幽門螺桿菌檢查方法課件

幽門螺桿菌檢查方法金哲幽門螺桿菌檢查方法金哲1分類臨床診斷方法分類無創(chuàng)檢查血清學方法、同位素標記尿素的呼氣試驗、胃液PCR創(chuàng)傷性檢查形態(tài)學、微生物學、分子生物學技術(shù)原理微生物學方法、血清學方法、尿素酶依賴技術(shù)、形態(tài)學方法、基因診斷分類臨床診斷方法分類2一、微生物學方法主要為細菌分離培養(yǎng)技術(shù)，診斷Hp感染的“金標準”獲得抗原制備、藥敏試驗、分型和致病性研究等所需的細菌要求具有一定的厭氧培養(yǎng)條件和技術(shù)，作為常規(guī)診斷手段不易推廣一、微生物學方法主要為細菌分離培養(yǎng)技術(shù)，診斷Hp感染的“金標3二、血清學方法1、ELISA檢測：檢測外周血中Hp全菌及其組分（細胞毒素的抗體），主要用于不同人群中Hp感染情況的流行病學調(diào)查和根除治療后較長期（﹥3月）的復(fù)查一般不單獨用作醫(yī)院病人Hp感染和根除（治療后一個月）的診斷依據(jù)操作復(fù)雜但方法日益標準化，商品化試劑大大簡化了技術(shù)難度，但需昂貴的酶標儀二、血清學方法1、ELISA檢測：檢測外周血中Hp全菌及其組4二、血清學方法2、免疫酶試驗用固定于玻片中的Hp菌，與病人血清中的Hp抗體結(jié)合，經(jīng)酶標二抗顯色鏡檢進行診斷操作簡便，不需要特殊儀器，但準確性稍差，判斷需要經(jīng)驗二、血清學方法2、免疫酶試驗5二、血清學方法3、膠乳凝集試驗用結(jié)合在膠乳顆粒上的Hp檢測微量血中的抗體優(yōu)點是不需儀器，血樣需量少但結(jié)果需要經(jīng)驗且準確性不滿意二、血清學方法3、膠乳凝集試驗6二、血清學方法4、Western-blot主要用于分析感染者血中對Hp多種抗原組分的抗體產(chǎn)生情況可以控制抗原制備質(zhì)量和分析與其他類似菌的交叉反應(yīng)但操作復(fù)雜，技術(shù)難度大且不穩(wěn)定，不作常規(guī)診斷方法二、血清學方法4、Western-blot7

由于Hp感染數(shù)周后血中才出現(xiàn)特異抗體，陰性者血中也可存在交叉反應(yīng)抗體（如空場彎曲菌感染），且Hp根除后血中抗體可長時間（﹥6個月）維持在陽性水平，故血清學陽性不能完全肯定病人有活動性感染；陰性不能排除初期的感染。因此，血清學抗體的檢測只能用于流行病學篩查，而不能用于臨床診斷由于Hp感染數(shù)周后血中才出現(xiàn)特異抗體，陰性者血中也可存在交8三、尿素酶依賴技術(shù)1、呼氣試驗用13C或14C同位素標記尿素讓病人口服后被Hp尿素酶分解，產(chǎn)生13CO214CO2，陽性者可在呼出氣中檢測出13C豐度和14C活性，從而確診Hp感染13C試驗:優(yōu)點：準確，特異，快捷，無創(chuàng)傷，無放射性缺點：儀器價格昂貴三、尿素酶依賴技術(shù)1、呼氣試驗9三、尿素酶依賴技術(shù)2、15N-尿氨排出試驗病人口服15N-尿素后，測定尿液中的15N豐度優(yōu)點:非侵襲性，無放射性，有一定定量意義，敏感性與特異性極高，能克服胃活檢標本局限性缺點：設(shè)備昂貴三、尿素酶依賴技術(shù)2、15N-尿氨排出試驗10三、尿素酶依賴技術(shù)3、快速尿素酶試驗原理:根據(jù)試劑pH值變化引起顏色變化來判斷Hp感染狀態(tài)操作簡便易行標本中細菌數(shù)104以上時才能顯示陽性，而標本的大小、反應(yīng)時間、環(huán)境溫度，觀察者主觀因素等均可影響結(jié)果三、尿素酶依賴技術(shù)3、快速尿素酶試驗11四、形態(tài)學方法組織切片染色，組織學染色，免疫組化染色可在顯微鏡下直接觀察細菌，可進行胃粘膜的病理學診斷需要胃鏡檢查和觀察者經(jīng)驗四、形態(tài)學方法組織切片染色，組織學染色，免疫組化染色12五、基因診斷插胃管吸取胃液或胃鏡下取胃液或活檢組織，提取DNA做PCR擴增和探針雜交診斷Hp感染準確性好，檢測靈敏度高操作復(fù)雜，易污染，費用高，不宜作為常規(guī)檢查方法五、基因診斷插胃管吸取胃液或胃鏡下取胃液或活檢組織，提取DN13各種診斷方法優(yōu)缺點方法侵襲性快速價廉技術(shù)難度備注組織學++++++++++同時可以觀察病變分離培養(yǎng)+++++++++獲得細菌和可做藥敏血清學+++++++不能用于臨床檢診細胞學+++++++++不能單獨用于正規(guī)研究尿素酶+++++++++尤其適于治療的復(fù)查13C-UBT+++++14C-UBT---++需要昂貴的質(zhì)譜儀組織PCR+++++