第八章蛋白質(zhì)工程

第八章蛋白質(zhì)工程

湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院

袁婺洲本章目錄蛋白質(zhì)工程的理論基礎(chǔ)蛋白質(zhì)工程的理論基礎(chǔ)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定與結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)定點(diǎn)突變定向進(jìn)化其他技術(shù)蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用及實(shí)例定點(diǎn)突變與蛋白質(zhì)藥物工程：胰島素定點(diǎn)突變、定向進(jìn)化與工業(yè)用酶：枯草桿菌蛋白酶等結(jié)構(gòu)域的拼接與金屬硫蛋白工程抗體工程

第一節(jié)蛋白質(zhì)工程的理論基礎(chǔ)蛋白質(zhì)工程的概念蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)一爺?shù)跋舶兹匈|(zhì)羞工掛程例的患概朽念基送于傘對(duì)煤蛋饅白皇質(zhì)闖結(jié)博構(gòu)俱和候功費(fèi)能頂?shù)姆琳J(rèn)蛋識(shí)繼，扒進(jìn)摸行章分追子鳥設(shè)恒計(jì)顛，齊通胃過列基陜因貧工謙程憑途左徑做定耳向按地廢改百造旅蛋哨白吉質(zhì)鏟或精創(chuàng)軍造漏合胞乎瞇人神類仆需粥要腹的僚新牙的讓突闊變愚蛋青白雖質(zhì)遣的輪理萍論維或胞實(shí)幼踐構(gòu)活劑動(dòng)退。（1）臉確午定慨蛋居白因質(zhì)職化狀學(xué)陽組春成香、迫空殖間縮慧結(jié)降構(gòu)播與騰生喬物么功警能蹈之珠間虎的闊關(guān)障系巡壽；（2）朋通墓過圈定治點(diǎn)鐮突呢變渡、喚定妖向掙進(jìn)也化貓等肚技葬術(shù)招，付合求成眠具打有送特胞定狐氨溫基搖酸準(zhǔn)序情列鴨和蘭空攻間旋結(jié)怠構(gòu)惕的惡蛋廁白添質(zhì)開。二燈蛋倆白糠質(zhì)稀的擠結(jié)技構(gòu)一壩級(jí)即結(jié)斯構(gòu)：恥多骨肽旅鏈云的物氨滔基富酸詠殘棉基終的表排迷列序順祝序二熄級(jí)拴結(jié)教構(gòu)：滿多搜肽倆鏈并借公助隔于學(xué)氫犁鍵焰或凍離洗子謊鍵什沿趁一痛維踐方濟(jì)向居排鎮(zhèn)列良成胸具糠有溪周碼期漢性少結(jié)暖構(gòu)仁的比圖挺象伍。三笑級(jí)暫結(jié)油構(gòu)彩：指肥整岔個(gè)番蛋泰白在質(zhì)孤多盤肽鳳鏈比在世二除級(jí)酷結(jié)它構(gòu)呢的恭基匙礎(chǔ)炎上半，蘇側(cè)捉鏈塊基比團(tuán)筒通鋒過蓋次鎮(zhèn)級(jí)教鍵起或犬疏緣瑞水怖鍵拔的抓相請(qǐng)互爹作眼用院進(jìn)考一傭步夢(mèng)盤尼曲寶折格疊船，擺形銷成困具探有童一獅定畢規(guī)劑則拌的制空迅間昂結(jié)胡構(gòu)弓。四摸級(jí)薯結(jié)砍構(gòu)：藝由杯兩羨條嫌以反上棉的伐多攤肽磚鏈買組撞成叨的呼蛋愈白蟻質(zhì)泄，狼多扯肽扁鏈錘之演間參沒欣有吼共濕價(jià)適鍵杯連漁接碰而喘是擾借底疏毅水鑒作喪用領(lǐng)等勸次晝級(jí)聾鍵拿締肯合鈴在次一仍起譽(yù)形簡(jiǎn)成穴的餡高達(dá)級(jí)桂空老間物結(jié)箭構(gòu)洋。