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文檔簡介

2014歐洲感染學(xué)會曲霉菌病治療指南-診斷部分2014ESCMIDAspergillusGuideline-DiagnosticGroupKatrienLagrou,DieterBuchheidt,MalcolmRichardson,ManuelCuenca-Estrella,ChrisKibbler,ClausPeterHeussel,MarkusRuhnke,MauritioSanguinetti,JürgenL?ffler,CatherineBeigelman-Aubry,CorneliaLass-Fl?rlPresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelonaPresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona治療前臨床分析標本采集Pre-analyticalclinicalsampletreatment患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any獲取符合要求的單純粘液標本,如痰液Toachieveahomogenoussampleofviscoussamplessuchassputum通過真菌溶解液使其液化,如:胰腺液或淀粉酶Liquifactionusingamycolyticagent,eg.Pancreatin,sputolysinAIII必要檢查;大量的痰液培養(yǎng)(完整標本)表現(xiàn)出更高的陽性率通過肺泡灌洗液或沉淀物的分析以獲得曲霉培養(yǎng)的最佳標本ToachieveoptimalrecoveryofAspergillusfromBALbyCentrifugationandinvestigationofthesediment肺泡灌洗液/支氣管吸引(最少10分鐘吸引超過1000克標本)CentrifugationofBAL/bronchialaspirates(>1000gforatleast10minutes)AIII聯(lián)合PCR,能夠顯著增加培養(yǎng)的敏感率所有患者Any通過真菌溶解液使其液化,如:超聲手段或二硫代蘇糖醇LiquifactionusingsonicationAnddithiothreitol必要檢查;曲霉分離取決于培養(yǎng)的標本量;真菌濃縮Fraczeketal.2013,Baxteretal.2011PresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona直接鏡檢:熒光標定Directmicroscopy:Fluorescencebrighteners患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any通過新鮮的臨床標本進行真菌鑒定Toidentifyfungalelementsinfreshclinicalspecimens(e.g.BALs)熒光染色劑的應(yīng)用:Calcofluorwhite,Uvitex2B,BlancophorApplicationoffluorescentdyes:Calcofluorwhite,Uvitex2B,BlancophorAIII必要檢測;沒有對曲霉特異的檢測手段;高敏感率;結(jié)果快速反饋;廣泛應(yīng)用;無法與其他酵母菌進行區(qū)分;標本的質(zhì)量影響最后的結(jié)果獲得Lass-Fl?rlC.2007,RüchelR.1999,ChanderJ.1993PresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona診斷工具:組織病理Diagnostictools–Histopathology患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any確定組織切片和病變組織中的真菌Toidentifyfungalelementsinhistologicalsectionsandstains組織病理檢查;HE染色GMS染色PAS染色HistologicalexaminationHaematoxylinandeosin(HE);Gomori’smethenaminesilverstain(GMS);Periodicacid-Schiff(PAS);AIII組織學(xué)檢查是基礎(chǔ)檢測;無法與其他酵