǎng)法化學誘導法(2).精子的獲能獲能方法適宜動物培養(yǎng)液嚙齒類動物、家兔和豬等人工配制的獲能液12獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤壕雍吐炎右话阋旁谂囵B(yǎng)液小滴內(nèi)共同培養(yǎng)一段時間才能完成受精(1)環(huán)境(2)要求3.受精獲能溶液或精子和卵子一般要放在培養(yǎng)液小滴內(nèi)共同培養(yǎng)一段時間才13卵巢卵母細胞新鮮或解凍精液卵母細胞培養(yǎng)精液離心處理精子獲能處理MⅡ期卵母細胞受精卵培養(yǎng)獲能精子體外受精分離精子和精液培養(yǎng)法化學誘導法獲能液/專用受精溶液3.受精卵巢卵母細胞新鮮或卵母細胞培養(yǎng)精液離心處理精子獲能處理MⅡ期14受精卵應移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力1.原因2.培養(yǎng)液成分無機鹽與有機鹽維生素、激素、氨基酸、核苷酸等血清3.胚胎后期操作向受體移植/冷凍保存三、胚胎的早期培養(yǎng)受精卵應移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精15動物胚胎移植時間4.不同動物胚胎移植的時間不同牛、羊等小鼠、家兔等實驗動物人桑椹胚或囊胚階段桑椹胚或囊胚前階段8-16個細胞階段三、胚胎的早期培養(yǎng)動物胚胎移植時間4.不同動物胚胎移植的時間不同牛、羊等小鼠、16澳大利亞海福特肉用牛良種荷斯坦奶牛3萬~5萬A、價格昂貴,資金的限制B、牛生育力低,一生只能生育4-5頭澳大利亞海福特肉用牛良種荷斯坦奶牛3萬~5萬A、價格昂貴,資175.牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)5.牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)18采集良種母牛的卵母細胞卵母細胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植受體牛(子宮內(nèi)孕育)良種犢牛成熟期牛采集卵巢中的卵母細胞“試管牛”工廠化生產(chǎn)流程圖屠宰加工廠市場采集良種母牛的卵母細胞卵母細胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子19有性生殖

無性生殖核移植技術、胚胎移植遵循

不遵循體外受精胚胎移植試管動物克隆動物生殖方式技術手段遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律來自2個個體主要來自核供體

四、試管動物和克隆動物的比較有性生殖無性生殖核移植技術、遵循20試管動物技術體外受精早期胚胎培養(yǎng)卵母細胞的采集精子的獲取受精:條件:培養(yǎng)液成分:假陰道法手握法電刺激法方法一:用促性腺激素處理,使其超數(shù)排卵,從輸卵管中沖取卵子方法二:從屠宰母畜卵巢中采集方法三:直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞受精卵在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等獲能的精子+培養(yǎng)成熟的卵子完成受精本節(jié)小結試管動物技術體外受精早期胚胎培養(yǎng)卵母細胞的采集精子的獲取受精211、下列關于體外受精和早期胚胎培養(yǎng)的說法錯誤的是()A、在體外受精前,要對精子進行獲能處理B、精子和卵子一般要放在培養(yǎng)液小滴內(nèi)共同培養(yǎng)一段時間才能完成受精作用C、受精卵在受精溶液中進行早期發(fā)育D、胚胎發(fā)育到適當階段可進行冷凍保存C受精溶液區(qū)分:獲能溶液受精溶液發(fā)育培養(yǎng)液評價反饋1、下列關于體外受精和早期胚胎培養(yǎng)的說法錯誤的是()22精子獲能受精胚胎的早期培養(yǎng)胚胎移植●○○○○2、根據(jù)下圖回答卵母細胞①○○○●②③○○○④母體精子①所作的處理為,②是過程,③是,④是。精子獲能受精胚胎的早期培養(yǎng)胚胎移植●○○○○2、根據(jù)下圖回答23牛卵巢牛卵巢中采卵牛卵巢牛卵巢中采卵24借助超聲波探測儀和內(nèi)窺鏡的引導,從活母畜卵巢采集卵母細胞。操作員先將帶有超聲波探頭和吸卵針的采卵器通過生殖道插入子宮,同時

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