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精品實(shí)用文檔.精品尿生成的影響因素、藥物的利尿作用姓名:學(xué)號(hào):班級(jí):實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)膀胱插管技術(shù)測定尿量的方法。觀察影響尿生成的各種因素對尿量的影響,并分析其作用機(jī)制,加深對尿生成過程的理解。實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:家兔〔體重以上〕器材:哺乳類動(dòng)物手術(shù)器械,兔手術(shù)臺(tái),膀胱插管,注射器,頭皮針。藥品:生理鹽水,20%葡萄糖溶液,呋塞米,1:10000去甲腎上腺素溶液,垂體后葉素,20%氨基甲酸乙酯溶液,班氏試劑。實(shí)驗(yàn)方法和步驟麻醉:將家兔稱重后,20%氨基甲酸乙酯溶液按5ml/kg劑量自耳緣靜脈注射麻醉。固定:家兔仰臥位固定。備皮:剪取家兔頸部,下腹部被毛。手術(shù)頸部手術(shù)剪去頸前部兔毛,正中切開皮膚5~6厘米,用止血鉗縱向別離軟組織及頸部肌肉,暴露氣管及與氣管平行的右血管神經(jīng)鞘,細(xì)心別離出右側(cè)鞘膜內(nèi)的迷走神經(jīng),在神經(jīng)下穿線備用。腹部手術(shù)從恥骨聯(lián)合向上沿中線作長約4厘米的切口,沿腹白線翻開腹腔,將膀胱輕拉至腹壁外,先識(shí)別清楚膀胱和輸尿管的解剖部位,用止血鉗提起膀胱前壁(靠近頂端局部),選擇血管較少處,切一縱行小口,插入插管后膀胱即隨著尿液的流出而縮小。如膀胱壁較松馳而膀胱容積仍較大時(shí),可用粗線將膀胱扎掉一局部,使膀胱內(nèi)的貯尿量減至最少。用線結(jié)扎膀胱頸部以阻斷膀胱同尿道的通路。觀察工程記錄正常尿量〔滴/min〕生理鹽水對尿量的影響自耳緣靜脈快速注射38℃生理鹽水20ml,觀察尿量的變化。精品實(shí)用文檔.精品葡萄糖對尿量的影響先收集尿液2滴進(jìn)展尿糖定性試驗(yàn)作為對照,然后自耳緣靜脈快速注射20%葡萄糖溶液5ml,觀察尿量的變化。在尿量變化增多時(shí),再去尿液2滴作尿糖定性試驗(yàn)。尿糖定性試驗(yàn)方法:試管內(nèi)加1ml班氏試劑,參加數(shù)滴尿標(biāo)本,在酒精燈上加熱煮沸。冷卻后觀察溶液和沉淀物的顏色改變,藍(lán)色為陰性〔-〕,假設(shè)顏色變?yōu)榫G色〔+〕、黃綠〔++〕、土黃色〔+++〕、或磚紅色〔++++〕,那么為陽性且其含糖量依次升高。去甲腎上腺素對尿量的影響ml,觀察尿量的變化。迷走神經(jīng)興奮對尿量的影響用保護(hù)電極以中等強(qiáng)度和頻率的連續(xù)脈沖〔定時(shí)刺激,持續(xù)時(shí)間20s,波寬5ms,強(qiáng)度2.0V,頻率25Hz〕刺激右迷走神經(jīng),觀察尿量的變化。呋塞米對尿量的影響自耳緣靜脈注射呋塞米1U〔1ml〕,觀察尿量的變化??估蚣に亍睞DH〕對尿量的影響自耳緣靜脈注射垂體后葉素〔含ADH〕1U〔1ml〕,觀察尿量的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)工程對照組〔實(shí)驗(yàn)前〕實(shí)驗(yàn)組1min2min3min4min5min38℃生理鹽水20ml01136420%葡萄糖溶液5ml132212ml212122呋塞米1U1514263629垂體后葉素1U22297001表1.尿生成的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)討論尿生成的生理調(diào)節(jié)腎內(nèi)自身調(diào)節(jié)精品實(shí)用文檔.精品小管液中溶質(zhì)的濃度滲透性利尿:通過提高小管液中溶質(zhì)濃度而引起尿量增多的現(xiàn)象。圖1.小管液濃度調(diào)節(jié)球管平衡不管腎小管于濾過率或增或減,近端小管的重吸收率始終占腎小管濾過率的65~70%左右。機(jī)制:近端小管的定比重吸收。如圖2,3所示。精品實(shí)用文檔.精品反之,腎小球?yàn)V過率減小,近端小管對Na+和水的重吸收也相應(yīng)地降低。生理意義:使尿中排出的溶質(zhì)和水不致因腎小管濾過率的增減而出現(xiàn)大幅度變動(dòng)。神經(jīng)體液調(diào)節(jié)腎交感神經(jīng)的作用圖4.腎交感神經(jīng)的作用機(jī)制血管升壓素〔VP;又稱抗利尿激素,ADH〕下丘腦視上核、室旁核合成,神經(jīng)垂體儲(chǔ)存貯存和釋放。作用〔對尿生成的主要影響〕:遠(yuǎn)曲小管、集合管對水的通透性↑→精品實(shí)用文檔.