臨床免疫學(xué)質(zhì)量控制

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制評(píng)價(jià)情況總結(jié)分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分析測定參與臨床診斷、查房等醫(yī)療活動(dòng)，幫助臨床醫(yī)生合理分析、正確使用檢驗(yàn)結(jié)果分析中分析后

通過實(shí)踐與文獻(xiàn)復(fù)習(xí)進(jìn)行方法學(xué)研究、臨床意義探討、經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估，不斷開展循征醫(yī)學(xué)工作探討標(biāo)本采集各環(huán)節(jié)影響實(shí)驗(yàn)因素并制定相應(yīng)制度與措施檢驗(yàn)科與臨床密切的信息交流臨床醫(yī)生選擇合理有效的檢測項(xiàng)目，正確書寫化驗(yàn)申請單檢驗(yàn)科對臨床醫(yī)生選擇項(xiàng)目時(shí),提出自己的建議對檢驗(yàn)科工作人員不斷進(jìn)行專業(yè)知識(shí)繼續(xù)教育,不斷提高整體素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平

醫(yī)護(hù)人員能正確進(jìn)行標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)本采集檢查、監(jiān)督標(biāo)本是否符合要求標(biāo)本運(yùn)送病人準(zhǔn)備建立檢驗(yàn)報(bào)告解釋咨詢及建議的機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)科內(nèi)容提要分析前質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制分析后質(zhì)量控制一、分析前質(zhì)量控制

培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)室工作人員；建立臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系；實(shí)驗(yàn)室規(guī)范設(shè)置；試劑盒的選擇、評(píng)價(jià)、使用與保存儀器的校準(zhǔn)、評(píng)價(jià)、維護(hù)和保養(yǎng)；標(biāo)本采集、運(yùn)輸、核收、登記、處置與保存；質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的選擇、評(píng)價(jià)和使用。

1、試劑盒的選擇、評(píng)價(jià)、使用與保存

乙肝等試劑盒

生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)；生產(chǎn)許可證經(jīng)營許可證

藥品經(jīng)營許可證批批檢定合格；貼有防偽標(biāo)簽。

未作規(guī)定的試劑，應(yīng)從如下方面進(jìn)行評(píng)價(jià)：靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性等。

試劑盒的評(píng)價(jià)

真實(shí)性和可靠性

1、真實(shí)性：指測量值與實(shí)際值符合的程度（診斷試驗(yàn)應(yīng)能提供哪些人確實(shí)有病（真陽性）和哪些人確實(shí)無?。ㄕ骊幮裕┑闹笜?biāo)）。

評(píng)價(jià)指標(biāo)

相對靈敏度：是試驗(yàn)檢出有?。搓栃裕┑娜藬?shù)占患者總數(shù)的比例，即真陽性率。相對靈敏度是衡量真陽性率的尺度。

相對特異性：是試驗(yàn)檢出無?。搓幮裕┑娜藬?shù)占無病者總數(shù)的比例，即真陰性率。相對特異性是衡量真陰性率的尺度。

評(píng)價(jià)試劑盒相關(guān)指標(biāo)一覽表試驗(yàn)有?。ㄕ骊栃裕o?。ㄕ骊幮裕┖喜㈥栃訲PFPTP+FP陰性FNTNFN+TN總數(shù)TP+FNFP+TNTP+FP+FN+TN

相對靈敏度=TP/(TP+FN)；

相對特異性=TN/(FP+TN)；

相對符合率=(TP+TN)/(TP+FP+FN+TN)。

2、可靠性：是指在相同條件下重復(fù)試驗(yàn)獲得相同結(jié)果的穩(wěn)定程度。如試驗(yàn)結(jié)果為均數(shù)，可用變異系數(shù)表示。公式為：CV=s/x×100%

S為標(biāo)準(zhǔn)差，x為平均值。

列舉范例（資料參考）

（1）標(biāo)準(zhǔn)品來源：中國藥品生物制品檢定所。（2）標(biāo)準(zhǔn)品模式：抗HCV預(yù)期陽性100份,預(yù)期陰性98份。（3）試劑來源于H廠家。（4）在一次對丙肝試劑評(píng)價(jià)試驗(yàn)中，通過使用該試劑對198份標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)抗HCV預(yù)期陽性100份標(biāo)本中，檢出陽性98份、陰性2份：預(yù)期陰性98份標(biāo)本中，檢出陰性96份，陽性2份。

評(píng)價(jià)丙肝試劑盒相關(guān)指標(biāo)一覽表

試驗(yàn)有?。ㄕ骊栃裕o?。ㄕ骊幮裕┖喜㈥栃裕═P）98份（FP）2份TP+FP=100份陰性（FN）2份（TN）96份FN+TN=98份總數(shù)TP+FN=100份FP+TN=98份TP+FP+FN+TN=198份

