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文檔簡介
應(yīng)用分類1、膜表面抗原和胞漿內(nèi)蛋白分析2、DNA含量及細胞周期分析3、定量分析4、細胞功能分析5、凋亡研究6、細胞間相互左右7、細胞分選1.檢測淋巴細胞亞群,監(jiān)測細胞免疫狀態(tài)2.白血病/淋巴瘤免疫分型3.HLA組織配型及HLA與某些疾病的關(guān)系4.干祖細胞的定量及成分分析.5.其它:粘附分子;TCR多態(tài)性檢測;腫瘤癌基因及抑癌基因蛋白產(chǎn)物的檢測;細胞內(nèi)酶;耐藥蛋白的分析等等。
臨床應(yīng)用疾病診斷:為疾病診斷提供直接的或支持診斷的依據(jù)免疫調(diào)節(jié):細胞因子/受體的相互作用共刺激分子受體/配體的相互作用
發(fā)病機理:腫瘤的發(fā)病與機體的免疫力低下、以及信號傳遞障礙有關(guān)藥物/疫苗效果的評價:腫瘤生物治療的時機選擇、以及效果的監(jiān)測免疫狀態(tài)評價:移植、放化療等.細胞周期分析:在細胞周期(G0,G1,S,G2,M)的各個時期,DNA的含量隨各時相呈現(xiàn)出周期性的變化。通過核酸染料標記DNA,并由流式細胞儀進行分析,可以得到細胞各個時期的分布狀態(tài),計算出G0/G1%,S%及G2/M%。了解細胞的周期分布及細胞的增殖活性。也可利用細胞周期蛋白(CYCLIN)、Ki67、核增殖抗原(PCNA)等,對細胞周期進行精確的分期:G0、G1、S、G2、M.DNA含量及細胞周期分析G2MG0G1s0
200
400
600
8001000G0G1sG2MDNAAnalysisDNAcontentCount2N4NNormalCellCycle1.腫瘤的早期診斷。2.腫瘤的良惡性判斷。3.觀察細胞的增殖狀態(tài)及周期分布。4.療效監(jiān)測細胞功能分析
1.吞噬功能試驗
2.氧爆發(fā)試驗3.根據(jù)T淋巴細胞分泌細胞因子的不同將CD4+或CD8+分為介導(dǎo)細胞免疫的I型細胞和介導(dǎo)體液免疫的II型細胞.4.藥物泵的功能檢測
5.NK細胞的腫瘤殺傷活性檢測6.血小板的粘附,聚集功能檢測樹突狀細胞分析(DendriticCells,DC)DC是主要的抗原遞呈細胞,同時又是重要的先天免疫細胞,還是具有免疫調(diào)控功能的一個細胞群,沒有發(fā)現(xiàn)特異性的抗原標記DC研究的主要內(nèi)容包括直接分析計數(shù)、體外誘導(dǎo)檢測,一般分為兩群-PDC,MDC當前DC檢測的方法:1)Lin-,CD11c,CD123,同時可能表達CD80,CD86,CD83,DR等2)利用BDCA1,2,3,4對外周血或其它組織DC進行分析3)CD14+16/CD85/CD33,CD14+16/CD85/CD123T細胞分析相對計數(shù)-淋巴細胞亞群數(shù)量檢查項目和意義疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK自身免疫病降低增高降低降低AIDS降低嚴重降低增高降低SARS降低降低降低降低降低慢性活動性肝炎、肝硬化降低正?;蛟龈呓档徒档湍[瘤降低降低增高降低降低CD何4細胞擠絕對昨計數(shù)對AI雙DS病人杰的診秋斷、婚療效邁和預(yù)脖后有賺重要乒的指奶導(dǎo)意撲義,墨一般雕認為CU罵TO喜FF值為故20姻0/ul.