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1.檢驗(yàn)?zāi)康闹笇?dǎo)腦脊液CSF常規(guī)測(cè)定。2.方法原理2.1腦脊液是存在于腦室及蛛網(wǎng)膜下腔中的無(wú)色透明液體。由于脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞對(duì)血漿中各種物質(zhì)的選擇性分泌和超濾作用,血漿中各種成分對(duì)血腦屏障的通透性各有不同。其中最易通過(guò)血腦屏障的是氯、鈉、鎂離子及乙;其次為清蛋白、葡萄糖、鈣離子、乳酸、氨基酸、尿素和肌;纖維蛋白原、補(bǔ)體、抗體、某些藥物、膽紅素、膽固醇則極難或不能通過(guò)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)任何部位發(fā)生器質(zhì)性病變時(shí),如感染、炎癥、腫瘤、外傷、水腫和阻塞等都可以引起腦脊液成分的改變。通過(guò)對(duì)腦脊液理學(xué)檢查,顯微鏡檢查、化學(xué)和免疫學(xué)檢查及腦脊液病原學(xué)檢查,可對(duì)疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。2.2腦脊液(CSF)常規(guī)測(cè)定容包括:顏色、性狀、有核細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、氏試驗(yàn)、細(xì)菌等。2.3氏(pandys)試驗(yàn):CSF中的球蛋白與苯酚結(jié)合,形成不溶性的蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁或沉淀。3.方法性數(shù)如性出、量間確度準(zhǔn)性密、敏特1 顏色COLOR)2 透明度(clearity)3 凝固性(coagulabilit)
6 中性粒細(xì)胞NE)7 淋巴細(xì)胞LY)8 單核細(xì)胞MO)4 腦脊液有核細(xì)胞計(jì)(CSF—NUCL) 9 氏試驗(yàn)(pandystes)5 腦脊液紅細(xì)胞計(jì)數(shù)CSF—RBC)4.標(biāo)本類型4.1標(biāo)本類型:新鮮CS。4.2標(biāo)本拒收條件:拒收延遲室溫2h、冷藏6h未送達(dá)標(biāo)本。4.3標(biāo)本保存與穩(wěn)定性:一般室溫1h完成檢驗(yàn),久置可致細(xì)胞破壞,影響細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類檢查。5.要求的容器、防腐劑或添加物、儀器、試劑或分析系統(tǒng)5.1標(biāo)本容器BD無(wú)促凝成分紅頭管或潔凈干燥帶蓋玻璃管。5.2試劑5.2.1試劑組分:生理鹽水白細(xì)胞稀釋液氏快速瑞氏染色液
0.9%Nacl溶液1冰乙酸1ml分析純冰醋+蒸餾水至100ml)A液:曙紅、甲醇B液:亞甲藍(lán)氏試劑 10苯酚溶液(純苯酚10ml蒸餾水至100m)5.2.2試劑存儲(chǔ)和有效期:試劑名稱生理鹽水冰乙酸1%乙酸10%苯酚溶液氏快速瑞氏染色液
存儲(chǔ)條件有效期室溫 1年室溫 2年冷藏 1年室溫 1年室溫 2年
開瓶有效期位置1年 存貨柜/血常規(guī)室操作臺(tái)1年 藥品柜1年 試劑冰箱1年 藥品柜6個(gè)月 藥品柜/染色操作臺(tái)5.3儀器:OLYMPUS光學(xué)顯微鏡,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。6.校準(zhǔn)程序(計(jì)量學(xué)溯源性)不適用7.質(zhì)量控制,控制品使用水平和頻率,允許限的糾正措施不適用8.程序步驟8.1一般性狀檢查輕輕混勻CSF觀察量顏色有凝和明(一般細(xì)胞數(shù)≥300μl個(gè)時(shí)或蛋白增加可產(chǎn)生混濁,并記錄。8.2顯微鏡檢查8.2.1細(xì)胞計(jì)數(shù)(無(wú)凝塊標(biāo)本)(1)清或微混標(biāo)本:a)b)c)