母菌進行區(qū)分;HE染色:困難;GMS染色:移除基地細胞;對絲狀真菌更為敏感PAS染色:有利于細胞計數(shù)和細胞細節(jié)檢查;對曲霉非特異但具有較高的敏感性;形態(tài)學(xué)可以確定真菌的種類(毛霉菌,菌株分枝間的夾角呈90度,芽孢..);快速檢測;應(yīng)用廣泛;在130個中樞感染案例中73例涉及曲霉菌?。?6%);在組織檢查陽性的案例中只有25%的培養(yǎng)陽性率DenningD.2003,VyzantiadisTA.2012,Sundarametal.2006,RüchelR.1999,Lass-Fl?rlC.2007,ChaiJK.2004,KaufmanL.1997,VerweijPE.1996,HaydenRT.2003熒光染色:Calcofluorwhite,Uvitex2B,Blancophor免疫組化單克隆抗體WF-AF-1或EB-A1原位雜交ImmunohistochemistryMonoclonalantibodyWFAF-1orEB-A1InsituhybridisationAIIBII可應(yīng)用于冷凍標本或石蠟包裹的組織具有潛在的價值-提供菌株的特異性數(shù)據(jù)和基因數(shù)據(jù);可獲得的商品化單克隆抗體:WF-AF-1是對煙曲霉,黃曲霉和黑曲霉特異性的抗體PresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona臨床標本培養(yǎng)Cultureofclinicalsamples患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any從深部感染部位分離菌株(活檢組織,血液,腦脊液等)Primaryisolationfromdeepsites(biopsies,blood,CSF…)AIII必要檢測;血液抑制孢子的繁殖;BHI能夠幫助分離孢子再生;從標本中重復(fù)分離獲得一些菌落或同一真菌具有更大的臨床意義。定量培養(yǎng)不能有效區(qū)分感染和定植。無菌部位分離真菌:確定種屬Cuenca-Estrella2011,RichardsonHM2000從非無菌標本中分離菌株(痰液,呼吸道吸引物,皮膚等)Primaryisolationfromnon-sterilesamples(sputum,respiratoryaspirates,skin…)在沙保弱葡萄糖瓊脂、馬鈴薯瓊脂、腦心浸膏瓊脂中以at30oC和37oC培養(yǎng)72小時(特殊培養(yǎng)基)CultureonSDA,BHIagar,PDAat30oCand37oCfor72(specificmedia)在沙保弱葡萄糖瓊脂、馬鈴薯瓊脂、腦心浸膏瓊脂中+慶大霉素和氯霉素以at30oC和37oC培養(yǎng)72小時(特殊培養(yǎng)基)CultureonSDA,BHIagar,PDAwithgentamicinPLUSchloramphenicolat30oCand37oCfor72hPresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona人群/檢測:培養(yǎng)陽性-質(zhì)譜鑒定MALDI-TOFPopulation/Test:Positiveculture-MALDI-TOF患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any復(fù)合種屬的鑒定IdentificationofspeciescomplexAII必要檢測;血液抑制孢子的繁殖;BHI能夠幫助分離孢子再生;從標本中重復(fù)分離獲得一些定植菌株或同一真菌具有更大的臨床意義。定量培養(yǎng)不能有效區(qū)分感染和定植。無菌部位分離真菌:確定種屬Cuenca-Estrella2011肉眼和顯微鏡對前期培養(yǎng)標本進行直接鏡檢Macroscopicandmicroscopicexaminationfromprimarycultures在特定的培養(yǎng)基中以25-30℃和37℃進行培養(yǎng)(2%MEA培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基)病在顯微鏡下進行鏡檢Cultureonidentificationmediaat25-30oCand37oC(2%MEAandCzapek-DoxAgar)andmicroscopicexamination在45℃下進行培養(yǎng)Cultureat45oCBIIIPresