2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試歷年真題集錦附帶答案

2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試歷年真題集錦帶答案（圖片大小可自由調(diào)整）題型一二三四五六七總分得分第1卷一.參考題庫(共30題)1.連接反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP2.不是基因工程載體中的報告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori3.限制與修飾現(xiàn)象是宿主的一種保護(hù)體系，它是通過對外源DNA的修飾和對自身DNA的限制實(shí)現(xiàn)的。4.在LacI標(biāo)記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，在X-gal培養(yǎng)基中顯_________色，為陽性克隆。5.cDNA合成第一鏈時所用的引物是A、PolyCB、PolyTC、發(fā)夾結(jié)構(gòu)D、PolyA6.不同的限制性核酸內(nèi)切酶都鹽離子強(qiáng)度有不同的要求，一般按離子強(qiáng)度不同分為低鹽、_________、高鹽三類。7.某學(xué)生在用EcoRI切割外源DNA片段時，出現(xiàn)了星號活性，請分析可能的原因？8.融合表達(dá)載體的中的GST也叫A、六聚組氨酸肽B、蛋白質(zhì)AC、纖維素結(jié)合域D、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶9.大腸桿菌DNA聚合酶有幾種酶活性A、5種B、2種C、3種D、4種10.黏性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點(diǎn)，但是也有一些不足，請指出這些不足之處。11.在眾多的植物轉(zhuǎn)基因方法中，_________的方法應(yīng)用最多。12.轉(zhuǎn)錄水平的鑒定是指_________。13._________成為國際國內(nèi)人體健康戰(zhàn)略的重中之重。14.下列哪一型限制性核酸內(nèi)切酶占比例最大A、I型B、II型C、III型D、IV型15.多數(shù)II類限制酶反應(yīng)最適PH是A、PH:2-4B、PH:4-6C、PH:6-8D、PH:7-1016.下列哪一種方法屬于核酸分子雜交A、southernblotB、PCR擴(kuò)增C、限制圖譜分析法D、抗藥性標(biāo)志篩選17.利用限制性核酸內(nèi)切酶降解基因組DNA，通常選擇幾個堿基識別序列的限制性核酸內(nèi)切酶A、4B、5C、6D、718.II類限制酶反應(yīng)中必須添加的陽離子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+19.下列含有內(nèi)含子的生物是A、青霉B、放線菌C、藍(lán)藻D、大腸桿菌20.用來鑒定DNA的技術(shù)是：A、Northern雜交B、Western雜交C、親和層析D、Southern雜交21.基因工程的操作程序可簡單地概括為A、載體和目的基因的分離、提純與鑒定B、分、切、接、轉(zhuǎn)、篩C、將重組體導(dǎo)人宿主細(xì)胞，篩出含目的基因的陽性株D、將載體和目的基因接合成重組體22.根據(jù)某一感興趣蛋白質(zhì)的序列、抗原性以及配基結(jié)合性質(zhì)制備探針，可從DNA文庫中篩選到相應(yīng)的基因。23.II型限制酶識別位點(diǎn)一般長度為______個核苷酸對。24._________是自然界存在的植物基因工程的天然載體。25.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_________切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段。26.基因克隆中低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體是不起作用的。27.DNA片段之間的連接方式有哪些？28.基因工程最知名的也是飽受爭議的應(yīng)用之一是_____________。29.一種間歇的培養(yǎng)方式，除了進(jìn)氣、排氣和補(bǔ)加酸堿調(diào)節(jié)pH外，在培養(yǎng)過程中與外界沒有其他的物料交換。這種培養(yǎng)方式是A、補(bǔ)料分批培養(yǎng)B、連續(xù)培養(yǎng)C、透析培養(yǎng)D、分批培養(yǎng)30._________是指以精子為載體，通過動物受精過程將外源基因?qū)肱咛?，產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動物。第1卷參考答案一.參考題庫1.正確答案:D2.正確答案:D3.正確答案:錯誤4.正確答案:白5.正確答案:B6.正確答案:中鹽7.正確答案:鹽離子濃度不對，溫度不對，甘油濃度過高。8.正確答案:D9.正確答案:C10.正確答案:(1)載體易自身環(huán)化；(2)若是用同一種限制性內(nèi)切核酸酶產(chǎn)生的黏性末端連接又不易定向克隆；(3)難插入特定的基因；(4)再者就是大片段DNA的重組率較低，即使用堿性磷酸酶處理了載體，防止了載體的自身環(huán)化，載體也有成環(huán)的傾向；(5)用這種方法產(chǎn)生的重組體往往含有不止一個外源片段或不止一個載體連接起來的串聯(lián)重組體，增加篩選工作的困難。11.正確答案:農(nóng)桿菌介導(dǎo)12.正確答案:mRNA檢測13.正確答案:轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)14.正確答案:B15.正確答案:C16.正確答案:A17.正確答案:A18.正確答案:C19.正確答案:A20.正確答案:D21.正確答案:B22.正確答案:正確23.正確答案:2018/4/624.正確答案:Ti質(zhì)粒25.正確答案:枯草桿菌蛋白酶26.正確答案:錯誤27.正確答案:具黏性末端的DNA片段之間的連接、具平末端DNA片段之間的連接、DNA片段末端修飾后進(jìn)行連接、DNA片段加連桿（linker）后的連接。