液相色譜儀的維護(hù)與常見故障

關(guān)于液相色譜儀的維護(hù)與常見故障第1頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三一液相色譜儀的

日常維護(hù)第2頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三儲(chǔ)液器和流動(dòng)相

使用HPLC試劑做流動(dòng)相，用前最好過(guò)0.45μm膜,除去微粒物質(zhì);更換流動(dòng)相時(shí),應(yīng)徹底清洗儲(chǔ)液器，防止交叉污染，更換不互溶流動(dòng)相時(shí)，選擇好中間試劑。

流動(dòng)相務(wù)必要脫氣，否則出現(xiàn)氣泡，引起輸液不暢，使噪聲漂移增大，影響檢測(cè)限。

第3頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三儲(chǔ)液器和流動(dòng)相流動(dòng)相的溫度不要與室溫相差太大，否則會(huì)產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致基線漂移不穩(wěn)。

使用緩沖鹽溶液做流動(dòng)相時(shí)，最好現(xiàn)用現(xiàn)配，用前過(guò)濾，避免在陽(yáng)光下暴曬。定期清潔儲(chǔ)液器及附件，防止長(zhǎng)微生物堵塞吸濾器。第4頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三輸液泵泵壓力不要太高,要適當(dāng)調(diào)整壓力,一般壓力上限在10-20MPa，下限為0.5MPa，注意防止因泵堵塞造成壓力過(guò)高損壞柱塞桿或燒壞電機(jī)。

密封墊易損壞引起故障，每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束一定要認(rèn)真沖洗泵,注意防止堵塞,使用緩沖鹽流動(dòng)相時(shí),更要小心。第5頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三進(jìn)樣器

樣品溶液進(jìn)樣前應(yīng)該用0.45μm膜過(guò)濾，減少顆粒對(duì)進(jìn)樣閥的磨損；

轉(zhuǎn)動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動(dòng)相受阻，會(huì)使泵壓劇增，再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位置時(shí)，過(guò)高的壓力會(huì)使柱頭受損；

第6頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三進(jìn)樣器

停機(jī)前一定沖洗干凈進(jìn)樣器內(nèi)殘留的樣品或緩沖鹽，防止樣品和無(wú)機(jī)鹽沉積造成進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子面磨損或堵塞。注射器最好使用儀器自配尖頭、平頭針，不要用其它儀器的。第7頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三進(jìn)樣器

自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗液，最好使用與流動(dòng)相相同的溶液，若含鹽分，要出去鹽分；

清洗液最好也脫氣使用，清洗液也要經(jīng)常更換，避免出現(xiàn)氣泡和沉淀。第8頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三柱—防止柱性能下降

1溶劑的化學(xué)腐蝕性不能太強(qiáng)；

2避免顆粒物在柱頭沉降；

3柱壓不能太高，防止沖擊太大；

4流動(dòng)相pH值小于7時(shí)，最好用

大粒度同種填料的予柱；

第9頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三柱—防止柱性能下降

5柱頭加濾片（燒結(jié)不銹鋼),需要時(shí)加保護(hù)柱；

6經(jīng)常用不同的溶劑清洗柱；

7長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)要保存好,一定要洗去緩沖鹽,加入大于10%有機(jī)溶劑，將柱兩端擰緊,保持柱填料濕潤(rùn)。第10頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三檢測(cè)器

保持檢測(cè)器清潔非常重要，每天用后與色譜柱一起反復(fù)清洗；不定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗檢測(cè)器；沖洗時(shí)使用脫過(guò)氣的流動(dòng)相，防止氣泡滯留在池內(nèi)；檢測(cè)器光源（燈）有一定壽命，不用時(shí)可以不開燈。第11頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三記錄器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄儀:

熱敏式打印頭要注意記錄紙的質(zhì)量,開機(jī)前注意檢查走紙部件,不要卡紙.色譜工作站:

防止網(wǎng)上病毒損壞軟件.第12頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三二常見故障的排除第13頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三1、儲(chǔ)液器和流動(dòng)相1）噪聲大，出毛刺--脫氣不充分超聲脫氣,

真空脫氣,用He脫氣,

加熱回餾脫氣,(混合流動(dòng)相不宜)第14頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三1、儲(chǔ)液器2）流動(dòng)相供給不暢，泵壓力不穩(wěn)流動(dòng)相接近用完過(guò)濾器堵塞（有顆粒，長(zhǎng)霉）流速過(guò)高,阻力大,造成空化現(xiàn)象.解決的辦法是:降低流速;換大孔過(guò)濾器;加大管路內(nèi)徑;抬高儲(chǔ)液器.第15頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三1、儲(chǔ)液器和流動(dòng)相3）產(chǎn)生有規(guī)則的噪聲；基線上升，梯度洗脫出鬼峰；原因:儲(chǔ)液器或流動(dòng)相被污染；

