安全性評價及生殖毒性

新藥的非臨床安全性評價

藥物的生殖與發(fā)育毒性藥物毒理學第四講

7/10/202317/10/20232第一節(jié)

新藥臨床前藥理毒理研究的主要內容

7/10/202331、藥物注冊分類（1）未在國內外上市銷售的藥品；（2）改變給藥途徑尚未在國內外上市銷售的藥品；（3）已在國外市場上銷售但未在國內上市銷售的藥品；（4）改變已上市銷售鹽類藥物的酸根、堿基，但不改變藥理作用的的原料藥或制劑。（5）改變國內已上市銷售藥品的劑型，但不改變給藥途徑的制劑；（6）已有國家藥品標準的原料藥或制劑。7/10/20234新藥的安全性及有效性藥理學研究主要藥效學一般藥理學藥代動力學毒理學研究7/10/20235評價目的確定潛在的毒性靶器官和毒性反應出現的時間、性質、程度及其可逆性確定臨床監(jiān)測的安全性參數推算人體使用的安全起始劑量以及隨后的劑量遞增方案7/10/20237具體問題具體分析——品種特點最大限度暴露毒性（如果臨床上存在某些方面的安全性擔憂時則應進行該方面的非臨床安全性研究）執(zhí)行GLP毒性暴露結果向臨床過渡，利弊權衡——重在“評價”藥理毒理研究的整體性、綜合性、階段性說明書：“嚴進”、“寬進”一般原則7/10/20238（四）藥物毒理學研究在新藥臨床試驗階段的任務第一期臨床研究第二期臨床研究第三期臨床研究不良反應監(jiān)測探索安全的人用劑量安全性{大范圍的社會考察提高療效，降低不良反應療效（有效性）不良反應（安全性）7/10/20239

三、藥理毒理研究資料

16、藥理毒理研究資料綜述；

17、主要藥效學試驗資料及文獻資料；

18、一般藥理研究的試驗資料及文獻資料；

19、急性毒性試驗資料及文獻資料；

20、長期毒性試驗資料及文獻資料；

21、過敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮膚、

粘膜、肌肉等）刺激性等主要與局部、全身給藥相關的特殊安全性

試驗研究和文獻資料；

22、復方制劑中多種成份藥效、毒性、藥代動力學相互影響的試驗

資料及文獻資料；

23、致突變試驗資料及文獻資料；

24、生殖毒性試驗資料及文獻資料；

25、致癌試驗資料及文獻資料；

26、依賴性試驗資料及文獻資料；

27、動物藥代動力學試驗資料及文獻資料；

四、臨床研究資料

28、國內外相關的臨床研究資料綜述；

29、臨床研究計劃及研究方案；

30、臨床研究者手冊；

31、知情同意書樣稿、倫理委員會批準件；

32、臨床研究報告；一、綜述資料

1、藥品名稱；

2、證明性文件；

3、立題目的與依據；

4、對主要研究結果的總結及評價；

5、藥品說明書樣稿、起草說明及最新參考文獻；

6、包裝、標簽設計樣稿；

二、藥學研究資料

7、藥學研究資料綜述；

8、原料藥生產工藝的研究資料及文獻資料；制劑處方及工藝的研究資

料及文獻資料；

9、確證化學結構或者組份的試驗資料及文獻資料；

10、質量研究工作的試驗資料及文獻資料；

11、藥品標準草案及起草說明，并提供標準品或者對照品；

12、樣品的檢驗報告書；

13、輔料的來源及質量標準；

14、藥物穩(wěn)定性研究的試驗資料及文獻資料；

15、直接接觸藥品的包裝材料和容器的選擇依據及質量標準；

新藥申報材料匯總7/10/202310一次或24小時內多次給予

動物給藥途徑陰性對照組判斷安全范圍急性毒性研究7/10/202311急性毒性研究最大無反應劑量未見反應劑量（NOEL）：NoObservedEffectLevel未見不良反應劑量（NOAEL）：NoObservedAdverseEffectLevel最小毒性反應劑量最大耐受量（MTD）：MaximalToleranceDose最小致死劑量（MLD）：MinimalLethalDose半數致死量（LD50）：MedianLethalDose7/10/202312相關動物給藥途徑劑量毒代動力學——藥代研究在毒理學研究的延伸階段性——以不同給藥期限的長期毒性研究來分別支持藥物進入Ⅰ期、Ⅱ期或Ⅲ期臨床試驗（生產）

