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第九章親和純化技術(shù)利用生物分子間的特異性結(jié)合作用的原理進行生物物質(zhì)分離純化的技術(shù)稱為親和純化技術(shù)(Affinitypurification)QuitPreviousmenuChromatographGelfiltrationionexchangeAffinityPages759to761:Figures18.24to18.26Columnchromatographyincludesavarietyofpowerfultechniquestoseparatingmixturesofproteins.Typicallyaglasscolurmnisfilledwithbeadsofaninertmatrix.Themixtureofproteinstobepurifiedisdissolvedinsolutionandpassedslowlythroughthecolumn.Proteinsthatinteractwiththematrixaresloweddown.Thosethatdonot,pasthroughmorequicklySelectoneofthetypesolchromatography技術(shù)要點(1)找與底物?？赡娼Y(jié)合的配基(2)將配基通過共配基固定競價鍵偶聯(lián)到基質(zhì)(3)配基與底物吸嗽(4)洗脫目標物。親和純化技術(shù)親和層析(Affinitychromatography)親和過濾(膜分離)親和分配(雙水相萃取)親和反膠團萃取(反膠團萃取)親和沉淀(沉淀)親和電泳(電泳)第一節(jié)親和層析(affinityChromatography利用生物大分子物質(zhì)具有與某些相應的分子專一性可逆結(jié)合的特性而建立的層析技術(shù)適用于從成份復雜且雜質(zhì)含量遠大于目標物的混合物中提純目標物。特點經(jīng)過一次處理可得到高純度活性物質(zhì)設(shè)備要求不高、操作簡便、特異性強、分離速度快、分離效果好、分離條件溫和親和吸附劑通用性較差,專親和吸附劑:載體配基在親和層析中起可逆結(jié)合的特異gand(A)性物質(zhì)稱為配基ouplingreactiongandSolidmatrix與配基結(jié)合的層析介質(zhì)稱為(Matrix)。、親和層析的原理(1)配基固定化:配基x與載體偶聯(lián),結(jié)合成具有ooo0BWashingElution特異親和性的分離介質(zhì)。000Sample(2)吸附樣品:親和層析介質(zhì)選擇性吸附生物活性物質(zhì)(3)選擇適宜〖的條件使被吸附物活性物9●0●質(zhì)解吸。0000B◆◆◆親和層析載體(一)、親和層析對載體的要求(1)充分功能化,與配

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