溶劑質(zhì)量差（含雜質(zhì)多）；配制流動(dòng)相的玻璃器皿不清潔,有微生物影響；配制流動(dòng)相的操作不當(dāng)（過(guò)濾、脫氣、攪拌)。第16頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、輸液泵1）單向閥

a.球和閥座粘在一起，堵死，打不出溶劑，(特別是緩沖鹽流動(dòng)相)

用高質(zhì)量（純度高、脫過(guò)氣）的不同極性的溶劑沖洗,如水、甲醇、異丙醇、二氯甲烷；

更換新單向閥。第17頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、輸液泵b.球和閥座密封不嚴(yán)，壓力不穩(wěn)，氣泡進(jìn)入閥中，緊貼在閥體內(nèi)，使球難以返回閥座，引起倒流，壓力和流速變化大，可能有小晶體顆粒。清除氣泡的辦法：打開排液閥，大流量沖洗，用脫過(guò)氣的甲醇沖洗，一般可解決問(wèn)題。第18頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、輸液泵2）泵墊圈磨損或破碎，高壓下壓力不穩(wěn)，從泵頭往外滲漏流動(dòng)相，色譜峰的保留時(shí)間會(huì)改變。解決辦法：更換新墊圈。更換方法按維修說(shuō)明書上的方法一步步操作。第19頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、輸液泵注意：輸液泵的墊圈要和流動(dòng)相匹配協(xié)調(diào)。多數(shù)墊圈和流動(dòng)相是協(xié)調(diào)的,但有的墊圈適用于甲醇、水、乙腈，在四氫呋喃中溶解、變粘、變軟。需換墊圈時(shí),應(yīng)向廠商咨詢墊圈的規(guī)格型號(hào)。色譜工作者一般應(yīng)學(xué)會(huì)換密封墊圈。第20頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三2、輸液泵3）柱塞桿故障長(zhǎng)期使用柱塞桿被磨損，漏液；因使用不當(dāng)被折斷；柱塞桿被卡住，不能運(yùn)動(dòng)。

解決的辦法是更換新柱塞桿請(qǐng)維修工程師幫助解決，或參照專門的操作手冊(cè)自己動(dòng)手更換。第21頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)a.滲漏轉(zhuǎn)子密封墊圈松緊不合適；墊圈不配套；組裝不對(duì)。

手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)器第22頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)

b.堵塞,

樣品打不進(jìn)去。樣品管堵塞：環(huán)管用反沖法或超聲清洗排除（或換新管).

手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第23頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)c.注樣孔問(wèn)題

1)裝樣時(shí)針頭周圍滲漏：孔道堵塞，或者放空管和樣品管太細(xì)，阻力太大；針頭密封管規(guī)格不對(duì)，針頭太細(xì)。

手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第24頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)c.注樣孔問(wèn)題

2)注射孔滲漏：放空管有虹吸現(xiàn)象，轉(zhuǎn)子密封面上孔之間有磨損。為防止虹吸,放空管末端應(yīng)在放空瓶液面以上,更換磨損的轉(zhuǎn)子.

手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第25頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)c.注樣孔問(wèn)題

3)樣品滯留閥在進(jìn)樣位置停留時(shí)間不夠。要求停留時(shí)間至少應(yīng)讓流動(dòng)相流過(guò)的體積是環(huán)體積的10-20倍。

(一般是在下一針進(jìn)樣前才將閥扳到裝樣位置)

手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第26頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)3)樣品滯留殘留樣品留在樣品環(huán)中或注射器中，或從放空管中虹吸回來(lái),污染下一個(gè)樣品.此時(shí)可用5-10倍的流動(dòng)相或新樣品沖洗注射孔和注射器,若是虹吸,應(yīng)加限制管。手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第27頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)3)樣品滯留管路接頭有死體積滯留樣品，很難沖洗干凈,此時(shí)應(yīng)檢查裝配情況，確定是否需換新配件。手動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第28頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)a.樣品瓶不配套瓶小——針彎、折斷瓶大——樣品少，抽不上樣瓶破碎更換合適的樣品瓶。

自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第29頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)b.更換樣品瓶隔墊，防止污染。c.進(jìn)樣器針頭堵塞（樣品、緩沖

鹽、隔墊碎片、針頭本身)，可用溶劑清洗，金屬絲疏通，或換新針頭。

自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第30頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三3、進(jìn)樣系統(tǒng)d.樣品滯留：空白溶劑出色譜峰.

加倍清洗，或調(diào)整樣品瓶順序，（從低濃度開始，高濃度放后面）或在樣品瓶前放清洗液瓶.