經(jīng)分析：

相對靈敏度=TP/(TP+FN)=98/100=98%

相對特異性=TN/(FP+TN)=96/98=97.96%

相對符合率=(TP+TN)/(TP+FP+FN+TN)=98+96/198=97.98%試劑的正確使用與保存

按說明書操作，不能想當(dāng)然；詳實(shí)記載----批號(hào)、有效期、使用情況及更換試劑記錄等；索要試劑商相關(guān)證件并有效保存，特別是批批檢報(bào)告書；

試驗(yàn)用試劑

冰箱內(nèi)？使用時(shí)？多余部分如何處置？……

存在的問題:（1）將試劑盒從冰箱中拿出即用后果是：溫育時(shí)間不夠，對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性，尤其是冬天沒有空調(diào)的環(huán)境里。

要求：試劑盒從冰箱中拿出室溫放置20min以上，與室溫平衡，然后再進(jìn)行測定。

目的：在后面的溫育反應(yīng)中，能使反應(yīng)孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足要求。

（2）商品化ELISA試劑盒中,洗板液由所提供的濃縮液稀釋配置而成，故所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。

（3）OPD底物溶液必須在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。2、目前免疫學(xué)檢驗(yàn)所要控制的儀器

（1）移液器利用稱重法校準(zhǔn)：吸取刻度指示量的水，萬分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否正確，一般應(yīng)在±10%以內(nèi)。（2）水浴箱、溫箱、冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)，經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度與水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測溫度是否一致，允許有±1℃的誤差。

（3）洗板機(jī)設(shè)置洗板后的殘留液一般不超過2ul；人工扣板時(shí)，墊紙不濕；定期檢查管孔是否堵塞。

（4）酶標(biāo)儀經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變；定期檢查校準(zhǔn)，使其保持良好的工作性能。

3、臨床標(biāo)本的收集與保存

免疫試驗(yàn)標(biāo)本十分廣泛，

體液：如血清、血漿、各種積液；

分泌物：如唾液、腦脊液；

排泄物：糞便、尿液；均可用于測定其中的抗原或抗體成分，一般使用血清。

可能影響測定結(jié)果的標(biāo)本因素

患者標(biāo)本中有可能會(huì)含有干擾酶免疫測定導(dǎo)致假陽性和假陰性結(jié)果的干擾因素，其分為兩類：

1、內(nèi)源性干擾因素：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異性免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)等。

2、外源性干擾因素：如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、儲(chǔ)存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍保存標(biāo)本反復(fù)凍融等。（1）盡量避免溶血紅細(xì)胞破裂釋放出具有過氧化物酶活性物質(zhì)，增加非特異性顯色而成假陽性。（2）血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性。（3）盡量不用抗凝血，尤其不能用肝素抗凝血。抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾也可產(chǎn)生假陽性。（4）標(biāo)本在冰箱中保存不宜過長易導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法試劑本底加深。（5）盡量避免污染

4、建立臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系

最重要的一點(diǎn)：“實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理文件”的書寫文件包含：質(zhì)量手冊、程序性文件、作業(yè)指導(dǎo)書和相關(guān)表格、報(bào)告等質(zhì)量記錄。程序性文件：包括管理性和技術(shù)性文件兩種。作業(yè)指導(dǎo)書：包括檢測細(xì)則、標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)

以文件形式存在，便于查閱，并確保得到實(shí)施。

（二）分析中質(zhì)量控制

1、如何做好病毒性肝炎酶免檢驗(yàn)質(zhì)控物定值的選擇？2、質(zhì)控品的正確使用；3、ELISA檢測方法的注意事項(xiàng)；4、室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)際操作步驟；

1.如何做好病毒性肝炎酶免檢驗(yàn)質(zhì)控物定值的選擇？

質(zhì)控物：高值、中值、低值及陰性值；

設(shè)置臨界于cut-off(CO值)的低值弱陽性質(zhì)控物是室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)鍵；

低值弱陽性臨界值質(zhì)控物

是室內(nèi)質(zhì)控精密度觀察的最敏感的窗口，是提示試驗(yàn)成功與否的最重要標(biāo)志；

不是判斷陰陽性的標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)有的室內(nèi)質(zhì)控血清

項(xiàng)目

梅毒螺旋體抗體質(zhì)控血清抗HIV國家二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)抗HCV國家二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)抗HAVIgM質(zhì)控血清HBcAbIgM質(zhì)控血清HBcAb質(zhì)控血清HBeAb質(zhì)控血清HBeAg質(zhì)控血清HBsAb質(zhì)控血清HBsAg國家二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

由國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局批準(zhǔn)，可在國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息平臺(tái)上檢索到，網(wǎng)址：http：//2、質(zhì)控品的正確使用

用途：靈敏度控制、精密度控制。

穩(wěn)定性：1、室溫（20-25℃，相對濕度20-25%）可穩(wěn)定兩周；2、高溫高濕度（37℃，相對濕度60-80%）條件下，可穩(wěn)定3天；3、在冰箱內(nèi)冷藏（2-8℃）保存，可穩(wěn)定一年；4、-20℃保存可穩(wěn)定一年以上。