混勻后直接沖入計(jì)數(shù)池,計(jì)數(shù)四角四大方格細(xì)胞總數(shù)(包括RC,NUC。用細(xì)稀液作1:1稀釋,有細(xì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)=細(xì)胞總數(shù)-有核細(xì)胞數(shù)(當(dāng)白細(xì)胞數(shù)≥30個(gè)/μl時(shí),在白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中直接分類至少50個(gè)白細(xì)胞)(2)混濁及以上標(biāo)本:觀 釋色/濁 0色/濁 0高/濁0
量 液/劑0μl 0μl0μl 0μl0μl 0μl;)解RBC:試,;沖池;計(jì)數(shù)d紅細(xì)胞細(xì)胞總數(shù)-有核細(xì)胞數(shù)8.2.2有凝塊或粘稠標(biāo)本:(1)用吸管旋轉(zhuǎn)并擠壓凝塊,擠出里面的液體及細(xì)胞。離,分上清液沉渣。(3)混勻沉,涂,用倍鏡察NUL、RC。(4)報(bào)倍野細(xì)核數(shù)。8.3的CSF離心,吸出上清液于另一試管,并在試管上編號(hào)。8.2.4當(dāng)NUCL>06/μl細(xì)分0個(gè)L示報(bào)。3驗(yàn)1入%約l管滴F。2。。陽(yáng)性(+:灰白色云霧狀。(2+:白色渾濁。(3+):白色濃絮狀沉淀。(4+:白色凝塊。9.計(jì)算結(jié)果原理9.1顏色9.1.1紅色:常見于穿刺損傷或出血性病變。為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血和穿刺損傷應(yīng)注意:(1出過(guò)4沉。(2看。2性。3。4。5綠色可綠單、鏈、球起膜高紅素和腦。9.2透度混細(xì)關(guān)中過(guò)3010/L現(xiàn)。9.3凝性:核性膜炎靜置12-24小時(shí)后,標(biāo)本表面有纖細(xì)的網(wǎng)膜形成。蛛網(wǎng)膜下腔梗阻時(shí),可產(chǎn)生黃色膠凍狀。9.4氏試驗(yàn):有腦組織和腦脊髓膜疾患時(shí)常成陽(yáng)性反應(yīng)如化膿性腦脊髓膜炎、梅毒性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、脊髓灰質(zhì)炎、流行性腦炎等。腦出血時(shí)多呈陽(yáng)性反應(yīng),如外傷性血液混入腦脊液中,亦呈陽(yáng)性反應(yīng)。9.5細(xì)胞分類:9.5.1中樞經(jīng)統(tǒng)變的CSF,胞增其的及胞類變的性有。9.5.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或霉菌性腦脊髓膜炎時(shí),細(xì)胞數(shù)可中度增加,常以淋巴細(xì)胞為主。9.5.3細(xì)菌感染(化膿腦脊髓炎,胞數(shù)顯增加,中性粒胞為主。9.5.4寄生蟲病,可見較的嗜酸性細(xì)胞。9.5.4腦室或蛛膜下腔出時(shí),腦脊可見多數(shù)細(xì)胞。10.生物參考區(qū)間顏色COLOR) 無(wú)色 透 明 度透明(clearity)凝固(coagulabilit)無(wú)凝塊 氏試驗(yàn)(pads陰性O(shè)R弱陽(yáng)性tst)有細(xì)計(jì)數(shù) 成(0-8)×06/L中性粒(NE)成人(0-6%)(CF—NUC) 兒(0-15)×06/L新生兒0-%)新生(0-3106/L淋巴細(xì)胞LY) 成人40-80) 單核細(xì)胞MO)成人(15-45)新生兒5-35) 新生兒50-90)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)CS—RBC)010/L(常脊中細(xì)主淋細(xì)、核胞之為7:3,可細(xì)胞。11.警告值、危急值(適用時(shí))12.檢驗(yàn)結(jié)果可報(bào)告區(qū)間13.對(duì)超出可報(bào)告圍的結(jié)果的處理13.1如檢到細(xì)菌時(shí)應(yīng)議培養(yǎng)認(rèn)。13.2有不能分類細(xì)胞應(yīng)示上級(jí)管另行描報(bào)告如腦膜白血病或腫瘤細(xì)胞。14.實(shí)驗(yàn)室解釋15.安全防護(hù)措施15.1所有樣品按具有潛在傳染性的標(biāo)本處理。15.2測(cè)定后液試于20mL有效浸泡4入入。3原存48小時(shí)上黃療,簽,
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