世界各國(guó)應(yīng)用胚胎細(xì)胞克隆技術(shù)課件

第1節(jié)、什么是克隆克隆羊“多利”多利羊誕生于1996年7月5日，1997年首次向公眾披露。2001年發(fā)現(xiàn)多利羊的左后腿患上了典型的“高齡病癥”——關(guān)節(jié)炎，2002年發(fā)現(xiàn)多利患有嚴(yán)重的進(jìn)行性肺病，經(jīng)羅斯林研究所決定為多利實(shí)施“安樂(lè)死”。多利的一生姓名：多利性別：雌種族：哺乳綱、?？?、綿羊生日：1996年7月5日出生地：蘇格蘭基因父親：無(wú)基因母親：一只芬蘭白綿羊線粒體母親：一只蘇格蘭黑臉羊生育母親：另一只蘇格蘭黑臉羊進(jìn)入社交圈時(shí)間：1997年2月23日子女：生育6名，存活5名死亡：2003年2月14日卵細(xì)胞Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵細(xì)胞多莉羊的培育過(guò)程：胚胎細(xì)胞克隆體細(xì)胞克隆受精卵胚胎幼兒老人精子卵細(xì)胞繁殖的類型:（一）有性繁殖（二）無(wú)性繁殖受精卵(合子)胚胎個(gè)體精子卵細(xì)胞特點(diǎn):具備了雙親的遺傳特性具有更強(qiáng)的生活能力和變異性定義:母體

新個(gè)體特點(diǎn):其個(gè)體保持了親本的遺傳性狀,產(chǎn)生后代數(shù)量多舉例:許多植物、海洋生物、多數(shù)微生物等應(yīng)用：——克隆技術(shù)原因：由于細(xì)胞核具有基因組全套遺傳信息，生物的體細(xì)胞有潛力直接發(fā)育成胚胎和核供體完全相同的個(gè)體克隆。一、無(wú)性繁殖與克隆1、克隆的概念：只要不通過(guò)兩個(gè)分子、兩個(gè)細(xì)胞或兩個(gè)個(gè)體的結(jié)合，只由一個(gè)模板分子、母細(xì)胞或母體直接形成新一代分子、細(xì)胞或個(gè)體，就是無(wú)性繁殖，即克隆。分子水平——基因克隆細(xì)胞水平——細(xì)胞克隆個(gè)體水平——組織培養(yǎng)成新個(gè)體一、克隆的層次：1、在分子水平上2、在細(xì)胞水平上3、在個(gè)體水平上重組載體通過(guò)宿主細(xì)胞的無(wú)性繁殖使目的基因擴(kuò)增，再用某探針選取、釣取目的基因。單克隆抗體：利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將骨髓瘤細(xì)胞和能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，再去培養(yǎng)，篩選到雜交瘤細(xì)胞系。不通過(guò)兩性細(xì)胞的結(jié)合，從一個(gè)單一的細(xì)胞繁殖出生物個(gè)體。即細(xì)胞——個(gè)體——基因克隆——細(xì)胞系的培養(yǎng)（制備單克隆抗體）——繁殖出生物個(gè)體目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增導(dǎo)入擴(kuò)增DNA的復(fù)制分子水平的克隆單克隆抗體制備過(guò)程

注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體細(xì)胞水平的克隆自然界的許多生物都具有先天的無(wú)性繁殖(克隆)能力。(草履蟲(chóng)的分裂生殖)(酵母菌的出芽生殖)個(gè)體水平的克隆草霉?fàn)I養(yǎng)生殖

馬鈴薯落地生根水螅的出芽生殖

植物克隆組織培養(yǎng)的過(guò)程（無(wú)菌）切下根尖無(wú)菌培養(yǎng)形成愈傷組織組織分化形成器官發(fā)育成新個(gè)體中國(guó)首例異體克隆動(dòng)物———克隆北山羊綿羊“多利”問(wèn)世(圖1)

世界首例胚胎克隆波爾山羊"津生"從理論上說(shuō)，細(xì)胞核具有基因組全套遺傳信息，生物的體細(xì)胞有潛力發(fā)育成胚胎和形成與核供體完全相同的克隆個(gè)體。二、克隆技術(shù)的發(fā)展1、微生物克隆2、遺傳工程克隆3、個(gè)體水平上的克隆①.20世紀(jì)50年代，美國(guó)——

兩棲動(dòng)物的魚(yú)類細(xì)胞核移植技術(shù)。②.20世紀(jì)80年代以來(lái)，世界各國(guó)——

應(yīng)用胚胎細(xì)胞克隆技術(shù)，克隆出羊、牛、

鼠、兔、猴等動(dòng)物。③.1997年蘇格蘭羅斯林研究所

完成首例體細(xì)胞克隆動(dòng)物——克隆羊“多利”為什么胚胎細(xì)胞的克隆不屬于嚴(yán)格意義上的克??？克隆技術(shù)的發(fā)展動(dòng)物克?。河膳咛ゼ?xì)胞克隆到體細(xì)胞克隆的發(fā)展過(guò)程克隆動(dòng)物就是不經(jīng)過(guò)生殖細(xì)胞的結(jié)合（受精）而直接由體細(xì)胞獲得新的個(gè)體。因此，胚胎細(xì)胞克隆不屬于嚴(yán)格意義上的動(dòng)物個(gè)體克隆。

胚胎細(xì)胞作為供體細(xì)胞核去核體細(xì)胞重組細(xì)胞胚胎個(gè)體

我國(guó)的克隆技術(shù)也毫不遜色。60年代，生物學(xué)家童第周對(duì)金魚(yú)、鯽魚(yú)進(jìn)行細(xì)胞核移植，1978年又成功地進(jìn)行了黑斑蛙的克隆試驗(yàn)，他將黑斑蛙的紅細(xì)胞的核移入事先除去了核的黑斑蛙卵中，這種換核卵最后長(zhǎng)成能在水中自由游泳的蝌蚪。1979年春，中國(guó)科學(xué)院武漢水生生物研究所的科學(xué)家克隆了魚(yú)。

小資料11990年5月，西北農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧所克隆一只山羊。1992年，江蘇農(nóng)科院克隆一只兔子。

1993年，中科院發(fā)育生物學(xué)研究所與揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)學(xué)院合作，克隆一只山羊。1995年7月，華南師大與廣西農(nóng)大合作，克隆一頭奶牛、黃牛雜種牛。1995年10月，西北農(nóng)大克隆6頭豬。

1996年12月，湖南醫(yī)大克隆6只老鼠。同年中國(guó)農(nóng)科院畜牧所克隆一頭公牛犢。1997年3月，中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所研究員陳大元率先提出了克隆大熊貓的設(shè)想。1999年，陳大元領(lǐng)導(dǎo)的小組將大熊貓的體細(xì)胞植入去核后的兔卵細(xì)胞中，成功地培育出了大熊貓的早期胚胎，克隆大熊貓面臨的兩個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題中的一個(gè)已經(jīng)解決。

小資料2三、克隆的條件1、具有包含物種完整基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞。2、能有效調(diào)