精品水的重吸收↑→尿量↓〔圖5〕圖5.VP的作用作用機(jī)制:VP與遠(yuǎn)曲小管和集合管上皮細(xì)胞管周膜上的V2受體結(jié)合→通過Gs激活膜內(nèi)的AC→上皮細(xì)胞中cAMP的生成↑→激活蛋白激酶A→蛋白質(zhì)磷酸化→位于管腔膜附近的含有水孔蛋白AQP-2的小泡鑲嵌在管腔膜上→管腔膜上的水通道數(shù)量↑→對誰的通透性↑→水通過管腔膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)↑→經(jīng)基側(cè)膜的水孔蛋白AQP-3和AQP-4進(jìn)入細(xì)胞間隙而被重吸收↑〔圖6〕精品實(shí)用文檔.精品圖6.VP的作用機(jī)制分泌的調(diào)節(jié):血漿晶體滲透壓〔最敏感〕循環(huán)血量腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)〔RAAS〕圖7.醛固酮分泌調(diào)節(jié)示意圖+:興奮-:抑制AngII對尿生成的影響刺激醛固酮的合成和分泌→保Na+排K+近段小管對NaCl重吸收↑→使尿中排除的NaCl↓血管升壓素釋放↑→遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的重吸收↑→尿量↓入球小動(dòng)脈強(qiáng)烈收縮〔高濃度的AngII〕→腎小球?yàn)V過率↓醛固酮對尿生成的影響合成部位:腎上腺皮質(zhì)球狀帶生理作用:保Na+排K+促進(jìn)遠(yuǎn)曲小管和集合管的主細(xì)胞對Na+的重吸收,并促進(jìn)K+的分泌;同時(shí),CI-、水的重吸收也增加,使細(xì)胞外液量增多?!矆D8〕精品實(shí)用文檔.精品圖8.醛固酮的生理作用作用機(jī)制:醛固酮進(jìn)入遠(yuǎn)曲小管和集合管的上皮細(xì)胞內(nèi)→與胞漿受體結(jié)合→形成激素-受體復(fù)合物→作用于核中的DNA特異性位點(diǎn)→調(diào)節(jié)特異性mRNA轉(zhuǎn)錄→合成醛固酮誘導(dǎo)蛋白→Na+重吸收↑→造成小管腔內(nèi)的負(fù)電位→Cl-和水的重吸收↑→細(xì)胞外液量↑〔圖9〕圖9.醛固酮的作用機(jī)制醛固酮的分泌調(diào)節(jié):腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng),血漿內(nèi)[K+]↑、[Na+]↓↓心房鈉尿肽〔ANP〕精品實(shí)用文檔.精品心房壁受牽拉可刺激心房肌細(xì)胞釋放ANP。抑制集合管對NaCl的重吸收心房鈉尿肽與集合管上皮細(xì)胞基側(cè)膜上的受體結(jié)合→激活了鳥苷酸環(huán)化酶→細(xì)胞內(nèi)cGMP含量↑→管腔膜上的Na+通道關(guān)閉→Na+重吸收↓,排除↑〔圖10〕圖10.心房鈉尿肽的作用機(jī)制入球小動(dòng)脈舒張>出球小動(dòng)脈舒張→腎血漿流量和GFR↑→尿量↑抑制腎素、醛固酮、VP分泌→水、Na+排出↑【1】快速注射38℃生理鹽水20ml靜脈快速注射大量生理鹽水后,血漿蛋白被稀釋,使血漿膠體滲透壓降低,腎小球有效濾過壓增加;另一方面腎血漿流量增加,血漿膠體滲透壓升高速度減慢,到達(dá)濾過平衡時(shí)間推遲,于是腎小球?yàn)V過率增加,尿量增加,且反響時(shí)間相對較長。注射20%葡萄糖溶液5ml靜脈注射葡萄糖,使家兔血糖濃度升高,提高了腎小管液滲透壓,阻礙水的重吸收,于是尿量增加。注射ml去甲腎上腺素能使腎血管收縮,腎血流量減少,從而使腎小球毛細(xì)血管血壓降低,有效濾過壓降低,腎小球?yàn)V過率減小,尿的生成量減少,尿量減少。精品實(shí)用文檔.精品注射呋塞米1U因髓袢升支粗段對Na+和Cl-的主動(dòng)重吸收是外髓部滲透梯度形成的動(dòng)力,所以,該段NaCl的重吸收直接影響尿的濃縮和稀釋。呋塞米等利尿劑能阻抑髓袢升支粗段上皮細(xì)胞管腔膜的載體轉(zhuǎn)運(yùn)功能,使其對Na+、Cl-的重吸收受到抑制,影響腎髓質(zhì)滲透梯度的形成,從而干擾尿的濃縮機(jī)制,導(dǎo)致利尿?!?】注射垂體后葉素1U垂體后葉素的主要作用因素為抗利尿激素,抗利尿激素的主要作用是提高遠(yuǎn)曲小管和集合管上皮細(xì)胞對水的通透性,從而增加對水的重吸收,使尿量濃縮,從而使尿量減少?!?】實(shí)驗(yàn)反思本次實(shí)驗(yàn)中,家兔膀胱由于實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備食入較多汗水物質(zhì)致使膀胱過度充盈,在腹腔手術(shù)時(shí),膀胱緊貼腹直肌深筋膜后壁,手術(shù)小許失誤在切開過程中誤損膀胱,有漏尿發(fā)生,在找到漏尿部位后,扎閉減小以減小對手術(shù)影響。在膀胱插管后,注射少許呋塞米有助于膀胱恢復(fù)充盈,并充盈膀胱插管,待尿液流速恢復(fù)正常后即可開場實(shí)驗(yàn)。在每次推送完藥劑后,應(yīng)準(zhǔn)備少許生理鹽水
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