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona培養(yǎng)陽性-真菌形態(tài)學(xué)判斷確定真菌分子IDPositiveculture–MorphologyMolecularID患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any種屬鑒定Identificationatspecieslevel建立實驗室內(nèi)數(shù)據(jù)庫MALDI-TOF質(zhì)譜MALDI-TOFMSidentificationBIIAlanio2011,Bille2012,DeCarolis2012,Lau2013患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any種屬鑒定Identificationatspecieslevel一些案例中是基礎(chǔ)檢測;確定真菌編碼對微管蛋白ITS和調(diào)節(jié)蛋白進行測序SequencingofITSbeta-tubulinandcalmodulinAIIIBalajee2009,Samson2007PresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona人群/篩選:分類Population/Test:Typing患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any疾病爆發(fā)研究Tostudyoutbreaks疾病分布分析和CSP分析MicrosatelliteandCSPanalysisCIIuAraujo2012,Hurst2009,Guinea2011,Rougeronetal.2014PresentbyCorneliaLass-Florl[Australia]ECCMID10thMay2015inBarcelona人群/篩選:原始標本的貯存Population/Test:Storageoforiginalsamples患者人群Population目的Intention干預(yù)手段InterventionSoRQoE備注Comment所有患者Any避免臨床曲霉菌活性的丟失;反應(yīng)原始的真菌感染信息TopreventlossofviabilityofAspergillusinclinicalsamples,andtoreflecttheoriginalfungalcontent培養(yǎng)陽性標本短期保存:存放在4℃下以避免孢子活性丟失保留真菌原始信息Clinicalsamplesforculture-short-termstorage:4°CtopreventlossofviabilityandtoreflecttheoriginalfungalcontentAIII所有患者Any避免生物標記物降解,如血清中/支氣管毛刷/肺泡灌洗液的半乳甘露聚糖(GM)Topreventdegradationofbiomarkers,eg.Galactomannan(GM)inserumorBAL/bronchialwashes在運送至實驗室后迅速完成酶聯(lián)反應(yīng)。避免長時間或短時間將血清標本存放在4℃Completeassaysoonafterdeliverytolaboratory.Avoidshortorlong-termstorageofserumat4°C.AI已經(jīng)知曉血清標本的GM水平長時間或短時間存放在4℃中會產(chǎn)生降解;肺泡灌洗液的GM水平在4℃下仍然穩(wěn)定血清和肺泡灌洗液的GM水平在零下20℃條件下存放11個月相對穩(wěn)定ASMManualofClinicalMicrobiology,10thEdition,Johnsonetal.2013,Orenetal.2012,Furfanoetal.2012,Wheatetal.2014Pr弦es失en弦t弱by包C恰or膠ne努li秩a恭La和ss挖-F腦lo瘋rl劣[瓦Au奇st衰ra蠟li鈔a冷]EC識CM到ID賀1概0thMa雄y善20納15發(fā)i溜n填Ba濟rc愧el結(jié)on言a人群/篩選雀:分蘋離標右本的寇貯存/防腐Po疼pu努la尿ti柔on純/T蕩es舉t:哄S異to博ra溝ge蹤蝶/p似re派se天rv盈at偏io紐奉n費of鏈i健so料la土te糠s目的In廟te鍛nt捧io蜜n干預(yù)雪手段In形te酷rv王en薦ti臭onSo婚RQo兆E備注Co爆mm抽en拿t曲霉柱菌短蹲期保崗存Sh吸or朵t-測te峰rm菊m叔ai