第二章核酸的化學(xué)

第二章核酸的化學(xué)1第1頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞的分類(lèi)

根據(jù)生物的進(jìn)化程度，細(xì)胞可以分為兩大類(lèi)：原核細(xì)胞和真核細(xì)胞第2頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、原核細(xì)胞

原核細(xì)胞是一類(lèi)進(jìn)化程度低，結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的一類(lèi)細(xì)胞。屬于原核細(xì)胞的有細(xì)菌和藍(lán)藻等。原核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)

原核細(xì)胞的特點(diǎn):原核細(xì)胞的外層是細(xì)胞壁和細(xì)胞膜（質(zhì)膜），內(nèi)部為細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)的結(jié)構(gòu)非常簡(jiǎn)單，沒(méi)有明顯的細(xì)胞器（由封閉的生物膜包裹的固體質(zhì)粒），只有原始的細(xì)胞核（無(wú)核膜和核仁）和其它一些核糖核蛋白體等。第3頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、真核細(xì)胞真核細(xì)胞是高等植物和動(dòng)物的基本組織單位。真核細(xì)胞的外層為細(xì)胞膜（植物細(xì)胞還有一層細(xì)胞壁），內(nèi)部為細(xì)胞質(zhì)。真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)細(xì)胞質(zhì)的結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，含有許多細(xì)胞器，主要有：細(xì)胞核、線粒體、核糖核蛋白體、高爾基體和溶酶體等。植物細(xì)胞中還含有質(zhì)體、葉綠體和液泡等。各個(gè)細(xì)胞器具有不同的生物功能，它們之間的協(xié)調(diào)運(yùn)作，使細(xì)胞內(nèi)的代謝和各種生理活動(dòng)能夠有條不紊地進(jìn)行。第4頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、核酸的研究歷史和重要性1869

Miescher從膿細(xì)胞的細(xì)胞核中分離出了一種含磷酸的有機(jī)物，當(dāng)時(shí)稱(chēng)為核素,后稱(chēng)為核酸（nucleicacid）；1944Avery等通過(guò)肺炎球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)；1953Watson和Crick提出DNA結(jié)構(gòu)的雙螺旋模型；1958Crick提出遺傳信息傳遞的中心法則；70年代建立DNA重組技術(shù)；80年代以后分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)等學(xué)科突飛猛進(jìn)發(fā)展，實(shí)施人類(lèi)基因組計(jì)劃（HGP）。第5頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

定義：核酸是由許多核苷酸單元按一定順序連接所組成的多核苷酸。作用：核酸是遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)，是遺傳信息的載體分子生物學(xué)的中心法則

遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再?gòu)腞NA傳遞給蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過(guò)程，以及遺傳信息從DNA傳遞給DNA的復(fù)制過(guò)程。二、核酸分類(lèi)第6頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

脫氧核糖核酸(DNA)

核酸分類(lèi)核糖核酸(RNA)第7頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

遺傳信息的貯存和攜帶者，生物的主要遺傳物質(zhì)。在真核細(xì)胞中，DNA主要集中在細(xì)胞核內(nèi)，線粒體和葉綠體中均有各自的DNA。原核細(xì)胞沒(méi)有明顯的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，DNA存在于稱(chēng)為類(lèi)核的結(jié)構(gòu)區(qū)。每個(gè)原核細(xì)胞只有一個(gè)染色體，每個(gè)染色體含一個(gè)雙鏈環(huán)狀DNA。脫氧核糖核酸（DNA）第8頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月核糖核酸（RNA）

主要參與遺傳信息的傳遞和表達(dá)過(guò)程，細(xì)胞內(nèi)的RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，少量存在于細(xì)胞核中，病毒中RNA是遺傳信息的儲(chǔ)存者。發(fā)現(xiàn)有些RNA具生物催化作用,RNA為單鏈分子。第9頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、核酸的組成成分第10頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月RNA含β－D－核糖DNA含β－D－2－脫氧核糖β