氨芝基行酸絮的喝聚晨合籃形帆成考肽教鏈肽贏鏈周的組空巾間盲結(jié)帆構(gòu)噸單些元:二槍硫吳鍵撐的廟折限疊肽每鏈貪的房誠空歪間踐結(jié)守構(gòu)貧單續(xù)元:氫壇鍵清的泉折善疊肽姓鏈櫻的咽空搏間煉結(jié)侄構(gòu)悼單燃元:離樂子私鍵弊的內(nèi)折夜疊肽床鏈禾的叫空鼓間眠結(jié)政構(gòu)茂單誦元每舌四孔個(gè)迎氨仰基叢酸妖殘康基瞧間仙的氫辟鍵屋構(gòu)妨成蝴多級(jí)肽崗鏈a螺怨旋肽頃鏈洞的庸空援間兇結(jié)騰構(gòu)竟單耀元由嫩不射同效多賞肽招鏈納上黃氨摟基兵酸屑?xì)埥榛鶡g污的淚氫諸鍵飛構(gòu)箏成啦多欺肽喉鏈b折撲疊肽仙鏈涉的察完妖整夜空酷間稱構(gòu)筐象蛋直白西質(zhì)莫結(jié)透構(gòu)斯與壟功礎(chǔ)能美的宴關(guān)的系蛋輪白奮質(zhì)榨一棗級(jí)憑結(jié)竭構(gòu)原是斑空積間末結(jié)殖構(gòu)內(nèi)的婦基咸礎(chǔ)挎，撥而類空寸間尊結(jié)桿構(gòu)壇決慮定什了充蛋綁白顯質(zhì)速的疊功牙能茄。結(jié)建構(gòu)瞇域啦：蛋魚白鵝質(zhì)遼多洪肽伐鏈哈上孫一運(yùn)段保在椒三擋維駁結(jié)莫構(gòu)繡上梳可遮以卷明朋顯乎區(qū)雷分某和算相塊對(duì)燭獨(dú)抱立鈴并軋具凍有企一種定柔生津物奮學(xué)籌功帖能復(fù)的頌基針本添單酬位卸。模殺體今（盡基柱序捕）鑰：組姑成害結(jié)押構(gòu)逗域殖的冶基節(jié)本掘二肢級(jí)套結(jié)胡構(gòu)嚷單祥位蛋隱白竊質(zhì)后的出加益工惡修押飾:磷稱酸蒼化醋修桐飾蛋抽白粗質(zhì)灣的膨加綿工棗修垃飾:羧廊基汗化磨修讓飾幾返種獅參輪與摘凝忍血鞠的掘蛋摘白恐因虧子災(zāi)（刃如V面I懷I短I和I代V因蒸子戴）熱需無要鮮在藏其谷客酰煤胺隨側(cè)代鏈紡上栗的g播-羧峽基岸化圍修遠(yuǎn)飾后負(fù)，陡才底能由擁旗有濃蛋紡白匪酶潤(rùn)的畏活善性記，反這授一濟(jì)修賊飾躺過域程扭依價(jià)賴未與維廈生談素K的寒存戒在。蛋宇白升質(zhì)奪的蛙加陰工厲修松飾:甲洞基暗化強(qiáng)修次飾肌仇肉凡中拉的星一牢些炭蛋漁白憲質(zhì)雨以無及庭細(xì)庭胞妥色吃素C中櫻的L家y滅s會(huì)努受援到據(jù)單主甲揀基悼和制二姿甲乏基?；缧捱t飾添；壺鈣晃調(diào)穴蛋村白股會(huì)庸受召到壤三彈甲歸基戰(zhàn)化新修修飾背；兇所罷有C末尋端饞以G膛l怎u結(jié)廣尾裹的礦蛋游白旦質(zhì)大，鎖其G露l以u(píng)會(huì)受等到喬甲疏基竄化明修情飾跟。蛋繭白猾質(zhì)復(fù)的屢加尤工翼修陪飾:N費(fèi)-糖廟基瓶化O掩-糖條基堡化糖堅(jiān)基石化診修營飾蛋疏白秤質(zhì)肯的真加僅工坐修貸飾:其芝它姻類傳型繪的腫修如飾三恨蛋桌白書質(zhì)謊的振結(jié)暖構(gòu)收預(yù)射測(cè)一越級(jí)指結(jié)線構(gòu)秋：柿測(cè)偉序詠儀舉與羅數(shù)愚據(jù)灑庫高楊級(jí)表結(jié)茅構(gòu)交預(yù)弦測(cè)碼：X射丟線嚷晶起體賤衍辰射罵法核姻磁攀共按振鎮(zhèn)法擴(kuò)（N這M透R）蛋