長期毒性研究7/10/202313支持臨床療程超過2周的藥物II期和III期臨床試驗所需動物長期毒性研究的最短給藥期限7/10/202314檢測指標

常規(guī)指標（一般癥狀、體重、攝食量）血液學指標

：10項血液生化學指標：12項（非嚙齒類16項）尿液分析指標：9項（非嚙齒類）體溫、血壓、呼吸、心電圖及眼科檢查（非嚙齒類）組織病理學檢查臟器系數：12項組織病理學檢查：30項（非嚙齒類33項）恢復期7/10/202315局部用藥特殊毒性研究刺激性給藥部位的可逆性炎癥改變過敏性（變態(tài)反應或超敏反應）特異性免疫反應，表現為組織損傷或生理功能紊亂，異?；虿±硇缘蘑裥?，快發(fā)或速發(fā)過敏型，IgE介導Ⅱ型，細胞毒型或溶細胞型，IgG介導Ⅲ型，免疫復合物型或血管炎型，IgG、IgM介導Ⅳ型，遲發(fā)型或結核菌素型，T淋巴細胞介導光敏性光毒性（光刺激性）光過敏性（光變態(tài)反應）——Ⅳ型變態(tài)反應溶血性溶血及紅細胞凝聚免疫性溶血——Ⅱ型和

Ⅲ型過敏反應非免疫性溶血7/10/202316刺激性制劑陰性對照皮膚刺激性注射給藥部位刺激性眼刺激性其他途徑給藥部位刺激性7/10/202317過敏性注射給藥全身主動過敏試驗（ASA）皮膚被動過敏試驗（PCA）經皮給藥豚鼠最大化試驗（GPMT）Buehler試驗（BT）吸入給藥豚鼠吸入誘導刺激試驗皮膚光毒性試驗皮膚光過敏性試驗陽性和陰性對照7/10/202318溶血性體外試管法（肉眼觀察）分光光度法陰性對照陽性對照（視情況）7/10/202319免疫毒性研究評價潛在的免疫原性檢測血清抗體滴度免疫復合物形成間接引起生物活性分子釋放

病理毒性（結合在長毒中觀察）淋巴器官稱重血液學，血細胞分類計數免疫器官組織病理學檢查7/10/202320免疫毒性研究對免疫功能的影響對脾抗體形成細胞（PFC）的影響（體液免疫功能HMI）——溶血空斑試驗

對小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應的影響（DTH，細胞免疫功能CMI）——放免/DNFB二硝基氟苯

淋巴細胞增殖試驗：有絲分裂原（PHA，ConA，LPS，PWM）刺激成淋巴細胞化作用

NK細胞活性測定：乳酸脫氫酶（LDH）釋放法

過敏反應-人源蛋白豚鼠價值很小，尚無可靠手段7/10/202321鼠傷寒沙門氏菌營養(yǎng)缺陷型回復突變試驗（Ames試驗）陰性及陽性對照S9代謝激活

中國倉鼠肺成纖維細胞（CHL）染色體畸變試驗空白、溶劑、陽性對照S9代謝激活嚙齒動物（小鼠）微核試驗陰性及陽性對照遺傳毒性（致突變）研究7/10/202322Ⅰ段一般生殖毒性試驗雌性受孕、分娩、活胎與死胎、外觀、骨骼與內臟等雄性生育能力Ⅱ段致畸敏感期毒性試驗胚胎毒性和潛在的致畸性Ⅲ段圍產期毒性試驗子代動物生殖毒性研究7/10/202323致癌性研究

