微生物和基因工程課件

第十章微生物與基因工程基因工程技術(shù)基因工程(geneticengineering):把分離到的或合成的基因經(jīng)過改造,插入載體中,導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi),使其擴(kuò)增和表達(dá),從而得到大量基因產(chǎn)物,或令生物表現(xiàn)出新的形狀。基因工程大事記1973Cohen和Boyer第一次將重組體DN轉(zhuǎn)化大腸桿菌,實(shí)現(xiàn)了DNA的分子克隆1978Genentech公司——人胰島素—世界上第一種基因工程蛋白藥物1982第一個(gè)基因工程藥物—重組人胰島素在英、美獲準(zhǔn)使用1985第一批轉(zhuǎn)基因家畜(兔、豬和羊),中國轉(zhuǎn)基因魚1993基因工程西紅柿在美國上市2019英國羅斯林研究所克隆羊多莉20199中國獲準(zhǔn)加入人類基因組計(jì)劃,負(fù)責(zé)測定人類基因組全部序列的1%20006.26科學(xué)家公布人類基因組工作草圖2019211公布人類基因組基本信息第一節(jié)基因工程概述三項(xiàng)重要技術(shù)為基因工程奠定了基礎(chǔ):1967-1970年RYuan和HO.Smth等發(fā)現(xiàn)的限制性核酸內(nèi)切酶為基因工程提供了有力的工具1972年Berg等將sV-40病毒DNA與噬菌體P22NA在體外重組成功;1973年Cohen和Boyer第一次將重組體DNA轉(zhuǎn)化大腸桿菌,實(shí)現(xiàn)了DNA的分子克隆;197年Boyer等首先將人工合成的生長激素釋放抑制因子14肽的基因重組入質(zhì)粒,成功地在大腸桿菌中合成得到這14肽1975-1977年Sanger、Maxan和Gilbert先后發(fā)明了三種DNA序列的快速測定法;90年代全自動(dòng)核酸序列測定儀的問世;基因工程基本過程1、目的基因的提取:分離或合成外源基因。2、體外重組:外源基因與載體體外連接,構(gòu)建重組DNA分子;3、轉(zhuǎn)化:重組DNA分子導(dǎo)入細(xì)胞。擴(kuò)增該克隆DNA篩選與鑒定6、基因表達(dá):控制適當(dāng)條件,外源DNA表達(dá)。7.獲得表達(dá)產(chǎn)物或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物。g-○目的基因轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因植物圖1-1重規(guī)DN操作通常包括的步霏微生物與基因工程關(guān)系切基因工程操作都離不開微生物1、基因工程所用克隆載體主要是用病毒、噬菌體和質(zhì)粒改造而成的2、基因工程所用千余種工具酶是從微生物中得到的微生物細(xì)胞是基因克隆的宿主、大規(guī)模表達(dá)基因產(chǎn)物,構(gòu)建工程菌,利用工廠發(fā)酵來實(shí)現(xiàn)。5、提供基因資源(抗高溫、高鹽、高堿、低溫等特性)6、模式生物提供基礎(chǔ)理論。第二節(jié)基因的分離合成和誘變>利用重組DNA技術(shù),可將某一原核生物或真核生物染色體基因組的全部遺傳信息,貯存在由重組體群體(如重組噬菌體群體)構(gòu)成的基因文庫(genomiclibrary)或cDNA文庫(cDNAbrary)1.基因文庫的構(gòu)建>所謂基因文庫是指生物染色體基因組各DNA片段的克隆總體。文庫中的每一