－D－2－O－甲基核糖

1、核糖和脫氧核糖

第11頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、堿基-嘧啶堿和嘌呤堿1）嘧啶堿胞嘧啶C尿嘧啶U胸腺嘧啶T修飾堿第12頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月腺嘌呤A鳥(niǎo)嘌呤G修飾堿嘌呤2）嘌呤堿

第13頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）堿基的結(jié)構(gòu)特征胞嘧啶C尿嘧啶U胸腺嘧啶T腺嘌呤A鳥(niǎo)嘌呤G

堿基都具有芳香環(huán)的結(jié)構(gòu)特征,嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)均呈平面或接近于平面的結(jié)構(gòu)。第14頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

堿基的芳香環(huán)與環(huán)外基團(tuán)可以發(fā)生酮式—烯醇式或胺式—亞胺式互變異構(gòu)。第15頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA：4）核酸堿基組成腺嘌呤(A),鳥(niǎo)嘌呤(G)，胞嘧啶(C)，胸腺嘧啶(T)腺嘌呤(A),鳥(niǎo)嘌呤(G)，胞嘧啶(C)，尿嘧啶(U)RNA:5—甲基尿嘧啶

第16頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、核苷

糖與堿基之間的C-N鍵，稱(chēng)為C-N糖苷鍵AGCU191′1′脫氧胸苷（dT;T)假尿苷（φ）第17頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、核苷酸核苷的核糖上的羥基與磷酸酯化

核苷酸的表示：1）各種核酸苷用英文縮寫(xiě)表示，如腺苷酸為AMP,鳥(niǎo)苷酸為GMP。脫氧核苷酸則在英文縮寫(xiě)前加小寫(xiě)d，如dAMP，dGMP等。2）在核苷符號(hào)左側(cè)加p表示5′-磷酸酯，pA表示5′-腺苷酸；在核苷符號(hào)右側(cè)加p表示3′-磷酸酯，Cp表示3′-胞苷酸。AdTdTMPAMP5′-磷酸化5′-磷酸化第18頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、核苷酸衍生物1)、繼續(xù)磷酸化第19頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月特征：（1）連接鍵：3′,5′-磷酸二酯鍵；（2）主鏈：相間排列戊糖、磷酸；（3）堿基在主鏈的側(cè)鏈；（4）主鏈在細(xì)胞pH值下帶負(fù)電荷；2）核苷酸的連接第20頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（6）多聚核苷酸鏈具有方向性，當(dāng)表示一個(gè)多聚核苷酸鏈時(shí)，必須注明它的方向是5′→3′或是3′→5′。（5）5′-磷酸端（常用5′-P表示）；3′-羥基端（常用3′-OH表示）；第21頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6、多聚核苷酸的表示方式DNARNA5′PdAPdCPdGPdTOH3′5′PAPCPGPUOH′

或5′ACGTGCGT3′5′ACGUAUGU3′

ACGTGCGTACGUAUGUT5’3’OHU5’3’OHOHOHOHOH核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)

第22頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、DNA的結(jié)構(gòu)1、DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)DNA由數(shù)量龐大的4種脫氧核苷酸通過(guò)3′，5′-磷酸二酯鍵連接而成的。DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)是脫氧核苷酸在分子中的排列順序(序列)。DNA序列測(cè)定方法：Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam－GilbertDNA化學(xué)降解法。多核苷酸鏈均有5′

-末端和3′

-末端。DNA的堿基順序是遺傳信息存儲(chǔ)的分子形式。生物界物種的多樣性寓于DNA分子中四種核苷酸千變?nèi)f化的不同排列組合之中。5′3′第23頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、DNA的雙螺旋二級(jí)結(jié)構(gòu)

1）雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的主要依據(jù)