28.正確答案:轉(zhuǎn)基因食品29.正確答案:D30.正確答案:精子載體法第2卷一.參考題庫(共30題)1.常規(guī)PCR反應(yīng)的循環(huán)次數(shù)一般為多少個周期A、40B、20C、30D、502.列舉質(zhì)粒載體必須具備的4個基本特性。3.不是克隆質(zhì)粒的是A、pSC101質(zhì)粒B、pBR322質(zhì)粒C、M13噬菌體顆粒D、pUCl84.什么是熒光定量PCR?5.何謂cDNA文庫？6.用EcoRI和HindⅢ分別切割同一來源的染色體DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到A基因，但在后者的克隆中未篩選到A基因，請說明原因。7.EcoRI切割載體DNA和供體DNA所產(chǎn)生的片段在用于重組連接前要A、用CIP處理載體DNA防止自身環(huán)化B、進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測C、上述說法都正確D、用65℃處理5～10min使限制性內(nèi)切核酸酶失活8._________讓外源DNA沿著花粉管經(jīng)過珠心進(jìn)入尚未形成正常細(xì)胞壁的卵子、合子或早期胚胎細(xì)胞中，從而實(shí)現(xiàn)基因的轉(zhuǎn)移。。9.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端轉(zhuǎn)移酶活性10.Southern雜交時，探針與膜上的（）雜交A、DNAB、RNAC、蛋白質(zhì)D、染色體11.連接反應(yīng)中，哪一種組分的作用是激活連接酶反應(yīng)A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT12.下列用于Southern印跡轉(zhuǎn)移的是：A、首先用限制性內(nèi)切酶處理DNAB、酶切片段經(jīng)瓊脂糖電泳C、將DNA進(jìn)行堿變性D、將DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜E、硝酸纖維素膜經(jīng)80℃真空干燥2-3小時13.PCR循環(huán)時按什么方式擴(kuò)增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+114.能防止載體自連的酶是A、T4噬菌體DNA連接酶B、逆轉(zhuǎn)錄酶C、堿性磷酸酶D、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶15.首例細(xì)胞基因治療方案是對哪一種病的基因治療A、血友病BB、艾滋病C、囊性纖維化D、重癥聯(lián)合免疫缺陷16.PCR技術(shù)是_________的縮寫。17.限制性核酸內(nèi)切酶和甲基化酶一起稱為限制-修飾系統(tǒng)。18.常用載體質(zhì)粒的本質(zhì)是_________。19.______________也叫做依賴于RNA的DNA聚合酶或RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶。20.任何一種質(zhì)粒都可以用氯霉素擴(kuò)增的方法，增加它的拷貝數(shù)。21.最早建立成功的轉(zhuǎn)基因哺乳動物是_________。22.試述免疫共沉淀技術(shù)的原理？23.AIDS是由哪種病毒引起的全身性傳染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV24.接合質(zhì)粒25.最早被研制成功的兩個基因工程激素藥物是______________和生長激素。26.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？27.cDNA文庫的特點(diǎn)是什么？28.關(guān)于cDNA的最正確的說法是A、同mRNA互補(bǔ)的單鏈DNAB、同mRNA互補(bǔ)的雙鏈DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈DNAD、以上都正確

29.構(gòu)建重組子時中不需要A、基因載體B、DNA連接酶C、核酶D、限制酶30.反向PCR是以mRNA為模板進(jìn)行的一類特殊PCR。第2卷參考答案一.參考題庫1.正確答案:B2.正確答案:（1）獨(dú)立復(fù)制；（2）有選擇標(biāo)記；（3）有獨(dú)特的酶切位點(diǎn)；（4）能轉(zhuǎn)化但不擴(kuò)散。3.正確答案:C4.正確答案:是一種利用外參或者內(nèi)參為標(biāo)準(zhǔn)，在PCR體系中加入熒光信號強(qiáng)度與DNA數(shù)目相關(guān)的熒光物質(zhì)，并通過對PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實(shí)時變化檢測來實(shí)現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析工作。5.正確答案:指某生物某一發(fā)育時期所轉(zhuǎn)錄的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。6.正確答案:原因是：HindⅢ的切點(diǎn)在A基因內(nèi)。7.正確答案:A8.正確答案:花粉管導(dǎo)入法9.正確答案:B,D10.正確答案:A11.正確答案:B12.正確答案:A,B,C,D,E13.正確答案:B14.正確答案:C15.正確答案:D16.正確答案:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)17.正確答案:正確18.正確答案:DNA分子19.正確答案:逆轉(zhuǎn)錄酶20.正確答案:錯誤21.正確答案:轉(zhuǎn)基因小鼠22.正確答案:以抗體和抗原之間的相互作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。23.正確答案:C24.正確答案:指含有nic/born基因，能自我轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒。25.正確答案:胰島素26.