人血小板生成素TPO酶聯(lián)免疫分析報告

人血小板生成素 酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中血小板生成素 的含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血小板生成素 水平。用純化的人血小板生成素 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血小板生成素P再與標(biāo)記的血小板生成素抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物顯色。在酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板生成素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在波長下測定吸光度（值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血小板生成素濃度。試劑盒組成：試劑盒組成孔配置孔配置保存說明書份份封板膜片（8片（6密封袋個個酶標(biāo)包被板XX°C保存標(biāo)準(zhǔn)品：x瓶x瓶°C保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液X瓶X瓶C保存酶標(biāo)試劑X瓶m瓶C保存樣品稀釋液m瓶m瓶C保存顯色劑液m瓶m瓶C保存顯色劑液m瓶m瓶C保存終止液m瓶m瓶C保存濃縮洗滌液（ m倍）x瓶（ m倍）x瓶C保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-分2鐘0，離心20分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3/0分0）。0仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 分鐘后，離心20分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3/0分0）。0仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3/0分0）。0仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用（ ）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 萬 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3/0分0）。0仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的， 。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持 ?的溫度。加入一定量的 （ ）,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-轉(zhuǎn)3/0分0）。0仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于°C保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融不能檢測含 的樣品，因 抑制辣根過氧化物酶的（）活性。操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品 IJL1然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液u1混勻；然后從第一孔、第二孔中各取 00分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取0棄掉，再各取0分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 ，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取0分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0,混勻后從第七、第八孔中分別取0加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50，混勻后從第九第十孔中各取50棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50，濃度分別為180p，g1/°m0p，g6/0mpg，/3m0pg，/1m5pg）。/°.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40，然后再加待測樣品10（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置C溫育分鐘。配液：將（的倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水 （的倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑501，空白孔除外。。.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑 501再加入顯色劑 501輕輕震蕩混勻，。避光顯色分鐘終止：每孔加終止液01終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零， 波長依序測量各孔的吸光度（值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-分3鐘0后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。°．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（倍）后再測定，計

算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（XX）。.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。.底物請避光保存。.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。.本試劑不同批號組分不得混用。0.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。試劑盒性能：樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)值為 以上。批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于和檢測范圍：保存條件及有效期：試劑盒保存：；°C。2有效期：個月，O°C:XX°CXXCXXCXXCXXCXXCXXC( o )X( o )XCPH7.2)-,7R.a4pifdrloyzweintl°C (d°C1-0(1-1|(111l50f0omthefifthandthesixtghwtehltlh(eandSdtandai0ldut5i10olntothseeveanhthwell(mi1xl;f0to