①x—光衍射

發(fā)現(xiàn)不同來(lái)源的DNA纖維具有相似的x—光衍射圖譜。X—光衍射數(shù)據(jù)說(shuō)明DNA含有2條或2條以上具有螺旋結(jié)構(gòu)的多核苷酸鏈，而且沿纖維長(zhǎng)軸有0.34nm和3.4nm兩個(gè)重復(fù)的周期性變化。第24頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②關(guān)于堿基成對(duì)的證據(jù)DNA中的腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的數(shù)目相等，胞嘧啶(C)的數(shù)目和鳥(niǎo)嘌呤(G)的數(shù)目相等，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)間可以生成兩個(gè)氫鍵；而胞嘧啶(C)和鳥(niǎo)嘌呤(G)之間可以允許生成三個(gè)氫鍵。第25頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月③

電位滴定行為

通過(guò)電位確定法證明DNA的磷酸基可以滴定，而嘌呤和嘧啶的氨基一NH2則不能滴定，它們是用氫鍵連接起來(lái)的。第26頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2）

雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的要點(diǎn)

(1)DNA分子是由兩條方向相反的平行多核苷酸鏈構(gòu)成。

第27頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

兩條鏈的糖-磷酸主鏈都是右手螺旋，有一共同的螺旋軸，螺旋表面有一條大溝和一條小溝。第28頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(2)

堿基成對(duì)規(guī)律

螺旋直徑:2nm堿基在主鏈內(nèi)側(cè)第29頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月A=T，T=A第30頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第31頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月糖平面與螺旋軸基本平行，磷酸基連在糖環(huán)的外側(cè)。(3)成對(duì)堿基大致處于同一平面，該平面與螺旋軸基本垂直。相鄰堿基對(duì)平面間的距離為0.34nm，使堿基平面間的π電子云可在一定程度上互相交蓋，形成堿基堆積力。雙螺旋每轉(zhuǎn)一周有10個(gè)堿基對(duì)，每轉(zhuǎn)的高度(螺距)為3.4nm。DNA分子的大小常用堿基對(duì)數(shù)(bP)表示，而單鏈分子的大小則常用堿基數(shù)(b)來(lái)表示。2.0nm小溝大溝第32頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(4）大多數(shù)天然DNA屬雙鏈結(jié)構(gòu)DNA，某些病毒如φ174和M13的DNA是單鏈分子DNA。(5)雙鏈DNA分子主鏈上的化學(xué)鍵受堿基配對(duì)等因素影響旋轉(zhuǎn)受到限制，使DNA分子較剛硬，比較伸展的結(jié)構(gòu)?！┗瘜W(xué)鍵亦可在—定范圍內(nèi)旋轉(zhuǎn)，使DNA分子有—定的柔韌性，雙螺旋結(jié)構(gòu)可以發(fā)生一定的變化而形成不同的類(lèi)型，亦可進(jìn)一步扭曲成三級(jí)結(jié)構(gòu)。2.0nm小溝大溝第33頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月B型結(jié)構(gòu)（92%鈉鹽）兩條鏈反向平行，右手螺旋雙螺旋每轉(zhuǎn)一周為10堿基對(duì)）A型結(jié)構(gòu)（75%鈉鹽）堿基平面傾斜20o，螺旋變粗變短，螺距2～3nm。Z型結(jié)構(gòu)左手螺旋，只有小溝DNA雙螺旋構(gòu)象類(lèi)型第34頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月A-DNAZ-DNAB-DNAABZ外型粗短適中細(xì)長(zhǎng)螺旋方向右手右手左手螺旋直徑2.55nm2.37nm1.84nm堿基直升0.23nm0.34nm0.38nm每圈堿基數(shù)1110.412軸心與堿基對(duì)關(guān)系2.46nm3.32nm4.56nm堿基傾角1901090糖苷鍵構(gòu)象反式反式C、T反式，G順式大溝很窄很深很寬較深平坦小溝很寬、淺窄、深較窄很深三種DNA雙螺旋構(gòu)象比較第35頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）雙螺旋穩(wěn)定的力氫鍵堿基堆積力（疏水相互作用及范德華力）離子鍵等2.0nm小溝大溝第36頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4）DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)的意義

揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價(jià)值的是確認(rèn)了堿基配對(duì)原則，是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。2.0nm小溝大溝第37頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

在細(xì)胞內(nèi)，由于DNA分子與其它分子（主要是蛋白質(zhì)）的相互作用，使DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲形成的高級(jí)結(jié)構(gòu)，其中，超螺旋是最常見(jiàn)也是研究最多的DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)。

3、DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)第38頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、RNA的結(jié)構(gòu)與功能

RNA的結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)堿基組成A、G、C、U（A＝U/G≡C）稀有堿基較多，穩(wěn)定性較差，易水解多為單鏈結(jié)構(gòu)，少數(shù)局部形成螺旋分子較小分類(lèi)mRNAtRNArRNA第39頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、tRNA(轉(zhuǎn)移RNA)約占總RNA的10-15%；在蛋白質(zhì)生物合成中，將相應(yīng)的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖核蛋白體；每一個(gè)氨基酸至少有一個(gè)相應(yīng)的tRNA；tRNA分子的大小很相似，鏈長(zhǎng)一般在73-78個(gè)核苷酸之間。第40頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1)tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)分子中含有較多的修飾成分。3'-末端都具有CpCpAOH的結(jié)構(gòu)。A＝U/G≡C第41頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2）三葉草葉型結(jié)構(gòu)的主要特征氨基酸臂

二氫尿嘧啶區(qū)(D臂,D環(huán))反密碼區(qū)(反密碼臂,反密碼環(huán))TφC區(qū)(TφC臂,TφC環(huán)可變區(qū)第42頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第43頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)

在tRNA的三葉草形二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，突環(huán)上未配對(duì)的堿基因分子結(jié)構(gòu)扭曲而形成配對(duì)，形成了tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)，倒L型結(jié)構(gòu)。第44頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月氨基酸臂和TψC臂沿同一軸排列倒L型結(jié)構(gòu)反密子臂和D臂沿同一軸排列D環(huán)和TψC環(huán)構(gòu)成倒L的轉(zhuǎn)角第45頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、rRNA(核糖體RNA)約占全部RNA的80%；核糖核蛋白體的主要組成部分（40%蛋白質(zhì)和60%rRNA

）；核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所，參與蛋白質(zhì)的生物合成。rRNA是細(xì)胞中含量最多的一類(lèi)RNA，且分子量比較大，代謝都不活躍，種類(lèi)僅有幾種，原核生物中主要有5SrRNA、16SrRNA和23SrRNA三種，真核生物中主要有5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA四種。

第46頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、mRNA(信使RNA)約占總RNA的5%。mRNA堿基順序，直接為蛋白質(zhì)的氨基酸編碼，并決定蛋白質(zhì)的氨基酸順序。不同細(xì)胞的mRNA的鏈長(zhǎng)和分子量差異很大功能是將DNA的遺傳信息傳遞到蛋白質(zhì)合成基地（核糖核蛋白體）。第47頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、核酸的性質(zhì)

核酸的性質(zhì)是由其組成成分和結(jié)構(gòu)決定的。核酸的主要組分：堿基、戊糖和磷酸。

核酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：相對(duì)分子質(zhì)量大，分子中具有共軛雙鍵、氫鍵、糖苷鍵和3′，5′-磷酸二酯鍵，許多活性基團(tuán)，如羥基、磷酸基、氨基。第48頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1）兩性電解質(zhì)：核酸和核苷酸既有磷酸基，又有堿性基團(tuán)，是兩性電解質(zhì)，因磷酸的酸性強(qiáng)，常表現(xiàn)為酸性。1、一般性質(zhì)2）溶解性：一般都微溶于水，不溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。常用乙醇從溶液中沉淀核酸。