正確答案:大腸桿菌DNA聚合酶；Klenow大片段酶；T7DNA聚合酶；T4DNA聚合酶；修飾過的T7DNA聚合酶；逆轉(zhuǎn)錄酶；TaqDNA聚合酶。27.正確答案:基因特異性、器官特異性、代謝或發(fā)育特異性、不均勻性、各cDNA均可獲得表達(dá)。28.正確答案:C29.正確答案:A30.正確答案:錯誤第3卷一.參考題庫(共30題)1.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。2.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動子B、色氨酸啟動子C、乳糖和色氨酸復(fù)合啟動子D、乳糖啟動子3.下面幾種序列中你認(rèn)為哪一個(哪些)最有可能是Ⅱ類酶的識別序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？為什么？4.用載體制作轉(zhuǎn)基因植物時，最常用的載體是下列哪種質(zhì)粒。A、pBR322質(zhì)粒B、pSCl01質(zhì)粒C、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒D、pUC質(zhì)粒5.限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程中有何作用？6.在細(xì)菌中增殖來自某一生物的染色體DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合體叫做A、基因文庫B、基因庫C、基因組文庫D、cDNA文庫7.隱性質(zhì)粒8.用于基因治療的基因不需要滿足A、外源基因能在靶細(xì)胞中長期穩(wěn)定存留B、導(dǎo)入基因的方法及載體對宿主細(xì)胞安全無害C、基因需要大量表達(dá)才能改善癥狀D、外源基因可有效導(dǎo)入靶細(xì)胞9.克隆即無性繁殖的意思，通過克隆可以在無性的條件下獲得遺傳結(jié)構(gòu)和表型完全相同的一群個體。10.寫出分子克隆的載體應(yīng)具備的條件？11.基因工程又叫A、分子克隆B、基因克隆C、遺傳育種D、遺傳工程E、重組DNA技術(shù)12.根據(jù)外源DNA片段的來源不同，可將基因文庫分為：基因組DNA文庫和cDNA文庫。13.常規(guī)PCR反應(yīng)程序中，高溫變性一般設(shè)置多高的溫度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃14.PCR反應(yīng)中的復(fù)性溫度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃15.基因工程誕生的三大理論基礎(chǔ)是什么？16.有關(guān)基因工程的敘述正確的是A、限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時才用B、重組質(zhì)粒的形成在細(xì)胞內(nèi)完成C、質(zhì)粒都可以作為運(yùn)載體D、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料17.cDNA合成中所涉及的三種工具酶：IT4-DNA連接酶IIKlenow聚合酶IIIS1核酸酶IVBal31核酸酶V逆轉(zhuǎn)錄酶A、I+II+IIIB、II+III+IVC、II+III+VD、III+IV+V18.對DNA變性描述正確的是：A、包括DNA雙螺旋的解鏈B、可以由低溫產(chǎn)生C、是可逆的D、是磷酸二酯鍵的斷裂E、包括氫鍵的斷裂19.誘導(dǎo)型啟動子20.________________包括基因組文庫和cDNA文庫。21.基因工程是_________年代發(fā)展起來的遺傳學(xué)的一個分支學(xué)科。22.關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)，下列描述中不大恰當(dāng)?shù)氖茿、這一系統(tǒng)中的核酸酶都是Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶B、這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進(jìn)行修飾C、不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)D、由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成23.一般來說，完全切割質(zhì)?；虿《綝NA，要比切割線狀DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。24.按質(zhì)粒復(fù)制的調(diào)控及其拷貝數(shù)可分兩類：嚴(yán)緊控制型質(zhì)粒和_____________。25.說明SangerDNA測序法的原理。26.PCR反應(yīng)中常用的酶是______。27.在長模板鏈的指導(dǎo)下，引物延伸合成長的DNA互補(bǔ)鏈時應(yīng)選用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大腸桿菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶28.基因重組的載體必須具備下列哪些特點(diǎn)：A、本身是一個復(fù)制單位，能在受體細(xì)胞中復(fù)制B、插入外源DNA后也不影響自身的復(fù)制C、易于進(jìn)入受體細(xì)胞D、通過自身的酶系在受體細(xì)胞中復(fù)制E、通常帶有抗性基因，易于篩選和鑒定29.要對一雙鏈的DNA分子進(jìn)行3’端標(biāo)記，可用A、DNA聚合酶IB、T4DNA聚合酶C、T7DNA聚合酶D、Klenow酶30.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來源于_______。第3卷參考答案一.參考題庫1.正確答案:簡并引物PCR2.正確答案:B3.正確答案:GATATC；AAATTT；因?yàn)樗鼈兪腔匚男蛄小?.正確答案:C5.正確答案:扮演了如裁縫的“剪刀”的角色，它使研究人員可以按照預(yù)期目標(biāo)將核酸分子切割開來，獲取所需要的核酸序列片段。6.正確答