慚白紹質(zhì)溉一敞級(jí)榆序息列禾數(shù)蕩據(jù)絮庫P引I壯R：由霞國蟲家彎生行物裝醫(yī)堪學(xué)傷研柿究大基惹金順會(huì)慘（N徐B膝R現(xiàn)F）辜建曬立M花I嬌P弱S：M羊a商r譽(yù)t酒i筍n如s沿r宰i爛e崖d的下蛋美白抱質(zhì)槍序釣列堅(jiān)研泛究悲所漢收品集得和炸處堂理形的歷蛋吸白及質(zhì)跑序筐列俱數(shù)酸據(jù)S辱W解I顆S判S池-桑P扣R網(wǎng)O沈T：蛋余白絡(luò)質(zhì)愿序闖列鬼數(shù)膛據(jù)休庫促，股由G仍e拋n嗚e劫v躁a大假學(xué)禾和E萍M含B影L共躺同帳合粒作傷開踢發(fā)T支r站E罷M舊B志L：翻是譯妻的E豈M誰B歌LN偵R斥L債-玻3你D：除書序袖列往信艇息迷外針，勇也欺包艘括和對(duì)浩二舌級(jí)死結(jié)婆構(gòu)甘，思活匆性依位泥點(diǎn)黃，育結(jié)賭合咐位覆點(diǎn)沈和街修何飾醉位獨(dú)點(diǎn)伶等網(wǎng)信個(gè)息烏。第張二殃節(jié)券蛋猶白陜質(zhì)塞工合程莫關(guān)潔鍵床技憲術(shù)定嘴點(diǎn)趁突浴變定絨向賢進(jìn)塵化其雷他膠技耐術(shù)一嶄定那點(diǎn)稍突照變寡婚核伸苷閥酸每引期物絡(luò)介可導(dǎo)嗽的茅定垃點(diǎn)煌突木變P壓C買R介骨導(dǎo)腔的肢定賞點(diǎn)徑突零變盒吉式紋突總變遺驕傳顧信統(tǒng)息布傳摔遞憂的版中倍心皆法勿則D朋N燙A匆（基捏因島）D楊N拼A緣瑞（基藍(lán)因壯）m叨R蘋N當(dāng)A蛋慢白鋪質(zhì)生鑼物牌代郊謝殊物趟質(zhì)復(fù)浴制轉(zhuǎn)施錄翻添譯代嗎謝基除因彈組體學(xué)轉(zhuǎn)炊錄握組診學(xué)蛋列白智組架學(xué)代臣謝額組毀學(xué)逆鏡轉(zhuǎn)壟錄中鍋心閘法發(fā)則1珠.寡治核藝苷井酸褲引殃物暗介者導(dǎo)渣的壞定項(xiàng)點(diǎn)像突加變用僻含遮有突促變渠堿綢基餡的雅寡榴核削苷晃酸蹲片祝段縱作抱引酬物，磨在等聚辣合盒酶悼的鋼作跑用巖下綿啟炮動(dòng)D沾N底A分苗子狹進(jìn)膊行瘋復(fù)臟制檔的待過救程寡工核懲苷星酸們引歐物斥介竄導(dǎo)乞的資定預(yù)點(diǎn)證突混變愁的K辟u濾n佩k若e職l改已進(jìn)茶：載刃體講：R核F－M膠1趣3茶D豬N選A載雅體菌霞株膠：d里U壩T烏P酶婦和N－攀尿蹈嘧梨啶執(zhí)脫念核源苷艘酶塞雙蜂缺桑陷蜘的估菌恥株曉。原庸理心：d歲U施T勞P酶散缺打陷溝導(dǎo)捷致罪胞沸內(nèi)d逼U行T植P上黨升匙，開部拋分腳取棉代d惕T雅T蛛P進(jìn)附入臉新煤生D澇N呀A鏈稍中桶，跟使日得M隔1刮3單秋鏈D斃N圖A大研約1％棄的T被U取疊代忘。其另隊(duì)一榴鏈玻合侍成翻后夸，傷將迷雙指鏈D提N勝A導(dǎo)蒙入超正歸常莖大覺腸洞桿裕菌區(qū)，N－涉尿炭嘧濱啶撞糖領(lǐng)基蜂化萍酶辰除抽去D悼N蹦A鏈伶上沖的嗓尿呢嘧場(chǎng)啶軍堿普基甲，肉原M擺1跌3模飼板芒鏈撞被平降么解依，演突板變帝鏈棟因舞不圣含U被范保刺留拋下遺來瞎。2稿.P策C潮R介凳導(dǎo)鉛的厲定撤點(diǎn)塘突扭變3石.盒糖式待突出變利率用到一摧段人怪工掩合蕉成跪的徐含睡基占因累突磨變岡序蘆列設(shè)的駝寡皆核叫苷茄酸緣瑞片餅段，茄取色代喇野狠生休型罵基道因泊中源的繞相恥應(yīng)控序性列圍。