實(shí)驗(yàn)三多倍體教學(xué)課件

化生學(xué)院生物科學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)三植物多倍體的人工誘導(dǎo)化生學(xué)院生物科學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)三植物多倍體的人工誘導(dǎo)1一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解多倍體植物及其在植物遺傳與進(jìn)化中的重要作用。2、了解人工誘導(dǎo)植物多倍體的原理、方法及其在植物育種中的應(yīng)用。3、應(yīng)用植物染色體制片技術(shù)，鑒別誘導(dǎo)后染色體數(shù)目的變化。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解多倍體植物及其在植物遺傳與進(jìn)化中的重要作2二、實(shí)驗(yàn)原理自然界各種生物的染色體數(shù)目一般是相當(dāng)穩(wěn)定的，這是物種的重要遺傳學(xué)特征。n：配子中的染色體數(shù)目，也指一個(gè)配子帶有的全部基因，所以在不同的場合也稱作基因組。x：單倍體染色體數(shù)目，即染色體基數(shù)。

（單倍體：細(xì)胞核內(nèi)含有一套完整染色體組）

同源多倍體生物體內(nèi)染色體異源多倍體數(shù)目變化的途徑

對于二倍體生物來說，x＝n，對于多倍體生物來說，x≠n。染色體組(X)整倍的增減染色體組內(nèi)個(gè)別染色體的增減—非整倍體二、實(shí)驗(yàn)原理自然界各種生物的染色體數(shù)目一般是相當(dāng)穩(wěn)定的，這是3多倍化是形成物種的一種重要方式，二倍體在自然界中較普遍，幾乎全部的動物和過半數(shù)的高等植物均是二倍體，多倍體在植物中廣泛存在，在動物中較少見。多倍體植物在形態(tài)上比二倍體植物個(gè)體大，葉片上的氣孔也很大，容易辨認(rèn)。多倍體的研究在育種中非常重要，可以改良作物的某些經(jīng)濟(jì)性狀，還可利用多倍體克服遠(yuǎn)緣雜交過程中的障礙。

多倍化是形成物種的一種重要方式，二倍體在自然界中較普遍，幾乎4利用一些誘發(fā)因素可以人工誘導(dǎo)植物產(chǎn)生多倍體，包括物理因素，如溫度的劇變，射線處理，嫁接和切斷等，還有化學(xué)因素，如植物堿，植物生長激素，秋水仙素、茶嵌戊烷、異生長素、富民農(nóng)等等。秋水仙素的作用是抑制紡錘絲的形成，使細(xì)胞有絲分裂中期紡錘絲斷裂或紡錘體的形成受到抑制，在有絲分裂后期染色體不能移向兩極，細(xì)胞加大而不分裂，著絲粒分裂后的染色體仍在一個(gè)細(xì)胞中，故細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍。如果用秋水仙素處理根尖，則在根尖分生區(qū)內(nèi)可以檢測到大量染色體加倍的細(xì)胞，如處理植物幼苗的芽，則可以得到染色體加倍的植株。

利用一些誘發(fā)因素可以人工誘導(dǎo)植物產(chǎn)生多倍體，包括物理因素，如5三、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥（2n=2x=16）、大蒜（2n=2x=16）四、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、鑷子、載玻片和蓋玻片三、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥（2n=2x=16）、大蒜（2n=2x=16五、實(shí)驗(yàn)步驟1、大蒜幼根的培養(yǎng)：提前3~5天進(jìn)行培養(yǎng)，將大蒜瓣剝?nèi)ネ膺吥べ|(zhì)枯皮，下端可見許多微微凸起的根原體，將蒜瓣架在燒杯（大小與蒜瓣適宜）口上，杯中盛滿清水，使蒜瓣的下部浸入水中，置溫暖處，注意每天換水，經(jīng)3~5天后，即可長出嫩根。2、秋水仙素處理：根長2-3cm時(shí)，剪下根尖約1cm，用水洗凈。吸干水，浸入0.02％的秋水仙素中，25℃處理24h。3、根尖的觀察及固定：取膨大如鼓棰的根尖，用甲醛：冰醋酸（3：1）固定液固定6h后棄去固定液；4、根尖處理：棄去固定液，用清水漂洗2-3次，加入60℃預(yù)熱的1M鹽酸，于60℃水浴鍋中解離10min，棄去鹽酸，漂洗根尖2-3次，徹底洗凈鹽酸。5、壓片：置載玻片上用解剖針壓散根尖組織，用石炭酸品紅染色5分鐘后蓋上蓋玻片，用橡皮擦在蓋玻片上輕輕壓一下，使細(xì)胞均勻散開成一單細(xì)胞薄層，用吸水紙吸去溢出的染液，即可放在顯微鏡下觀察。五、實(shí)驗(yàn)步驟1、大蒜幼根的培養(yǎng)：提前3~5天進(jìn)行培養(yǎng)，將大蒜7二倍體（2n＝2x＝16）多倍體（2n＝4x＝32）二倍體（2n＝2x＝16）多倍體（2n＝4x＝32）8六、知識點(diǎn)補(bǔ)充固定是借助于物理方法或化學(xué)藥物的作用，迅速滲入組織和細(xì)胞將之殺死，使其形態(tài)結(jié)構(gòu)和內(nèi)含物盡可能保持生活時(shí)的完整和真實(shí)狀態(tài)。①秋水仙素為劇毒，使用時(shí)要特別小心，切勿使藥液進(jìn)入眼內(nèi)或口中。②該藥品價(jià)格昂貴，要節(jié)約使用，可將用過的秋水仙素溶液收集在棕色的瓶中密封，低溫保存，以備再用。③由于秋水仙素是劇毒，使用時(shí)，秋水仙素溶液濃度不能過大，否則會殺死細(xì)胞，0.2%左右的濃度誘導(dǎo)效果最好。秋水仙素作用下，細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍，可以是增加一倍(2n＝4x＝32)，也可以是增加三倍(2n＝8x＝64)。視野中大量細(xì)胞為有絲分裂間期細(xì)胞，其特點(diǎn)為核膜核仁明顯，核質(zhì)呈均勻狀態(tài)。移動載玻片，先低倍后高倍可觀察到有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞，尤其是中期和后期的細(xì)胞，染色體的形態(tài)和數(shù)目清晰可見。六、知識點(diǎn)補(bǔ)充固定是借助于物理