中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)培訓(xùn)課件

中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)中藥中的糖類(lèi)包括單糖、低聚糖和多糖。單糖是糖的最小單位。低聚糖由2~9個(gè)單糖聚合而成。多糖由10個(gè)以上的單糖聚合而成，多數(shù)多糖是由數(shù)百至數(shù)千個(gè)單糖聚合而成的。2中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

3.1.1必備知識(shí)

3中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)一、糖1.單糖五糖醛糖甲基五碳糖六碳醛糖六碳酮糖糖醛酸4中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)五碳醛糖六碳醛糖六碳酮糖5中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)2.低聚糖2至9個(gè)單糖通過(guò)苷鍵鍵合而成的直鏈糖或支鏈糖。多糖麥芽糖6中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)二、苷依據(jù)苷元的結(jié)構(gòu)類(lèi)型：黃酮苷、蒽醌苷、香豆素苷、氰苷、吲哚苷等。依據(jù)苷在植物體內(nèi)是原本存在的還是次生的：原生苷和次生苷。依據(jù)苷元上連接的單糖基個(gè)數(shù)：?jiǎn)翁擒?、二糖苷等；依?jù)苷元上連接糖鏈的位置是一處、兩處還是多處：?jiǎn)翁擎溰?、二糖鏈苷等；依?jù)苷鍵原子不同：可分為氧苷、硫苷、氮苷和碳苷，其中氧苷最多見(jiàn)。

7中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

氧苷：苷鍵原子為氧。硫苷：苷鍵原子為硫。氮苷：苷鍵原子為氮。碳苷：苷鍵原子為碳。苷類(lèi)苷的分類(lèi)：按苷鍵原子分8中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（一）苷的分類(lèi)

1、氧苷：最常見(jiàn)的是醇苷、酚苷和酯苷。

（1）醇苷：由糖的端基羥基與苷元上的醇羥基脫水縮合而成的苷。

紅景天苷

龍膽苦苷

具有致適應(yīng)作用的紅景天苷

治療肝炎的龍膽苦苷

9中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（2）酚苷酚苷是由糖的端基羥基與苷元上酚羥基脫水而成的苷。

天麻苷丹皮苷天麻中的鎮(zhèn)靜成分天麻苷丹皮中的丹皮苷10中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（3）酯苷是由糖的端基羥基與苷元上的羧基脫水而成的苷。其苷鍵既有縮醛的性質(zhì)又有酯的性質(zhì)，故稀酸稀堿均易使其水解。R=H山慈菇苷AR=OH山慈菇苷B具有抗霉菌作用11中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（4）氰苷氰苷是由糖的端基羥基與氰醇衍生物分子中的羥基脫水形成的苷，且多為α-氰基。氰基性質(zhì)不穩(wěn)定，易為稀酸和酶水解，其苷元α-羥氰性質(zhì)也不穩(wěn)定，易分解為醛和酮，并釋放出易引起中毒的氫氰酸。苦杏仁中具鎮(zhèn)咳作用的苦杏仁苷R＝葡萄糖苦杏仁苷R＝H野櫻苷12中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)2、硫苷硫苷可看成由糖的端基羥基與苷元上的巰基（-SH）脫水縮合而成的苷，且其水解后的苷元不含巰基。蘿卜中的蘿卜苷

13中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)3、氮苷氮苷是由糖的端基碳直接與苷元上的氮原子相連的苷。如：核苷類(lèi)、腺苷、鳥(niǎo)苷、尿苷以及巴豆中的巴豆苷。腺苷巴豆苷14中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)4、碳苷