桌突兩變仗的往寡灑核市苷日酸荷鏈建成際對(duì)主存韻在兔，征不潤(rùn)會(huì)油出上現(xiàn)貌異再源邁雙羅鏈部的煙情虜況奔。秧全寨部衰轉(zhuǎn)桿化霸質(zhì)喬粒擋都鋸是踐突科變迅體滋。二成、悲定己向炒進(jìn)杯化先退隨條機(jī)扒突駛變遇，櫻再底定劇向?qū)⑦x秘?fù)衲?。如云在慕待轎進(jìn)稅化妹酶毫基律因書的P魯C蒼R擴(kuò)狠增徐反租應(yīng)扛中偵，逮利愿用T批a肅q酶呼不胖具爽有3－5端閱糾規(guī)錯(cuò)美的沾功厭能冰，去配繩合括適仍當(dāng)壇條繩件刑，繭以障很擴(kuò)低界的秀比臟率溪向皺目貫的肥基阿因儉引炭入炊突枝變育，布構(gòu)技建請(qǐng)突落變眠序辣列烤庫牙，沙再更憑尋借靈定傲向扁的塔選栗擇縮慧方肥法歐，革定脊向智選反出河所饞需覆性拒質(zhì)管的殼突辟變益酶擱。1珍.易辱錯(cuò)P牢C貓R在P米C稅R反貧應(yīng)面中音，躁降即低一宜種d割N結(jié)T礦P的泰含點(diǎn)量，庫使P違C酷R容潤(rùn)易懼出蓄錯(cuò)顧，棗達(dá)跡到灑隨教機(jī)市突隱變反的父目被的延。2惑.頭D籌N倚A改宮組用D隆N婚A薯a爸s云e并I先遭將仆一棉個(gè)D釋N軋A片體段攝消宴化眼成靠許四多飯小卻片蠻段荒，悠然煮后不壓加曠引飾物禽進(jìn)棕行P雖C念R，若使忽得屋消嘴化辨后D推N摟A小同段纖之度間鎮(zhèn)重急新夠按極多逆種鴉組活合竿方底式針連乎接育重言組挖，直然跌后佳利超用前原年來幫整家片譽(yù)段D只N尾A兩窯端熊的近引臭物蹈進(jìn)窯行加襪引插物獲的P武C宇R擴(kuò)頂增，港以械便半得鮮到列一爪系柱列圖改曲組鬧后墊的選突司變D稿N那A序猜列斯。3末.體朱外迎隨半機(jī)則引欄發(fā)幟重客組以單葉鏈D普N岸A為慚模杠板，隨語機(jī)堅(jiān)引萌物椒擴(kuò)抵增樣，將嚷產(chǎn)料生觸大止量質(zhì)與濁模發(fā)板憑不紐奉同便位悶點(diǎn)控互銳補(bǔ)靜的擺短預(yù)的D沈N兆A片晶段身，厭由朵于促堿?；鶈〉能涘e(cuò)土配長(zhǎng)和惕錯(cuò)影誤構(gòu)引慣發(fā)也，室這溫些叫短D污N灶A(yù)片挽段鍛中隆會(huì)翅存扯在條一撤些消點(diǎn)謀突渠變棕。第禍三騙節(jié)奶蛋喘白蕩質(zhì)色工示程厚的五應(yīng)公用雨實(shí)絲式例胰埋島熔素枯杯草貫桿忙菌侵蛋擊白滿酶金沙屬朵硫曾蛋勤白抗遼體1集.胰脂島體素約的竄結(jié)垃構(gòu)撫及民其嫁生貍物稍合兄成SSSSCNSSB肽春（鴉3村0探）C肽變（奏3犧1元）A肽環(huán)（性2渡1報(bào)）RRRKSSSSCNSSNC高狗爾臉基湯體呈內(nèi)魔的酷特與異覽性鬼肽卸酶NCB肽C肽A肽信公號(hào)超肽獸酶信秤號(hào)踏肽胰福島兵素階的障改榮建終工益程速寺效映胰震島星素咐：S輔e輔r任B嫩9嘆A對(duì)s儲(chǔ)p寄/染T淘h椅r桐B止2彩7挑G灶l捕u，拜有尿利您于詳降臉低撿胰漁島榨素栗的互締堂合燙作威用杠，洋進(jìn)嶺入惜血遭液拆的釣吸檔收嚷率兼比陰天掉然表胰兄島宇素呀提稿高子了3倍樓。長(zhǎng)缸效奮胰秧島擇素傍：A揪s系n璃A滔2芝1印G汁l幅y販/倆T脖h景r羞B稿2記7按A無r因g充/聽T可h蛾r杏B塌3域0獅T溫h傘r酰豪胺咳，躲半煙衰雜