藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)培訓(xùn)課件

藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)一、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使學(xué)生初步掌握藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)驗(yàn)證和鞏固藥理學(xué)的基本理論。通過(guò)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)學(xué)生具有科學(xué)的思維方法和科學(xué)的工作態(tài)度。2藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)

藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)一般以活體為對(duì)象，包括其正常功能、整體的動(dòng)物和離體的器官或組織均在具有活性的前提下用于實(shí)驗(yàn)。小心、規(guī)范地操作注意保護(hù)動(dòng)物或標(biāo)本于最佳活性狀態(tài)。3藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)三、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的要求實(shí)驗(yàn)前仔細(xì)閱讀本課程和有關(guān)課程的講義，了解實(shí)驗(yàn)的目的、要求、步驟和操作程序。結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容復(fù)習(xí)有關(guān)理論。4藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)（二）實(shí)驗(yàn)時(shí)保持實(shí)驗(yàn)室的整齊、清潔，保持實(shí)驗(yàn)室安靜，不要高聲談笑，不得進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的活動(dòng)。愛(ài)護(hù)公共財(cái)物,各組儀器和器材由各組使用按照實(shí)驗(yàn)步驟，認(rèn)真操作，注意保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和標(biāo)本，節(jié)省實(shí)驗(yàn)器材和藥品。仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的現(xiàn)象，真實(shí)客觀地記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并加上必要的文字注釋，有時(shí)還需要繪制圖形或曲線進(jìn)行分析。5藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)

（三）實(shí)驗(yàn)后

將實(shí)驗(yàn)用具整理就緒，所用器械沖洗干凈后，交還借用的器械。如果器械有損壞或短少，應(yīng)立即報(bào)告負(fù)責(zé)教師。動(dòng)物尸體、標(biāo)本、紙片和廢品應(yīng)放到指定地點(diǎn)。搞好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)關(guān)燈，關(guān)窗，關(guān)水龍頭。認(rèn)真整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果并撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。6藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)每次實(shí)驗(yàn)，均要求寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)注意文字簡(jiǎn)練，通順，書(shū)寫(xiě)清楚，整潔，正確使用標(biāo)點(diǎn)符號(hào)。7藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)常用手術(shù)器械常用試驗(yàn)儀器8藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指人工飼養(yǎng)，對(duì)其攜帶的微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確或者來(lái)源清楚的動(dòng)物。這些個(gè)體具有較好的遺傳均一性、對(duì)外來(lái)刺激的敏感性和較好的重復(fù)性。9藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)1．青蛙與蟾蜍2．小白鼠3．大白鼠4．豚鼠：性情溫順，膽小怕驚嚇，對(duì)組胺敏感。常用于免疫學(xué)研究和過(guò)敏性疾病模型5．家兔：耳大，血管清晰，便于靜脈注射和取血。眼大易觀察，常用于眼科研究。因其體溫變化較敏感，也常用于體溫實(shí)驗(yàn)及熱原檢查。10藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)6．貓：貓的血壓比較穩(wěn)定，較大鼠、家兔等小動(dòng)物更接近于人體，且與人相似，故可用于循環(huán)藥理研究。7．狗：是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的大動(dòng)物。血液、循環(huán)、消化和神經(jīng)系統(tǒng)均很發(fā)達(dá)、與人類較接近。適用于藥理學(xué)、毒理學(xué)和藥物代謝、營(yíng)養(yǎng)學(xué)和藥理學(xué)研究。8、小型豬：毛發(fā)、皮膚厚薄，形態(tài)學(xué)和增殖動(dòng)力學(xué)與人非常相似。理想的燒傷模型9、猴：最相似的生物學(xué)和行為學(xué)特征11藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)、捉拿與固定1．染料標(biāo)記法常用染料：紅色染料：5％中性紅或品紅液；黃色染料：3%～5％苦味酸溶液；咖啡色染料：2％硝酸銀溶液；黑色染料：煤焦油的酒精溶液。12藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)（2）標(biāo)記規(guī)則：根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被毛顏色的不同選擇不同化學(xué)藥品涂染動(dòng)物。A、兔、貓、狗等動(dòng)物的標(biāo)記方法：用毛筆蘸取不同顏色的染料溶液直接在動(dòng)物背部涂寫(xiě)號(hào)碼。若用硝酸銀溶液涂寫(xiě)，則需在日光下暴露1分鐘。B、大鼠、小鼠的標(biāo)記：通常在動(dòng)物不同部位涂上有色斑點(diǎn)來(lái)表示不同的號(hào)碼。常規(guī)的涂染順序是從左到右、從上到下。左前肢為1號(hào)、左側(cè)腹部2號(hào)、左后肢3號(hào)、頭部4號(hào)、背部5號(hào)、尾根部6號(hào)、右前肢為7、右側(cè)腹部8號(hào)、右后肢9號(hào)、不作染色標(biāo)記為10號(hào)。在每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不超過(guò)10只的情況下適用。

13藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)雙色涂染法是采用兩種顏色同時(shí)進(jìn)行染色標(biāo)記的方法。雙色法色法可標(biāo)記100位以內(nèi)的號(hào)碼。例如用苦味酸（黃色）染色標(biāo)記作為個(gè)位數(shù)，用品紅（紅色）染色標(biāo)記作為十位數(shù)。個(gè)位數(shù)的染色標(biāo)記方法同單色涂染法；十位數(shù)的染色標(biāo)記方法參照單色涂染法，即左前肢為10號(hào)、左側(cè)腹部20號(hào)、左后肢30號(hào)、頭部40號(hào)、背部50號(hào)、尾根部60號(hào)、右前肢70號(hào)、右側(cè)腹部80號(hào)、右后肢90號(hào)，第100號(hào)不作染色標(biāo)記。比如標(biāo)記第12號(hào)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在其左前肢涂染品紅（紅色），在其左側(cè)腹部涂上苦味酸（黃色）即可。14藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)2．穿耳打孔法：用專門(mén)的打孔器在動(dòng)物耳朵的不同部位打孔或缺口來(lái)表示一定號(hào)碼。此法是小鼠常用的標(biāo)記方法之一。3．掛牌編號(hào)法：常用于狗、猴、貓等大動(dòng)物的編號(hào)。實(shí)驗(yàn)前將之固定于動(dòng)物的頸圈或耳上4．人工針刺號(hào)碼法：先將動(dòng)物被毛去除，用針在動(dòng)物皮膚上刺出號(hào)碼，再用酒精墨汁涂染即可15藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)動(dòng)物的抓取小鼠抓取固定方法

小鼠溫順，一般不會(huì)咬人，抓取時(shí)先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)向后拉，在其向前爬行時(shí)，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頸部皮膚，將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，以無(wú)名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。有經(jīng)驗(yàn)者直接用左手小指鉤起鼠尾，迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后頸背部皮膚亦可。這種在手中固定方式，能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他實(shí)驗(yàn)操作。16藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)大鼠的抓取固定方法

大鼠的抓取斯基本同小鼠，只不過(guò)大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用襲擊方式抓取，否則會(huì)被咬傷手指，抓取時(shí)為避免咬傷，可帶上帆布手套。動(dòng)物的抓取17藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)18藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法

經(jīng)消化道給藥1．小鼠灌胃法灌胃法

12~16號(hào)注射針頭，尖端部磨鈍，針頭長(zhǎng)4~5cm進(jìn)針2~3cm后。灌藥量一般為0.1~0.3ml/10g體重19藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)大鼠灌胃法長(zhǎng)約6～8cm，直徑約為1.2mm，一次灌胃量一般在1ml/100g體重。

20藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)豚鼠灌胃法豚鼠體重<200g以下時(shí)，灌胃方法可與大鼠相同；體重>200g以上時(shí)，應(yīng)用木制開(kāi)口器和導(dǎo)尿管灌胃。

插管完畢后，先回抽注射器針?biāo)ǎ瑹o(wú)空氣抽出時(shí)，再慢慢推注藥液。如回抽出空氣，說(shuō)明可能插入氣管，應(yīng)拔出重插。藥物注完后應(yīng)再注入生理鹽水2ml，將管內(nèi)殘存藥物沖入21藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)兔灌胃法：用兔固定箱，可一人操作。右手將開(kāi)口器固定于兔口中，舌壓在開(kāi)口器下面，慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道約15～18cm。插管完畢將胃管的外口端放入水杯中，切忌伸入水過(guò)深。如有氣泡從胃管逸出，說(shuō)明不在食道內(nèi)而是在氣管內(nèi)，應(yīng)拔出來(lái)重插。如無(wú)氣泡逸出，則可將藥推入并以少量清水沖洗導(dǎo)尿管保證管內(nèi)藥液全部進(jìn)入胃內(nèi)。22藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)二、注射給藥法小鼠皮下注射