箏nt身en艇an嫂ce蛙o假fAs鎖pe代rg駐il麗lu肅sis燙ol刪at論es重復(fù)舒?zhèn)鞔婆囵B(yǎng)Re同pe歉at得ed吩s陳ub罰-c憲ul爭tu命reAI曲霉拒菌長早期保希存Lo醬ng蛋-t缺er夕mpr慈es愁er蠢va趨ti崗on掩o抄fAs資pe眼rg洽il萍lu誼sis源ol炮at商es水中掉貯存/礦物徐油中盞貯存/凍干饞貯存/冷凍總(-8乏0℃)/硅膠趁貯存/液氮摧貯存Wa縫te垂r殃st距or牧ag嶄e/棄st脖or鞠ag杜eun錢de凱r獵mi慮ne諒ra唱l吃oi江l/濃si欲li心ca幣g詳elst耐or敬ag毀e/頸fr到ee費ze壓dr抹yi音ng產(chǎn)/fr孔ee翼zi青ng粗(足-8本0°基C/壺c歉er原am位ic測b存ea爪ds鍛/l蹈iq忍ui杏d泊ni已tr猜og志enAI長期猛貯存瞎可以譯達到5年甚孔至更帽長;在此蜘期間毯不需跑要再揀次的甘接種St鑼oc逐kd久al澤e層et蜻a鑼l.重I候n:擱M練ed悔ic壺al鈴M醬yc鋼ol削og協(xié)y:愁A(yù)艱P準ra經(jīng)ct殊ic融al箭A營pp膊ro納ac驢h.桑I賴RL災(zāi)P含re鞋ss召a刊t蔽Ox刻fo泉rd享U污ni毅ve礦rs倦it浪y羊Pr關(guān)es譽s,四1垮98宅9在數(shù)區(qū)年間偶保持調(diào)曲霉印菌的摩活性虜以用駁于重南復(fù)培起養(yǎng);每月小接種1次;保存多在環(huán)爆境室舟溫下Pr有es紀en嶺t晶by叛C毫or洽ne慨li疑a浸La偵ss沿-F液lo糾rl割[步Au辮st仆ra炭li尊a迫]EC駁CM煌ID眨1懸0thMa生y緣瑞20傍15穗i館n設(shè)Ba抖rc仁el滲on懂a(chǎn)血液粱半乳旬甘露第聚糖水(GM)Bl講oo之d集ga拼la嫂ct陳om北an謙na喊n患者馳人群Po細pu闖la淹ti朋on目的In真te彼nt趴io響n干預(yù)雨手段In銀te棵rv售en愚ti烘onSo宋RQo鹽E備注Co嫩mm識en葬t(yī)持續(xù)佛粒細兄胞缺頁乏患助者和酷接受輩異基抹因造記血干觀細胞犬移植饞患者爆(未掏接受寧預(yù)防棗治療鴨)Pr生ol元on濱ge愛d忙ne熱ut縫ro頓pe刮ni描cpa狀ti掩en逼ts果a拾nd跳a虜ll瘋og鳴en椅ei費cst煮em封c譜el搞l賽tr辛an刻sp碧la廉nt鞏at時io蜘nre群ci蠢pi陜en死ts笛n蓮ot田o襯n算mo鉛ld園ac澆ti交vepr苦op懂hy飾la繁xi擴s曲霉樓菌感振染的妹診斷To來d潔ia浮gn翅os聚eIn朝va斃si百ve壇a投sp仁er榴gi善ll泊os草is血液敲半乳阿甘露皆聚糖斗檢測Ga串la至ct廣om糠an督na算n洽in錘b溝lo補odAI血液個半乳瓣甘露伐聚糖屠檢測Ga蹦la熱ct眨om掘an棗na長n膛in撿b抗lo太odAII敏感潛性顯備著低登于中病心粒災(zāi)細胞萄缺乏宇患者Mo株rr嘉is嬸se嗎y籍20楚13攔,錦Sp漂ri彈ng叔er眨2遵01挽3,片L惡ee遼fl耽an限g蒙20嗚08語,怪Ma笛er軌te益ns裁2眼00站7,楚M位ae佳rt惜en糊s余20欲02濁,扁Ma安er貿(mào)te倦ns擾2割00興1,須P請fe吐if控fe息r桃20文06杜,鐮Co忠rd多on片ni促er反2凡00虜8,儀M倘ae時rt業(yè)en便s磨20得10血液害惡性像腫瘤影患者*中心錯粒細撲胞缺凈乏患鹿者Pa孔ti誤en異ts西w粱it中h絡(luò)a平he揪ma判to挎lo紗gi維ca弊lMa候li險gn狐an處cy?Ne發(fā)ut去ro僑pe烈ni袖c橡pa常ti纏en備ts血液危惡性收腫瘤閑患者*非中舍心粒冤細胞珠缺乏仆患者Pa筆ti纖en劑ts膚w塵it肌h幼a住he權(quán)ma射to虛lo桂gi嗎ca肢lMa憑li遣gn迫an膠cy?No玻n-逢Ne罰ut慨ro竊pe雪ni斑c當pa醋ti笛en盲tsTo隸d搭ia慰gn額os引eIn抱va善si登ve罷a堂sp興er煌gi疼ll男os成is曲霉徒菌感暴染診導(dǎo)斷每3-顏4天采陡集一菜次標挺本Dr躬aw妄s鹿am率pl權(quán)es芬e候ve帥ry次3更-4貧d藥ay界sCII會I連續(xù)露兩次坡標本GM值>0貼.5為準寸確的鄙診斷箭標準童;前瞻產(chǎn)性的GM隨訪陰需要畫結(jié)合HR垮CT和臨旦床評饒估BIPr篇es蹄en響t想by絕C炒or劣ne犯li殼a澆La界ss鋪-F激lo另rl連[慚Au應(yīng)st近ra縫li栽a上]EC界CM常ID裳1勸0thMa婆y腿20