是由糖的端基碳直接與苷元上的碳原子相連的苷。碳苷的苷元多為黃酮、蒽醌、蒽酮、沒(méi)食子酸等，尤以黃酮碳苷最多。

蘆薈苷15中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)原生苷和次生苷原生苷苦杏仁苷酶次生苷（野櫻苷）16中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（二）苷的理化性質(zhì)性狀形態(tài)苷類(lèi)多為固體，糖基少的易形成結(jié)晶，糖基多的多呈具吸濕性的無(wú)定形的粉末。顏色苷類(lèi)有的無(wú)色，有的如黃酮、蒽醌苷呈深淺不同的黃色、橙色。味一般無(wú)味或稍具苦味，也有很苦（龍膽苦苷）或很甜（甜菊苷）17中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)旋光性苷有旋光性，且多為左旋，但水解后變?yōu)橛倚奶?。另外，苷無(wú)還原性，但水解后的單糖卻有還原性。故比較苷類(lèi)水解前后旋光性和還原性的改變，均有助于檢識(shí)苷類(lèi)的存在。溶解性一般來(lái)說(shuō)，苷類(lèi)具親水性，可溶于水、甲醇、乙醇等極性有機(jī)溶劑，不溶于乙醚、苯、石油醚等極性小的有機(jī)溶劑。而苷元具親脂性，可溶于有機(jī)溶劑，不溶于水。18中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

（三）苷鍵的裂解通過(guò)苷鍵的裂解反應(yīng)切斷苷鍵，可以了解苷元的結(jié)構(gòu)及糖的種類(lèi)，確定苷元與糖及糖與糖之間的連接方式。常用切斷苷鍵的方法有：酸水解堿水解酶水解氧化開(kāi)裂19中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易被稀酸水解。酸水解難易與苷鍵原子的電子云密度及其所處空間環(huán)境有密切關(guān)系。苷鍵原子上的電子云密度越高或其附近的空間位阻越小，則苷鍵原子越易質(zhì)子化，也就越易水解。苷+5%HCl→苷元+糖1.酸水解20中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)酸水解規(guī)律苷鍵原子不同，水解難易不同。水解由易至難為：

氮苷、氧苷、硫苷、碳苷。糖的環(huán)狀結(jié)構(gòu)大小不同，水解難易不同。呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解，由于酮糖多為呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，醛糖多為吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)，故酮糖苷較醛糖苷易水解。糖的C2位取代基的性質(zhì)不同，水解難易不同。水解由易至難：2-去氧碳苷，2-羥基糖苷，2-氨基糖苷。吡喃糖苷中，C5上的取代基越大，越難水解。故水解由易至難為:

五碳糖苷、甲基五碳糖苷、六碳糖苷、七碳糖苷若C5上接COOH則最難水解。21中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

一般苷類(lèi)在稀酸條件下即可發(fā)生酸水解。對(duì)某些難水解的苷需較劇烈的水解條件（如長(zhǎng)時(shí)間在酸中加熱），但這樣又易使苷元結(jié)構(gòu)變化生成脫水苷元。兩相水解反應(yīng)：適于水解后對(duì)酸不穩(wěn)定的苷元，即在反應(yīng)混和液中加入與水不相混溶有機(jī)溶劑（如苯），使水解釋放出的苷元能迅速轉(zhuǎn)溶于有機(jī)層，從而避免其在酸水中停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而被破壞。酸水解注意事項(xiàng)：糖苷/水+H++CHCl3Δ苷元/CHCl3+糖/水22中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)2.堿水解一般苷鍵對(duì)稀堿穩(wěn)定，故很少用稀堿來(lái)水解苷鍵，但酚苷、酯苷以及烯醇苷或β－吸電子基取代苷時(shí)，遇堿就能被水解。4-羥基香豆素苷23中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)3.酶水解特點(diǎn)：條件溫和：不改變的苷元的結(jié)構(gòu)，得到苷元或次生苷和低聚糖，并可獲知苷元與糖、或糖與糖之間的連接方式。專(zhuān)屬性強(qiáng)：某種酶往往只能水解某一種或某一類(lèi)苷鍵。如轉(zhuǎn)化糖酶可水解β果糖苷鍵麥芽糖酶可水解α-葡萄糖苷鍵24中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)25中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