通常在背部皮下注射。注射時(shí)以左手拇指和中指將小鼠頸背部皮膚輕輕提起，食指輕按其皮膚，使其形成一個(gè)三角形小窩，右手持注射器從三角窩下部刺入皮下，輕輕擺動(dòng)針頭，如易擺動(dòng)時(shí)則表明針尖在皮下，此時(shí)可將藥液注入，針頭拔出后，以左手在針刺部位輕輕捏住皮膚片刻，以防藥液流出。藥量一般為0.1ml—0.3ml/10g體重。23藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)大鼠皮下注射注射部位可在背部或后肢外側(cè)皮下，操作時(shí)輕輕提起注射部位皮膚，將注射針頭刺入皮下后推注藥液。一次注射量不超過(guò)1ml/100g體重。24藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)豚鼠皮下注射通常在大腿部?jī)?nèi)側(cè)面注射。固定豚鼠后，左手固定注射側(cè)的后肢并充分提起皮膚，右手持注射器，針頭與皮膚呈45度角的方向刺入，確定針頭在皮下后推入藥液。注射完畢后應(yīng)指壓刺入部位并輕輕揉之。25藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)兔皮下注射法可在背部或頸部注射，方法參照小鼠皮下注射法。給藥量一般為0.5~1.0ml/kg體重。

26藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)2．腹腔注射法（1）小鼠腹腔注射

左手固定動(dòng)物，使腹部向上，頭呈低位。右手持注射器，在小鼠下腹部腹白線稍向左或右的位置，從下腹部朝頭方向刺入皮膚，針頭到達(dá)皮下后，沿皮下向前推進(jìn)3～5mm，然后使注射器針頭與皮膚呈45°角刺入腹膜。針頭刺入腹膜后感抵抗力消失，此時(shí)在保持針頭不動(dòng)的狀態(tài)下回抽針?biāo)?，如無(wú)回血或尿液，則可推入藥液。一次可注射量為0.1～0.2ml/10g體重。27藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)大鼠、豚鼠、兔、貓等的腹腔注射皆可參照小鼠腹腔注射法。但應(yīng)注意家兔與貓?jiān)诟拱拙€兩側(cè)注射（應(yīng)在離腹白線約1cm處進(jìn)針）。28藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)靜脈注射法