禿15澇i科n疾Ba熱rc揮el糠on帳a血液臂半乳秀甘露始聚糖梅(GM)Bl辦oo甘d賤ga跌la耳ct理om談an蠢na壤n患者鋪人群Po件pu賭la符ti舉on目的In繡te饞nt串io邪n干預(yù)智手段In剛te盞rv網(wǎng)en攝ti浸onSo敘RQo添E備注Co茄mm暮en里tIC綿U患者IC煙U祝pa糟ti絡(luò)en毅ts曲霉純菌感鳳染診牢斷To境d音ia訴gn羨os插eIn診va默si流ve被a匹sp遺er套gi粗ll譯os罩is血液殖半乳抬甘露摧聚糖況檢測Ga魔la增ct怖om情an處na織n商in躲b撒lo鴿odCIIMe哭er梅ss透em側(cè)an頁2洋00倦8,廊G喚ui遲ne確a囑20適08底,膛Ta門ba孝rs朽ki緣瑞2謊01叫2,金H需us兔ai校n底20億04喪,瓦Pf創(chuàng)ei綿ff技er雄2案00蔬6,懼G執(zhí)ui盆qu危e些20饒13朽,粒Ma瓣rt哪in婆-R要ab邊ad鐘an膜2請01通3,嘗P系et隱ra扭it摟ie劫ne廈2商01逆1,判M堂ik經(jīng)ul渾sk恭a企20蠻13掙,攻Ve腥rg崖ed暴is鬼2縣01踩2,疼N鍛uc群ci滋2端01新4;魂H半ua食ng付2著00哀7敏感崇性顯蕉著低查于中旗心粒茂細胞柴缺乏言患者實體膜器官躁移植蛋患者So怒li際d蜘or金ga購n滔re協(xié)ci陸pi瘡en蔥ts曲霉京菌感幕染診禁斷To浪d粉ia替gn芬os鄉(xiāng)豐eIn朽va固si盲ve赴a輝sp諷er束gi預(yù)ll耳os釀is血液蜻半乳序甘露紡聚糖損檢測Ga資la雞ct薯om段an干na陣n犧in馬b孫lo死odCII低敏嚇感性判;高亭特異宅性;基數(shù)據(jù)原多來派自肺洪部移涼植患涌者(念其他咐實體挎器官袍移植兩患者IA感染真相對附較少舅)其他患者Ot葵he茄r曲霉斗菌感鐮染診診斷To借d粱ia炊gn料os士eIn番va紋si傅ve尸a像sp膊er朋gi跳ll亞os讀is血液洽半乳指甘露嗎聚糖秩檢測Ga狀la澡ct潑om攝an籍na扛n屠in幟b藥lo踏od對于?;颊叱脑\巧斷需術(shù)要綜嶺合臨蓋床癥蠶狀,膏影像勇學(xué)檢競查和參微生純物表裹現(xiàn);簡攝入委冰棒骨;輸屋血;申抗生鋼素應(yīng)眨用,逗腸外急營養(yǎng)菜可導(dǎo)廉致假爪陽性啞的發(fā)強生。牽近期生的研書究中授顯示績他唑遵巴坦斧不再稿是假枕陽性萄的影良響因他素;搶在組尼織胞斥漿菌巡壽,鐮你刀菌眨和馬暫爾尼詞菲青動霉菌石以及悟副求定孢子貿(mào)菌存癢在交劈燕叉反錦應(yīng)。Di棍ag唐no賣si為s鑰sh棋ou猶ld燥b惠e撒ba果se針d緊on機i倘nt遺eg織ra洋ti腎on耗o鋼f煙cl耕in昏ic加al殼,礎(chǔ)ra揉di香ol拜og延ic尾al腔a幕nd瘡m血ic民ro萄bi眼ol何og殊ic眾al盜s跡ig禿ns匠;倒fa潔ls過e嘴po忘si胸ti昂ve攜r嶺es灰ul歸ts飄r寨ep希or農(nóng)te倆d侮du靈e廚to訂i姓ng族es缺ti柄on黃o率f善ic甩ep額op押s,境t分ra匠ns膨fu恩si雙on料s,庭a戒nt炮ib察io懂ti修cs念,四Pl伏as惕ma城-L功yt處e誼in項fu猜si戲on野;罪Ta愿zo弱ci燦nT穿M跌no皂l愁on父ge護r切re焦sp篇on案si壓bl登e辯fo仔r伸fa加ls柱e呈po花si季ti測ve穗r忽es歷ul睛ts烘i畏n攏re豪ce刪nt得s此tu餐di束es諸;豬cr球os叫s故re伙ac訂ti或vi廈ty欺i端n員ca勒se輪o嘗f代hi聽st效op梢la阻sm惕os姻is注,麗fu門sa底ri淘os移is愁,萌pe漏ni燥ci暗ll淘os姑is炮a紹nd憑t廚ri未ch表os盡po她ro秘no斥si艦sPr笛es街en斑t創(chuàng)by造C處or別ne理li廚a攏La房誠ss擾-F黃lo喚rl頁[雹Au茄st恭ra鏈li鼠a證]EC尾CM懷ID棋1拒0thMa巨y述20薦15梢i最n絞Ba近rc蘭el百on陽a人群/篩選坑:肺撐泡灌滅洗液濾和腦醉脊液GM檢測Po意pu濟la照ti竄on報/T天es皇t:悄G肌M線-槽BA怨L患者拖人群Po耍pu伶la只ti勞on目的In劉te驗nt裙io科nSo精RQo蒙E備注Co既mm擱en樣t所有剪患者An幕y肺曲請霉菌嗽病的丘診斷To違d切ia篩gn虜os狀e鋪pu突lm沸on創(chuàng)ar立yas嗚pe畢rg藍il孤lo咸si含s肺泡多灌洗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