實驗一神經(jīng)干動作電位

關(guān)于實驗一神經(jīng)干動作電位第1頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三

實驗一

神經(jīng)干動作電位的引導(dǎo)及傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期的測定

第2頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【實驗?zāi)康摹?/p>

1.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類神經(jīng)干制作方法。

2.①學(xué)習(xí)使用BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)引導(dǎo)蛙類坐骨神經(jīng)干動作電位的方法。

②分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、幅值、時程，測定神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期。

第3頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三

【實驗原理】神經(jīng)干動作電位是神經(jīng)興奮的客觀標(biāo)志。它是由粗細(xì)不等、興奮性不同的神經(jīng)纖維所組成的，故在神經(jīng)干表面記錄的動作電位為復(fù)合性動作電位。這種電位的幅度在一定范圍內(nèi)可隨刺激強(qiáng)度的增加而加大。第4頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三處于興奮部位的膜外電位負(fù)于靜息部位，當(dāng)神經(jīng)沖動通過后，該處的電位又恢復(fù)到靜息水平，這一可擴(kuò)布的、一過性的電位變化，即動作電位。如果將兩個引導(dǎo)電極分別置于神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干一端興奮時，興奮波先后通過兩個引導(dǎo)電極處，記錄到兩個方向相反的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為雙向動作電位。第5頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【實驗對象】

蟾蜍或蛙

【實驗器材】蛙類手術(shù)器械（粗剪刀，眼科剪，手術(shù)剪，鑷子，探針，蠟盤，玻璃分針，大頭針，）培養(yǎng)皿，神經(jīng)屏蔽盒，引導(dǎo)線，刺激電極，任氏液，BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)，廢液缸，張力換能器。第6頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【實驗步驟】

1.制備坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標(biāo)本

（1）破壞腦脊髓

（2）剪除軀干上部及內(nèi)臟

（3）剝皮及分離下肢

（4）制備坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本。

第7頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第8頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第9頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第10頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第11頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第12頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三2.儀器連接

（1）開機(jī)并啟動BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)

（2）本實驗采用雙通道記錄，將兩對引導(dǎo)電極分別與通道1和通道2連接，刺激電極連接至刺激器輸出接口。

連接方法如見圖：第13頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三

BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)神經(jīng)屏蔽盒CH1CH2

刺激輸出刺激電極地線C1C2C3C4

儀器連接示意圖第14頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三第15頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三（3）將坐骨神經(jīng)—腓神經(jīng)標(biāo)本放入神經(jīng)屏蔽盒（坐骨神經(jīng)中樞端放在刺激電極上，外周端放在引導(dǎo)電極上）。第16頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【實驗項目】1、觀察細(xì)胞外引導(dǎo)雙相動作電位的波形特點、測定幅值及時程。2、測定神經(jīng)干動作電位傳導(dǎo)速度。3、測定不應(yīng)期：記下第二個動作電位剛消失時的兩個刺激脈沖之間的波間隔，此時的波間隔值即為絕對不應(yīng)期。用不應(yīng)期減去絕對不應(yīng)期即可得出相對不應(yīng)期第17頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【結(jié)果分析】1.解釋雙相動作電位產(chǎn)生的機(jī)制，記錄動作電位的時程、幅值。(3)2.測定神經(jīng)干動作電位傳導(dǎo)速度:V=ΔS/ΔT(m/s)。（4）3.動作電位不應(yīng)期的測量（5）4.刺激強(qiáng)度與復(fù)合動作電位幅值的關(guān)系（6）第18頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三【注意事項】1.破壞蟾蜍的腦和脊髓時，應(yīng)防止其耳后腺及皮膚分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼內(nèi)或污染實驗標(biāo)本。2.制備神經(jīng)標(biāo)本過程中，應(yīng)避免用手捏神經(jīng)或鑷子夾傷神經(jīng)。3.為了防止神經(jīng)標(biāo)本干燥，制備過程中需不斷滴加任氏液，使其保持良好的興奮性。第19頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三4.將神經(jīng)干放入屏蔽盒之前，用刀片輕刮引導(dǎo)電極，以保證電極和神經(jīng)干密切接觸。5．制作標(biāo)本過程中，切勿傷及神經(jīng)干及其分支，避免牽拉和其它不良刺激，6．實驗過程中，應(yīng)經(jīng)常在標(biāo)本上滴加任氏液以保持濕潤，使其保持良好的興奮性。7．每次刺激標(biāo)本以后，必須讓肌肉休息1-2分鐘，以防標(biāo)本疲勞。第20頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三雙向動作電位第21頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三傳導(dǎo)速度：動作電位在神經(jīng)干的傳導(dǎo)速度，可用電生理學(xué)方法進(jìn)行測量。測定神經(jīng)沖動在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離（S）和通過該距離所需時間（t），即可計算出神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)速度(V)，V＝ΔS/Δt。第22頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三

不應(yīng)期：當(dāng)雙脈沖的間隔時間為20ms左右時，示波器熒光屏上呈現(xiàn)兩個同樣大小的動作電位。逐漸縮短雙脈沖之間的間隔，第二個動作電位逐漸向第一個動作電位靠近，振幅也隨之降低，最后可因落在第一個動作電位的絕對不應(yīng)期內(nèi)而完全消失。第23頁，講稿共25頁，2023年5月2日，星期三刺激強(qiáng)度與復(fù)合動作電位幅值的關(guān)系

一根神經(jīng)纖維在受到閾值以上刺激產(chǎn)生動作電位不隨著刺激強(qiáng)度增大而增大,但是坐骨神經(jīng)干是有許多神經(jīng)纖維組成的,在受到閾值以上刺激時,由于引起不同數(shù)目神經(jīng)纖維產(chǎn)生動作電位,隨著刺激強(qiáng)度增大,神經(jīng)纖維產(chǎn)生動作電位的數(shù)目也越多,動作電位的幅度也就越大,當(dāng)全部神經(jīng)