自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)第31頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三4、色譜柱

1)塔板數(shù)下降

a.樣品處理不合適，選擇適當(dāng)?shù)臉悠穬艋椒?，選擇合適流動(dòng)相。

b.柱頭塌陷，填裝修補(bǔ)。

第32頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三4、色譜柱2)峰形變壞，出現(xiàn)拖尾峰，分叉峰，非高斯峰,

與塔板數(shù)下降有關(guān);峰形壞保留時(shí)間不變可能是柱堵塞(篩板堵塞、緩沖鹽析出、強(qiáng)保留物累積)，或柱頭有空穴。緩沖鹽、離子對(duì)試劑，可用甲醇-水沖洗，強(qiáng)保留物累積，可用甲醇-乙腈沖洗，篩板堵塞，可用甲醇-水反沖，更換篩板。第33頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三4、色譜柱

3)柱壓突然增大樣品沉積在柱內(nèi),用能溶解樣品的溶劑沖洗（將檢測(cè)器和柱斷開）可正向沖，反向沖。柱內(nèi)硬件有問(wèn)題： 濾片堵塞，換新濾片;

柱頭塌陷,用相同填料填充、修補(bǔ)。第34頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三4、色譜柱4)保留時(shí)間改變

不同柱保留時(shí)間的變化,主要是填料差異造成的,不同牌號(hào)柱出峰順序不變，保留時(shí)間有小的變化。若峰順序變化，保留時(shí)間變化較大，應(yīng)考慮換柱或優(yōu)化分離條件。對(duì)專門的分析最好用同一批號(hào)的柱子。第35頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三由色譜柱引起的故障故障現(xiàn)象解決辦法過(guò)濾片堵塞

壓力增高、N下降、峰形差倒柱沖洗或換過(guò)濾片柱頭塌陷峰分叉、N下降修補(bǔ)柱頭健合相流失保留值改變、峰形差、N下降換柱樣品堵塞壓力高用能溶解樣品的溶劑沖洗強(qiáng)吸收樣品N下降、保留值小強(qiáng)溶劑反沖第36頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5、檢測(cè)器基線噪聲大,靈敏度低,燈（光源）的故障；

氘燈壽命:1000h

汞燈和鎢燈壽命:2000h

一般使用6個(gè)月以上可能接近壽命期限,可以考慮更換新燈.

紫外—可見光檢測(cè)器第37頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5、檢測(cè)器b.流動(dòng)池內(nèi)有氣泡用脫氣甲醇，不同流量沖洗。c.池堵塞（入口、出口、池內(nèi)）用可溶堵塞物的溶劑沖洗（緩沖鹽用水沖洗),d.池污染用異丙醇、二氯甲烷、6mol/LHNO3

沖洗.

紫外—可見光檢測(cè)器第38頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5、檢測(cè)器e.測(cè)量池和參比池失配

UV以空氣為參比，一般不扣流動(dòng)相本底，若用有紫外吸收的流動(dòng)相，參比信號(hào)不為零，會(huì)出現(xiàn)倒峰和偽峰,此時(shí)，選擇合適的流動(dòng)相。

紫外—可見光檢測(cè)器第39頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5、檢測(cè)器f.時(shí)間常數(shù)選擇(過(guò)濾噪聲）有的儀器有固定的時(shí)間常數(shù)，有的需設(shè)置時(shí)間常數(shù)。時(shí)間常數(shù)太小,噪聲增大;時(shí)間常數(shù)太大,出現(xiàn)寬峰、拖尾或矮峰。時(shí)間常數(shù)的設(shè)置一般根據(jù)經(jīng)驗(yàn)估計(jì)，小顆粒柱常數(shù)小，可選最窄峰寬的1/10作為時(shí)間常數(shù),對(duì)4.6×(150-250)mm，5um柱，可選0.5sor1s

紫外—可見光檢測(cè)器第40頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5檢測(cè)器

紫外—可見光檢測(cè)器

g.非線性響應(yīng)樣品量太大,超出線性范圍；

檢測(cè)器的衰減超出了其線性動(dòng)力學(xué)范圍；

流動(dòng)相的紫外吸收比較強(qiáng)。

第41頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5檢測(cè)器

溫度影響

環(huán)境溫度變化引起基線漂移。溫度變化引起流動(dòng)相折射率改變，紫外光傳導(dǎo)變化。柱溫變化引起基線漂移。第42頁(yè)，講稿共45頁(yè)，2023年5月2日，星期三5檢測(cè)器

信號(hào)線故障記錄儀和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號(hào)線插接不緊,接觸不良，信號(hào)很弱，出現(xiàn)不需要的噪音,此時(shí)按說(shuō)明書檢查線路連接。地線對(duì)儀器很重要,儀器外殼和信號(hào)