分光光度法同時(shí)測(cè)定維生素C和維生素E

分光光度法同時(shí)測(cè)定維生素C和維生素E實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)在紫外光譜區(qū)同時(shí)測(cè)定雙組分體系一一維生我和維生素E。實(shí)驗(yàn)原理維生素C（抗壞血酸）和維生素E（a-生育酚）在食品中能起抗氧化劑作用，即它們?cè)谝欢〞r(shí)間內(nèi)防止油脂變性。維生素0是水溶性的，維生素E是酯溶性的，它們都能溶于無水乙醇，因此能在同一溶液中，用于可見分光光度法測(cè)定雙組分相同的原理，在紫外光區(qū)測(cè)定它們。儀器與試劑儀器 紫外-可見分光光度計(jì)，石英吸收池一對(duì)，50mL容量瓶9只，1000mL容量瓶2只，10mL吸量管2只。試劑 維生素C（抗壞血酸），維生素E（a-生育酚），無水乙醇。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與操作步驟準(zhǔn)備工作（1） 清洗容量瓶等需要使用的玻璃儀器，晾干待用。（2） 檢查儀器，開機(jī)預(yù)熱20min，并調(diào)試至正常工作狀態(tài)。配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液（1）配制維生素C系列標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.0132g維生素C，溶于無水乙醇中，定量轉(zhuǎn)移入1000mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液濃度為7.50X10Lmol/L。分別吸取上述溶液4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL于4只潔凈干燥的50mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至標(biāo)線，搖勻。配制維生素E系列標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取維生素E(a-生育酚)0.0488g,溶于無水乙醇中，定量轉(zhuǎn)移入1000mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至標(biāo)線，搖勻。此溶液濃度為1.13X10—4mol/L.分別吸取上述溶液4.00mL,6.00mL,8.00mL,10.00mL于4只潔凈干燥的50mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至標(biāo)線，搖勻。繪制吸收光譜曲線以無水乙醇為參比，在220?320nm范圍繪制維生素C和維生素E的吸收光譜曲線，并確定入射光波心1和入2。繪制工作曲線以無水乙醇為參比，分別在\1和入2處測(cè)定維生素C和維生素E列標(biāo)準(zhǔn)的各溶液的吸光度并記錄測(cè)定結(jié)果和實(shí)驗(yàn)條件。試驗(yàn)的測(cè)定取未知液5.00mL于50mL容量瓶中，用無水乙醇稀至標(biāo)線，搖勻。在A1和入2分別測(cè)出吸光度A1和A2。結(jié)束工作實(shí)驗(yàn)完畢，關(guān)閉電源。取出吸收池，清洗晾干后入盒保存。清理工作臺(tái)，罩上儀器防塵罩，填寫儀器使用記錄。注意事項(xiàng)試樣取樣量應(yīng)經(jīng)實(shí)驗(yàn)來調(diào)整，以其吸光度在適宜的范圍內(nèi)為宜。數(shù)據(jù)處理繪制維生素C(抗壞血酸)和維生素E(a-生育酚)的吸收曲線。分別繪制維生素C和維生素E在A1和A2時(shí)的4條工作曲線，求出4條直線的斜率，即￡A(C)和￡A2(C)，￡a1(E)和￡a2(E)。（3）由測(cè)得的未知液A!（C+E）和A入2（c+E）利用