治療藥物監(jiān)測(cè)工作中常見(jiàn)血藥濃度測(cè)定方法的研究進(jìn)展

治療藥物監(jiān)測(cè)工作中常見(jiàn)血藥濃度測(cè)定方法的研究進(jìn)展

在過(guò)去五年中，通過(guò)出版和分發(fā)藥物監(jiān)測(cè)（tdm），人們達(dá)到了一個(gè)新的水平。隨著技術(shù)的發(fā)展和計(jì)算機(jī)的普及，tdm工作中出現(xiàn)了一種新的氛圍，其效果也越來(lái)越受到重視。詳情如下。一、sdm主要特點(diǎn)為在TDM中最常見(jiàn)的血藥濃度測(cè)定方法有三類,即:光譜學(xué)、色譜學(xué)和免疫學(xué),由于光譜學(xué)的靈敏低、專屬性差,單獨(dú)應(yīng)用已經(jīng)越來(lái)越少,常與色譜學(xué)結(jié)合使用。(一)色譜學(xué)中以HPLC在TDM中最為常用,發(fā)展也快,目前還處在方興未艾的時(shí)候,一些新技術(shù)的引入,提高了HPLC的靈敏度與分離度,使TDM的工作不斷深入。1.液-固萃取法在體液樣品處理中的應(yīng)用.液-固萃取法(LSE)是應(yīng)用LC原理處理樣品,將萃取劑填入小柱,以溶劑淋洗老化,將樣品通過(guò),藥物保留在小柱上,用適當(dāng)溶劑洗去雜質(zhì),再用適當(dāng)溶劑將藥物洗脫下來(lái)。本法操作簡(jiǎn)單,樣品處理迅速,容易自動(dòng)化。2.連接柱的應(yīng)用。將液一固萃取柱作為預(yù)柱與HPLC連接,增加一個(gè)泵,先將樣品泵經(jīng)預(yù)柱或富集柱,使起到純化與富集作用,再泵經(jīng)分析柱,能提高分析的靈敏度。此法可舉一反三,裝配成雙泵雙柱,或三泵雙柱、或雙泵三柱等各種形式。甚至有的工廠根據(jù)此原理,設(shè)計(jì)制成專用的萃取儀,操作更方便,效率更高,如吉爾森的自動(dòng)試樣萃取儀。3.HPLC多種藥物分析系統(tǒng).本系統(tǒng)充分發(fā)揮了色譜儀的分離性能,使一臺(tái)HPLC同時(shí)能測(cè)定多種藥物,還可以通過(guò)更換流動(dòng)相和紫外檢出器的波長(zhǎng),使測(cè)定的藥物可達(dá)數(shù)十種以上。Bio-Rad公司銷售同一類藥物的專用柱和流動(dòng)相,如苯二氮(二)免疫學(xué)方法是TDM中常規(guī)測(cè)定最常用的方法。由于其靈敏度高,樣品用量少,對(duì)TDM工作者有很大的吸引力,近年來(lái)這方面發(fā)展也較快。七十年代初,放免法的應(yīng)用曾促進(jìn)了TDM的開(kāi)展,七十年代后期,酶免法代替了放免法,克服了放免法的同位素污染,而作為常規(guī)測(cè)定方法之一.八十年代初期螢光免疫法又提高了免疫學(xué)方法的穩(wěn)定性,八十年代中期,螢光偏振免疫法的出現(xiàn),進(jìn)一步提高了熒光免疫法的靈敏度,尤其自動(dòng)化程度高、性能穩(wěn)定的TDx血藥濃度測(cè)定儀的推廠,使TDM工作真正能成為常規(guī)化的可能,也使TDM工作者從繁重費(fèi)時(shí)的分析中解放出來(lái),促使TDM深入發(fā)展。免疫方法還在發(fā)展,如熒光偏振免疫法單一試劑的應(yīng)用二、疾病控制的療效藥效主要由游離藥物產(chǎn)生,游離藥物濃度與血漿蛋白結(jié)合率有關(guān),其個(gè)體差異比藥動(dòng)學(xué)的個(gè)體差異小得多,但(一)與血漿蛋白具有高度親和力的藥物,其蛋白結(jié)合呈明顯的濃度依賴,如雙異丙吡胺是血漿蛋白結(jié)合引起非線性動(dòng)力學(xué)的典型.(二)疾病可改變藥物與血漿蛋白的結(jié)合率.如肝硬化病人奎尼停的游離藥物分?jǐn)?shù)幾乎增加三倍;腎病時(shí),苯妥英、水楊酸、安妥明等的血漿蛋白結(jié)合率明顯下降.(三)有些藥物血漿蛋白結(jié)合率存在著明顯的個(gè)體差異,如奎尼停的血漿蛋白結(jié)合率的范圍為50～90%,不同個(gè)體間游離藥物濃度差達(dá)10倍.(四)游離藥物濃度簡(jiǎn)易測(cè)定方法的建立,是促進(jìn)游離藥物測(cè)定的重要條件。在治療藥物監(jiān)測(cè)的領(lǐng)域里常用的有二種:一是平衡透析法,常應(yīng)用改進(jìn)了的裝置,將一張透析膜夾在二塊有對(duì)應(yīng)孔穴的不銹鋼塊中,夾緊,在透析膜二側(cè)分別加樣品與滲透液,在一定溫度下放置一定時(shí)間,測(cè)定藥物濃度;另一種是超濾法,將樣品通過(guò)超濾膜,可以應(yīng)用減壓法、加壓法或者離心法(也是一種加壓法)三、活性代謝的監(jiān)測(cè)除前體藥物外,一般情況下,由于活性代謝物濃度低,并不顯得重要,然而,當(dāng)活性代謝物濃度不低時(shí)、活性較強(qiáng)時(shí)、腎功能有障礙時(shí),對(duì)活性代謝物的存在應(yīng)給予足夠的重視(一)活性代謝的檢測(cè)1.有利于深入指導(dǎo)臨床合理用藥.2.