4.氧化開(kāi)裂法Smith降解法常用的氧化開(kāi)裂法，適于酸水解時(shí)苷元易被破壞的苷或難水解的碳苷，能避免采用劇烈酸水解而導(dǎo)致苷元結(jié)構(gòu)遭破壞，對(duì)苷元的結(jié)構(gòu)研究有重要意義。26中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)

3.1.2苷的提取與分離苷：極性隨著糖基的增多而增大。糖基增多，苷元所占比例相應(yīng)變小，親水性增大。苷元：一般可溶于低極性有機(jī)溶劑。28中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)一、苷的提取苷的種類(lèi)不同，性質(zhì)不同，提取分離方法也不同。原生苷類(lèi)：需抑制或破壞酶的活性。如：甲醇、乙醇、沸水提取或在藥材中加入一定量碳酸鈣。次生苷或苷元：利用酶水解，工業(yè)上一般采用發(fā)酵法來(lái)酶解。在提取過(guò)程中要盡量避免與酸與堿接觸，以防苷類(lèi)被酸或堿水解。29中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)通常是將生藥的乙醇或甲醇提取物順次以石油醚脫脂，以乙醚或氯仿抽出苷元，以乙酸乙酯抽出單糖苷或少糖苷，再以丁醇提取多糖苷。30中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)二、苷的分離經(jīng)初步提取得到的苷類(lèi)往往不同程度地混有其他物質(zhì)，需進(jìn)一步分離純化。堿溶酸沉法：鉛鹽沉淀法：酚性物質(zhì)與非酚性物質(zhì)；鄰二酚羥基或羧基的成分與一般酚羥基。凝膠過(guò)濾法：大孔樹(shù)脂法：其他色譜柱：如硅膠、聚酰胺、活性炭等。31中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（一）化學(xué)檢識(shí)1、堿性酒石酸銅2、氨性硝酸銀3、Molish試劑反應(yīng)三、苷的檢識(shí)32中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)Molish反應(yīng)（α-萘酚-濃硫酸反應(yīng)）：方法：于糖或苷的水溶液中加入3%α-萘酚乙醇溶液混合后，沿管壁滴加濃硫酸，使酸層集于下層，則于兩液層交界處呈現(xiàn)紫（棕）色環(huán)。33中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)（二）色譜檢識(shí)1、紙色譜檢識(shí)展開(kāi)劑：正丁醇-醋酸-水（4：1：5上層，BAW）水飽和的苯酚問(wèn)題：紙色譜中以BAW和正丁醇作展開(kāi)劑，展開(kāi)糖，誰(shuí)的Rf值大？34中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)2、薄層色譜檢識(shí)硅膠用0.03mol/L硼酸溶液或無(wú)機(jī)鹽水溶液代替水涂布薄層，能增加糖在固定相中的溶解度，樣品承載量明顯增加。問(wèn)題：吸附薄層還是分配薄層？35中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)本章節(jié)要求

掌握糖、苷的概念，基本結(jié)構(gòu)類(lèi)型。掌握其理化性質(zhì)。熟悉糖、苷提取分離。36中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)1、根據(jù)苷原子分類(lèi)，屬于C－苷的是A、山慈菇苷B、黑芥子苷C、巴豆苷D、蘆薈苷E、毛茛苷37中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)2、苦杏仁苷酸水解的最終產(chǎn)物是A、杏仁腈的兩分子葡萄糖B、野櫻皮苷和一分子葡萄糖C、氫氰酸、苯甲酸和一分子葡萄糖D、氫氰酸、苯甲酸和二分子葡萄糖38中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)3、從新鮮的植物中提取原生苷時(shí)應(yīng)注意的是A、苷的溶解性B、苷的極性C、苷的穩(wěn)定性D、苷的酸水解性E、植物中共存酶對(duì)苷的水解特性

4、屬于碳苷的是A、蘆薈苷B、番瀉苷C、蘆薈大黃苷D、大黃素-8-o-葡萄糖苷39中藥化學(xué)苷的提取分離技術(shù)5、含苷類(lèi)中藥的醇提取液如要將苷和游離苷元分離，采用的方法是A、回收乙醇后用乙醚萃取游離苷元