核酸、核苷酸、堿基在水中的溶解度依次減小，但核酸的鈉鹽比自由酸易溶于水。

RNA和核苷酸、核苷、堿基的純品都是白色粉末或結(jié)晶，DNA為疏松的石棉一樣的纖維狀結(jié)晶。

第49頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）水解

4）分析鑒定D－核糖濃鹽酸和苔黑酚(甲基間苯二酚)共熱綠色D－2－脫氧核糖酸和二苯胺共熱藍(lán)紫色

核酸可被酸、堿或酶水解成為各種組分，用層析、電泳等方法分離，其水解程度因水解條件而異。RNA能在室溫條件下被稀堿水解成核苷酸而DNA對(duì)堿較穩(wěn)定。第50頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、核酸的紫外吸收

在核酸分子中，嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵體系，具有紫外線吸收光譜，一般在260nm左右有最大吸收峰，作為核酸及其組份定性和定量測(cè)定的依據(jù)。嘌呤嘧啶第51頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、核酸的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性

1）堿基對(duì)間的氫鍵

2）堿基堆積

3）環(huán)境中的正離子

第52頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、核酸的變性1)核酸的變性：核酸雙螺旋區(qū)的多聚核苷酸鏈間的氫鍵斷裂，變成單鏈結(jié)構(gòu)的過(guò)程。變性核酸將失去其部分或全部的生物活性。核酸的變性不涉及磷酸二酯鍵的斷裂，它的一級(jí)結(jié)構(gòu)(堿基順序)保持不變。引起核酸變性的因素：溫度升高、酸堿度改變、甲醛和尿素等存在均可引起核酸的變性。第53頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2）DNA變性分子由具有一定剛性變?yōu)闊o(wú)規(guī)則線團(tuán)，溶液的粘度降低，沉降速度增加；（1）DNA變性后的特征藏在里面的堿基全部暴露出來(lái)，核酸的紫外吸收值急劇增加;生物活性喪失。第54頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（2）熱變性和Tm

紫外吸收的增加且達(dá)最大增量一半時(shí)的溫度值稱(chēng)熔解溫度(Tm

)。DNA的變性過(guò)程是突變性的，在很窄的溫度區(qū)間內(nèi)完成。一般DNA的Tm值在70-85C之間第55頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）影響Tm的因素

①G—C對(duì)含量G、C對(duì)相對(duì)含量愈高、Tm愈高。經(jīng)驗(yàn)公式為：(G+C)％＝(Tm—69.3)x2.44②溶液的離子強(qiáng)度

離子強(qiáng)度較低的介質(zhì)中，Tm較低。在純水中，DNA在室溫下即可變性。第56頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月③溶液的pH

高pH下堿基去質(zhì)子而喪失形成氫鍵的能力，pH大于11.3時(shí)，DNA完全變性;pH低于5.0時(shí)，DNA易脫嘌呤。對(duì)單鏈DNA進(jìn)行電泳時(shí)，常在凝膠中加人NaOH以維持變性狀態(tài)。④變性劑

甲酰胺、尿素、甲醛等可破壞氫鍵，妨礙堿基堆積，使Tm下降。對(duì)單鏈DNA進(jìn)行電泳時(shí)常使用上述變性劑。第57頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、核酸的復(fù)性1）復(fù)性的過(guò)程

變性核酸的互補(bǔ)鏈在適當(dāng)條件下重新締合成雙螺旋的過(guò)程稱(chēng)復(fù)性。

將熱變性的DNA驟然冷卻至低溫時(shí)，DNA不可能復(fù)性。變性的DNA緩慢冷卻時(shí)可復(fù)性，稱(chēng)為“退火”。

較合適的復(fù)性溫度Tm－25℃

DNA復(fù)性后，一系列性質(zhì)將得到恢復(fù)，但是生物活性一般只能得到部分的恢復(fù)，具有減色效應(yīng)。第58頁(yè)，課件共64頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(1)單鏈片段濃度越高，隨