有助于解釋血藥濃度與藥效間的矛盾,如濃度與效應(yīng)間的不平行現(xiàn)象.3.也有助于解釋和預(yù)防治療期間出現(xiàn)的某些不良反應(yīng),即某些藥物代謝物的治療活性不一定很高,然而,腎功能障礙時(shí).代謝物的濃度積蓄到一定程度時(shí),出現(xiàn)不良反應(yīng).由于色譜方法的發(fā)展,分離度與靈敏度都有很大的提高,代謝物的測(cè)定方法正在逐步解決.當(dāng)前問(wèn)題比較突出的是活性代謝物標(biāo)準(zhǔn)品的來(lái)源不易,尤其在國(guó)內(nèi)解決更困難.乙胺碘酜酮及N-去乙基碘酜酮;利多卡因及GX、MEGX;奎尼停及3-羥基尼奎停;撲(四)代謝是否有積累1.代謝物藥理活性與原型藥物的關(guān)系,它們的作用是相加、協(xié)同或拮抗,作用強(qiáng)度比是多少?2.代謝物與原型藥物的處置動(dòng)力學(xué)有無(wú)異同?3.肝、腎功能有障礙時(shí),代謝物是否有積累,積累程度為多少?四、屏幕監(jiān)控(一)不同的康復(fù)劑具有不同的效果（見(jiàn)表1）(二)不同給藥途徑對(duì)映射體的影響1.藥物對(duì)映體的總體清除率的不同見(jiàn)表2.2.給消旋體后,血漿中對(duì)映體的比值有較大的個(gè)體差異,如單劑量口服40mg心得安消旋體后,對(duì)映體比值在15例病人上的3.在不同給藥途徑時(shí),對(duì)映體的比值也是不同的。如給戊脈安后,首過(guò)效應(yīng)優(yōu)先選擇性轉(zhuǎn)化R(一)對(duì)映體。因此,戊脈安(一)/(+)比值,iv時(shí)為0.56±0.10,po時(shí)為0.23±0.05,欲得到相同的PR間期延長(zhǎng)值時(shí),po給藥比iv給藥需要更高的血藥總濃度。(三)物體的測(cè)量1.化合物衍生物化標(biāo)準(zhǔn)(1)應(yīng)用化學(xué)結(jié)合手性固定相、流動(dòng)相中加入手性復(fù)合物、用手性化合物衍生物化等方法,分離消旋體中的對(duì)映體。(2)手性固定相柱已廣泛用于分離酸性和堿性藥物,如阿托品、達(dá)舒平、布洛芬、酮基布洛芬、美多心胺、鎮(zhèn)痛新、心得安、托卡因、戊脈羥、間羥舒喘寧等.(3)衍生物化后再用色譜法分離,如心得安可應(yīng)用(一)N-trifuoroacetyl-1-prolylchloride(TPC)試劑衍生物化.對(duì)映體選擇放免測(cè)定法的試劑包括化學(xué)立體選擇性的抗血清,和高度光學(xué)純的放射性配體的結(jié)合.現(xiàn)已有氚標(biāo)的戊巴比妥、華法令及已巴比妥的藥合。五、體化給藥與生物資本七十年代Sheiner和Beal等基于非線性混合效應(yīng)模型的理論,編制了NONMEM程序,到八十年代逐漸發(fā)展為一步法估算群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù),并開(kāi)始應(yīng)用于治療藥物監(jiān)測(cè)的回顧性分析,以及新藥上市前群體藥動(dòng)學(xué)特征的分析。群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)在個(gè)體化給藥中,有著極其重要的地位.給藥個(gè)體化可以概括為三個(gè)階段:經(jīng)驗(yàn)法、個(gè)體化藥動(dòng)學(xué)參數(shù)法、和群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)結(jié)合個(gè)體血藥濃度反饋法(即NONMEM程序結(jié)合Bayesian反饋法),第三階段國(guó)外已經(jīng)開(kāi)始,并正在發(fā)展中,國(guó)內(nèi)處在萌芽狀態(tài).NONMEM程序不僅可以應(yīng)用在來(lái)源于均勻群體數(shù)據(jù)的擬合與參數(shù)的估算,其更突出的優(yōu)點(diǎn)是應(yīng)用在來(lái)源于非均勻群體數(shù)據(jù)的擬合與參數(shù)的估算。所謂非均勻群體數(shù)據(jù)是指每一個(gè)病人所取的樣本,在時(shí)間和次數(shù)上都是不相同的,可以把多個(gè)病人,每個(gè)病人的少數(shù)數(shù)據(jù)積累起來(lái)使用,因此,它可以與日常的TDM工作結(jié)合起來(lái),易為病人所接受,結(jié)果也更具有代表性。一步法估算群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù),結(jié)合Bayesian反饋方法估算個(gè)體化藥動(dòng)學(xué)參數(shù),設(shè)計(jì)個(gè)體化給藥方案,將使合理用藥提高到一個(gè)新水平.六、血藥濃度與藥物濃度的關(guān)系治療藥物效果的評(píng)值,最直接的方法是監(jiān)測(cè)藥理效應(yīng)或臨床效果,但在很多情況下,定量評(píng)價(jià)效果或效應(yīng)是很困難的,因此,常常通過(guò)測(cè)定血