小鼠大鼠一般采用尾靜脈注射。注射前先將動(dòng)物固定于固定器內(nèi)（可采用鐵絲籠、金屬筒或底部有小孔的玻璃筒），使其整個(gè)尾部外露，以右手食指輕彈尾尖部，必要時(shí)可用45～50℃的溫水浸泡尾部1～2分鐘或用75％乙醇擦拭尾部，或者將小鼠先放在40~50℃左右的加熱板上做運(yùn)動(dòng)，使其全部血管擴(kuò)張充血。以拇指與食指捏住尾根部?jī)蓚?cè)，無(wú)名指和小指夾持尾尖部，中指從下托起尾巴固定之。30藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)選擇一根最為充盈的血管，右手持4號(hào)針頭使其與尾部呈30度角刺入靜脈，針頭在靜脈內(nèi)平行推進(jìn)少許，左手三指連針頭和鼠尾一起捏住固定，以防動(dòng)物活動(dòng)時(shí)針頭脫出。回抽見(jiàn)血，且推動(dòng)藥液無(wú)阻力、并可見(jiàn)沿靜脈血管出現(xiàn)一條白線說(shuō)明針頭在血管內(nèi)，可注藥。如遇到阻力較大，局部發(fā)白變硬時(shí)，說(shuō)明針頭不在靜脈內(nèi)，需拔出針頭重新穿刺。注射完畢后拔出針頭，輕按注射部止血。一般選擇尾兩側(cè)靜脈，針刺宜從尾尖端開(kāi)始，漸向尾根部移動(dòng)，以備反復(fù)應(yīng)用。一般一次注射量為0.05～0.2ml/10g體重。31藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)大鼠亦可舌下靜脈注射或待其麻醉后，切開(kāi)其大腿內(nèi)側(cè)皮膚進(jìn)行股靜脈注射，也可頸外靜脈注射。32藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)豚鼠：可選用前肢皮下頭靜脈、耳殼靜脈、外頸靜脈、或腳背中足靜脈等多部位進(jìn)行注射。偶還可心內(nèi)注射。33藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)家兔：家兔靜脈注射一般采用耳緣靜脈。注射前先剪除其表面皮膚上的毛并用水濕潤(rùn)局部，血管即顯現(xiàn)出來(lái)?？上容p彈或用酒精棉球揉擦耳尖部并用左手食指和中指輕壓耳根部，拇指小指夾住耳邊緣部分，以左手無(wú)名指放在其下作墊，待靜脈顯著充盈后，右手持帶有6~8號(hào)針頭的注射器刺入靜脈（第一次進(jìn)針點(diǎn)要盡可能靠遠(yuǎn)心端，以備反復(fù)應(yīng)用），順著血管平行方向深入1厘米后，放松對(duì)耳根處血管的壓迫，左手拇指和食指移至針頭刺入部位，將針頭與兔耳固定針頭刺入血管后再稍向前推進(jìn)，輕輕推動(dòng)針?biāo)?，若無(wú)阻力和局部皮膚發(fā)白、隆起現(xiàn)象，即可進(jìn)行藥物注射，34藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉1.局部麻醉浸潤(rùn)麻醉、阻滯麻醉、和椎管麻醉常用0.5～1％普魯卡因，表面麻醉宜選用2%丁卡因溶液。2.全身麻醉（1）吸入麻醉小鼠、大鼠和兔常用乙醚吸入麻醉。將浸過(guò)乙醚的脫脂棉花鋪在麻醉用的玻璃容器底部，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于容器內(nèi)，容器加蓋。乙醚具揮發(fā)性，經(jīng)呼吸道進(jìn)入肺泡后對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉，吸入后約15～20分鐘開(kāi)始發(fā)揮作用，適用于時(shí)間短的手術(shù)過(guò)程或?qū)嶒?yàn)。內(nèi)放置乙醚棉球可追加麻醉時(shí)間。但在麻醉初期，動(dòng)物常出現(xiàn)強(qiáng)烈興奮的現(xiàn)象，因其對(duì)呼吸道有較強(qiáng)的刺激作用，可使粘液分泌增多以致堵塞呼吸道。另外，乙醚易燃、易爆，故需要專人管理。使用時(shí)應(yīng)避火、通風(fēng)、注意安全。35藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)（2）注射麻醉

適用于多種動(dòng)物，注射方法不一。不同動(dòng)物對(duì)注射麻醉藥的反應(yīng)不盡相同，故需根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的針對(duì)不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用合適的麻醉藥種類和劑量。36藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)表3-6-1注射麻醉藥的劑量與給藥途徑藥物（常用濃度）動(dòng)物給藥法劑量（mg/kg）維持時(shí)間（小時(shí)）備注戊巴比妥鈉（1～5％）犬貓兔豚鼠大鼠小鼠I.V.I.P.I.H.I.P.I.P.I.P.3030504545451～21～21～21～21～21～2硫噴妥鈉（5％）犬、貓兔、大鼠I.V.I.P.I.V.I.P.20～3030～500.25～0.50.25～0.5抑制呼吸，I.V.宜慢，應(yīng)臨用時(shí)配烏拉坦（20％）貓、兔大鼠、小鼠蛙I.V.I.P.I.M.淋巴囊90～1000130020002～42～42～4毒性小，較安全氯醛糖（2％）貓、兔大鼠I.V.I.P.I.V.I.P.80805～65～6安全，肌松不全氯烏合劑貓兔I.V.I.P.氯75烏7505～6I.V.靜脈注射I.P.腹腔注射I.M.肌肉注射I.H.皮下注射*氯:氯醛糖烏：烏拉坦37藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)在麻醉過(guò)程中，除參照上述一般藥物用量標(biāo)準(zhǔn)外，還必須密切注意動(dòng)物的狀態(tài)，以決定麻醉藥的用量。麻醉的深淺，可根據(jù)呼吸的深度和快慢、角膜反射的靈敏度、四肢及腹壁肌肉的緊張性以及皮膚夾捏反應(yīng)等進(jìn)行判斷。當(dāng)呼吸突然變