創(chuàng)新藥

短期致癌試驗哺乳動物培養(yǎng)細胞惡性轉化試驗小鼠腫瘤誘發(fā)試驗

長期致癌試驗7/10/202324具有精神神經作用的藥物需要提供

身體依賴性試鎮(zhèn)痛藥、鎮(zhèn)靜催眠藥催促試驗誘導試驗自然戒斷試驗或替代試驗

精神依賴性試驗自身給藥藥物依賴性研究7/10/202325科學的，“case-by-case”的設計思路通過藥理作用來選擇相關動物可采用一種動物免疫原性非常重要遺傳毒性通常不要求代謝研究通常不要求兩年的致癌性試驗通常不要求沒有仿制品？大多數品種的研究內容相似通過代謝來選擇相關動物要求采用嚙齒和非嚙齒類動物進行試驗

通常沒有免疫原性要求進行遺傳毒性研究

要求進行代謝研究

要求進行兩年的致癌性試驗有仿制品生物制品小分子化合物非臨床安全性評價的主要不同7/10/202326第二節(jié)藥物生殖和發(fā)育毒性作用7/10/2023277/10/202328生殖過程

生殖細胞的發(fā)生形成交配受精合子形成著床胚胎形成及發(fā)育分娩哺乳生殖毒性學發(fā)育毒性學7/10/202329一、生殖毒性和發(fā)育毒性常用的術語1、胚胎毒性指藥物對胚胎的選擇毒性作用。2、胚胎毒物

具有胚胎毒性的物質。3、致畸性指胚胎在器官發(fā)育期接觸藥物后，能造成永久性結構或功能畸形。7/10/2023304、致畸劑

具有致畸性并使出生缺陷發(fā)生率明顯增加的物質。5、母體毒性

指對懷孕動物的毒性效應。6、致畸指數

指藥物等對母體的半數致死量與最小致畸量之比。7/10/202331二、男性生殖毒性學

男性生殖毒性學

精子的產生精子輸送神經系統(tǒng)內分泌系統(tǒng)7/10/202332一）精子發(fā)生易感性精子的產生過程7/10/202333特定靶位—睪丸內環(huán)境

與精子快速生成過程有關的細胞分裂和代謝活性，對某些類型的損傷特別敏感。藥物特別容易損害DNA或影響快速生長組織需要的細胞蛋白功能或細胞呼吸。

DNA損害蛋白質損傷

7/10/202334二）下丘腦-垂體-性腺軸激素調節(jié)下丘腦-垂體-性腺軸

雄激素黃體生成素（LH）促性腺激素釋放激素（GnRH）7/10/202335三、女性生殖毒理學女性生殖毒理學女性生殖系統(tǒng)的功能

7/10/202336一）卵細胞毒性

阻滯原始卵母細胞，影響進一步的成熟和排卵。如抗癌藥--白消安。二）卵巢體細胞和生殖道毒性卵巢體萎縮—環(huán)氧樹脂、呋喃妥因輸卵管和子宮萎縮—鎘7/10/202337三）生殖功能激素調節(jié)和相關毒性下丘腦-垂體-性腺軸促性腺激素釋放激（GnRH）

黃體生成素LH

促卵泡素FSH

雌激素孕激素7/10/202338四、發(fā)育毒理學發(fā)育毒理學關注的是受精后胚胎發(fā)育的整個過程。

7/10/202339發(fā)育的三個過程

早胚期后胚期胎兒期一）自發(fā)流產和胚胎丟失二）胚胎毒性反應三）胎兒發(fā)育損害7/10/202340五、毒性試驗一）一般生殖毒性試驗藥物對生殖過程第一階段的影響，主要反映妊娠前及妊娠初期的情況。實驗方法：1、動物2、劑量與給藥途徑3、給藥時間4、對照組5、觀察與報告7/10/202341二）致畸胎試驗

生殖過程第二階段，確定藥物是否具有胚胎毒性或致畸性。

實驗方法：1、動物2、劑量與給藥途徑3、給藥時間4、對照組5、觀察與檢查6、報告7、判定

7/10/202342三）圍生期毒性試驗

生殖過程第三階段，反映藥物對胚胎發(fā)育后期、母代分娩過程、哺乳期的影響。實驗方法：1、動物2、劑量與給藥途徑3、給藥時間4、對照組5、觀察與報告7/10/202343小結