絕對簡計數(shù)司是加通入濃刺度已拿知的青標準責微球抵與標虜本一悟起測習定,尸流式展細胞鄉(xiāng)豐儀控呼制軟湯件在趨設(shè)置篩后能卸自動憑計算貞出濃恐度對任結(jié)何細禍胞群縱體都炒可以亮進行筑絕對艙計數(shù)Th請1T私h2細胞貞因子志分泌稻細胞濱測定根據(jù)塌產(chǎn)生徐的細照胞因凱子的希類型移和生垃物學府功能粉,人吃的C宴D4瘡+T昏細胞壓可以兩分為關(guān)Th側(cè)1、訂Th捕2Th昂1細鳳胞產(chǎn)減生I速L歡2、熊IL買1競2、蒼IF劣Nγ、TN腰Fβ等細儉胞因魂子,書主要筑參與灑細胞轎介導(dǎo)皂的免賀疫反橫應(yīng)、墊遲發(fā)確性過鄉(xiāng)豐敏反惰應(yīng),橡并在智清除昆病毒練等細天胞內(nèi)錘致病努因子什方面復(fù)起著吼重要償作用Th礦2細劑胞分物泌I權(quán)L廈4、表IL鞏5句、I雷L視6、摟IL公1錄0、氣IL四1侄3等定細胞劇因子覆,主圈要促幅進體峽液免故疫反臘應(yīng),融中和腫胞外辭病原曲體相應(yīng)狡地,CD猴8+伶T細胞蠶也可神以分創(chuàng)為Tc米1和Tc環(huán)2Th榆1細胞閱:介導(dǎo)委細胞臭免疫扮、細芹胞毒紅性T細胞掛的生長忽和活縱化、撥巨噬稿細胞在的活肌化、礎(chǔ)介導(dǎo)霧遲發(fā)鴿型過閣敏反剩應(yīng)。只其功法能亢下進將姥導(dǎo)致轟炎癥貸慢性蜂遷延目,器丟官特眾異性土自身撈免疫殺病,塑急性喪排異般反應(yīng)帝和接動觸性團皮炎畏等的里發(fā)病約和免歪疫病窮理損工傷。Th雹2細胞賴:介導(dǎo)呆體液液免疫枕,促銷進B細胞濃的生啊長、陪活化駐和分惱化,定是Ig嗽G1和Ig旺E類抗勞體的剩轉(zhuǎn)換違因子裳,其使功能易亢進融將導(dǎo)樸致特醫(yī)異性什過敏撥反應(yīng)造,參隆與高Ig穿E綜合染癥和扔嗜酸書性粒搬細胞唇增多坐癥。Th襯1T字h2檢測Ti悅ps一定兆要確櫻定T細胞沉是否棵已經(jīng)手活化檔,細豎胞轉(zhuǎn)者運阻濤滯是紗否成施功,示胞膜腎打孔物是否擴有效一定快要用隸胞漿遞內(nèi)同問型對滾照(費特別藍是FI匙TC標記蝕時)記,以六便分忘別部會分弱省表達參的細亂胞因歡子。TE燥TR駁AM臨ER抗原查遞呈快細胞卷(AP鉛C)攜帶濤抗原持片段凳通過麻與TC蛾R復(fù)合瘋物結(jié)衡合,溝在AP蒙C和T細胞曠的MH弱C相容鄉(xiāng)豐和其媽它共記刺激明分子句的相南互作遣用下兩激活T細胞側(cè)并產(chǎn)抬生細磨胞免握疫效裙應(yīng)。MH個C-四聚析體染押色技禮術(shù)用嫁于抗詞原特瞇異性T細胞鐘分析匯的原并理在肆于體歲外模葡仿上勸述抗岔原遞糞呈的旁過程孔來實喪現(xiàn)對鐮特異家性T細胞賀的鑒糾定,領(lǐng)通過撕流式恒細胞豆儀這棍種高剪通量綁分析斃儀器距對標度本中豬這群帥細胞蔑進行代分析四聚淡體技扮術(shù)的層優(yōu)勢屑是:噸可以綢對特勢異性矛免疫卸細胞晝進行皇定量儀;用磚流式寨細胞消儀檢摩測可抹以快商速測才定大越量細爪胞,雞可以慢同時嗚進行奮其它纖表面享染色節(jié),可嫌以直歸接用繡外周姿血測雷定而亦不需體要培誰養(yǎng);潮四聚晶體染隱色不悲會殺劍傷細既胞,假因此步染色披后的咬細胞孟可以述進行逼分選義或其謝它功思能分洗析;兔四聚從體對撓所有言的特欠異性T細胞丹都能你夠結(jié)廚合,及而不丟僅僅島是對有功框能的箱細胞焦進行晴檢測寸。不同濟廠家刑的MH重C四聚慎體產(chǎn)煮品不間太一倉樣:鋤貝克理曼庫餡爾特共公司此創(chuàng)造病性地把構(gòu)建叮和表澇達了MH五C分子α3鏈的芬區(qū)域重突變離的蛋狡白(iT撒Ag),能降飯低其疏與非摧特異歉性T細胞俯結(jié)合坦,大胡大提侄高了撓特異蓋性。似并且據(jù)將MH圣C四聚襲體直側(cè)接標籃記熒羽光,佩和常檔用的請抗原叫多肽恐負載滔后整泊體商負品化裁,也宏有單晴獨的MH寄C分子慎(iT介Ag)單獨伐出售坡,極曠大方奶便了昆研究賴者CD江4C梨D2蘋5Tr核eg調(diào)控脹性T細胞顛的主敵要功摘能是素抑制煉機體蘭免疫爹功能判,太緒強則奶免疫授耐受絕,太只弱會暴引起大自身眾免疫僻反應(yīng)調(diào)控系性T細胞正調(diào)節(jié)判抗原口遞呈動細胞框?qū)够衷纳七f呈調(diào)控危性T細胞敲的表粘型是CD盞4+嘉CD洞25睜br帶ig誦ht弓,逐漸支發(fā)現(xiàn)甚越來批越多姜的其泳它分軍子可塌能能捷夠更魚精確騎限定梯(eg堂.F福OX專-1土?)CD乖25也是集免疫圓細胞傷晚期機活化蹈的標慕記,押但表糕達的和平均彎熒光年強度期不足垂夠強非特慰異性佛的先押天免姓疫細晶胞δT細逝胞:謀占外悲周血T細胞麥的1旋0%主以下左,非注抗原竹依賴陡型免序疫細棋胞,破在傳騎染病戒、腫梳瘤病劫人外攤周血牽數(shù)量倒增加職,表攝達CD奔3量較沃普通T細胞污多NK細胞戀:占且外周樣血淋肺巴細表胞8瀉-2賄5%站,傳腔染病春和腫喇瘤病江人數(shù)課量偏粒低。NK細胞觀可以欺根據(jù)NK坦R的不撥同而饒分類膀,丙召型肝煤炎的礙發(fā)生葵和預(yù)圖后可旺能與NK細胞昂的表躬型相和關(guān)DC鼓:分布梯與淋恰巴組朗織和塌外周找血,豬為非聽成熟朝狀態(tài)揪,遇巧到相夫應(yīng)的顯抗原乞后主獵要分留泌IF羨N-探al邀ph趟a來發(fā)志揮左峽右其它憤重要檢分子才的流餅式分姥析的喜意義粘附守分子晌:物鍬種間螞高度好保守快,與浪細胞蝦間通月訊,色干細理胞HO屬MI回NG揚,腫瘤果的發(fā)咱生可訂能有披很重密要的悠關(guān)系右,如CD港11剝C/浴CD蜓18毯-C取D5蠟4與DC成熟辨和遷宵移有劃關(guān);CD普20墳9-流CD傲10女2與抗稀原遞礙呈有惹關(guān)CD啦26辱:移植序后造縮慧血干規(guī)細胞跡表達鍛可能膝不利廟于該扯細胞蔥的ho擺mi輪ng德,有證總據(jù)表籌明抑折制造咐血干籃細胞是有利壓用移改植成動功流式切細胞爹術(shù)在急移植耐中的戴應(yīng)用移植決配型晚和群盟體反圈應(yīng)性股抗體吸的檢尾測熒光稿示蹤射標記汪的移躁植細閘胞:CF亞SE是一段個確油定的拉熒光牌標記雙物,爛開發(fā)乎其它年穩(wěn)定薦的熒監(jiān)光素育應(yīng)該杯更有境幫助流式路細胞陵儀分真選為達棵到最硬高的互分選懶效率困,實恨用中鴿最好仙先用銜磁珠扛分選揭系統(tǒng)秧進行頁初步顆分選活細司胞分憐選非逗常有丟用流式基細胞鴉術(shù)在債生物呀醫(yī)學呼研究走的新腐方向細胞筋多態(tài)膏性分統(tǒng)析:吃受體冰、抗羨原折剃疊、HL轉(zhuǎn)A等,傅包括CX千CR蛙4,紡CC量R5去,D隆C-圾SI晚GN雅(與AI蹤蝶DS易感陜性有慘關(guān))霉,NK鉤R(中國蒜科大聽研究療領(lǐng)先需項目夜)信號膽傳導(dǎo)魯(實輝際主辟要為雁胞漿消內(nèi)磷襪酸化伯及去方磷酸樣化蛋匆白的軋檢測鴉)新型譜熒光巧特異雨性探拜針:肝胞內(nèi)象病原
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