多糖化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定方案總結(jié)(K12教育文檔)_第1頁
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多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方案總結(jié)..(word多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方案總結(jié)..(word版可編輯修改)多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方案總結(jié)..(word編輯整理:敬重的讀者朋友們:文中內(nèi)容進(jìn)展認(rèn)真校對(duì),但是難免會(huì)有疏漏的地方,但是任然期望〔多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方案總議和反響,這將是我們進(jìn)步的源泉,前進(jìn)的動(dòng)力。本文可編輯可修改,假設(shè)覺得對(duì)您有幫助請(qǐng)保藏以便隨時(shí)查閱,最終祝您生活開心業(yè)績進(jìn)步,以下為多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方案總結(jié)..(word經(jīng)過分級(jí)純化的多糖在測(cè)定構(gòu)造前須檢查其純度及測(cè)定分子量.檢查純度最常用的推斷方法:(1〕GC、HPLC測(cè)定組成多糖的單糖的摩爾比是否恒定。用不同的柱型測(cè)定結(jié)果更為牢靠。(2)電泳只消滅一條帶.如可用聚丙烯酰胺凝膠電泳、乙酸纖維素薄膜電泳及玻璃纖維紙電泳。對(duì)于中性多糖可承受高壓電泳,以硼酸鹽為緩沖液,可增大其遷移速度。凝膠柱層析圖呈現(xiàn)對(duì)稱的單峰。假設(shè)有“拖尾”現(xiàn)象,說明其均一性不夠好.陰離子交換層析純化DEAE52〔2.6x100cm)柱層析,0。lmol/LNaCl6ml/h,按2ml分部收集,苯酚一硫酸法逐管檢測(cè),繪制收集體積與糖含量之間的關(guān)系曲線.看是否有單一對(duì)稱峰。YeDEAE52〔2.6x30cm〕對(duì)鮑氏層孔菌菌絲DEAEDEAE5210(ml/g〕的0。5mol/LNa0H30pH0.5mol/LHCI30pH0。5mol/lNaOH30pH0.5mol/LNaCl1.0ml/min)23100mg5mlDEAE52層析柱〔2。6x30cm,Cl-1型〕,0。10。3mol/LNaCI1.0ml/min,自動(dòng)收集器分部收集〔10ml/20各管多糖含量(490nm〔490nm〕DEAE一52一纖維素色譜柱洗脫曲線.依據(jù)洗脫峰型,合并一樣組分,50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,對(duì)去離子48hNaCI初步純化多糖得率計(jì)算公式:多糖得率〔%)=純化多糖質(zhì)量/粗多糖質(zhì)量x100%葡聚糖凝膠層析純化SephadexG—100DEAE—52進(jìn)一步純化。葡聚糖凝膠〔sephadexG100〕sephadexG10030〔ml/g)的去離子水,沸水浴5洗,減壓脫氣后進(jìn)展?jié)穹ㄑb柱,用0。1MNaSO2

0.25ml/min〕234用。DEAE5220mg2ml0。1MNaSOSephadexG100(2。6x60cm〕0。1MNaSO

溶液溶液洗脫,流2 4 2 40.25ml/min,分步收集〔5ml/管)。用硫酸一苯酚法跟蹤檢測(cè)各管多糖含量(490nm處吸取值〕,以收集的管數(shù)為橫坐標(biāo)。吸光〔490nm為縱坐標(biāo)繪制sePhadexG一10048hNaSO2 4得不同純化產(chǎn)品。純化多糖得率計(jì)算公式:純化多糖得率〔%)=純化多糖質(zhì)量/粗多糖質(zhì)量x100%〔鮑氏層孔菌菌絲體粗多糖)紙層析法呈單一集中斑點(diǎn)。0.550ul,點(diǎn)樣于華中速濾紙〔3cmx20cm1cm正丁醇:濃氨水:水〔4O:50:5〕為開放劑,飽和26h,取出吹干,用0。5%95%乙醇漂洗至背景褪色,看是否只有一個(gè)清楚的斑點(diǎn)。瓊脂糖(Agarose)凝膠電泳法在瓊脂糖板〔0。2cm35ul0。075mol/L,pH8.61-1.5h,6480V,甲苯胺藍(lán)〔1%)染色,醋酸乙醇混合溶液〔醋酸:乙醇:水=0。1:5:5〕脫色。多糖純品經(jīng)電泳開放后,看是否呈現(xiàn)單一斑點(diǎn),斑點(diǎn)是否清楚.(6〕紫外分光光度法PWZ0.9%NaCI1mg/mlUV16OA光譜儀掃描(200nm30Onm)260nm、280nm多糖的分子量測(cè)定:過去用現(xiàn)已少用?,F(xiàn)在較常用的方法有凝膠過濾法和高效凝膠液相色譜法,這兩種方法須先用分子量的標(biāo)準(zhǔn)多糖比照測(cè)定樣品的分子量。一般來說,多糖構(gòu)造分析包括以下幾點(diǎn):單糖組成分析:爭論確定單糖的種類及摩爾比;完全酸水解后用高效液相色譜方法〔HPLC)或氣相色譜方法測(cè)定.糖苷鍵類型:爭論確定糖苷鍵及支鏈點(diǎn)連接位置;甲基化分析方法Smith糖環(huán)大小:爭論確定糖苷鍵為呋喃糖或吡喃糖;紅外光譜a—P-構(gòu)型;2DNMR.(TwodimensionalNuclearMagneticResonance)光譜分析方法測(cè)確定單糖殘基和重復(fù)單元的序列甲基化分析方法與磁共振光譜分析方法結(jié)合分析,一般會(huì)參考多糖的單糖組成及摩爾比信息以利于解析多糖構(gòu)造。高碘酸氧化法薄層層析〔TLc〕——定性,氣相色譜法取代基團(tuán)位點(diǎn):爭論0H-修飾基團(tuán)的種類和取代位點(diǎn),如0-磷酸化,乙醜基取代,0-硫酷化等;比色分析方法多糖分子量分布的爭論。紫外光譜定性與定量方法薄層層析:殘基定性氣相色譜:殘基定量氣質(zhì)聯(lián)用:殘基定量高效陰離子色譜法:殘基定量鑒定構(gòu)造常用物理化學(xué)方法:高效液相色譜:確定單糖組分和相對(duì)分子量紅外光譜分析:測(cè)定多糖的官能團(tuán),不僅可以檢測(cè)酮糖、酵糖的恥喃糖環(huán)或呋喃糖環(huán)的構(gòu)象和糖苷鍵的構(gòu)型核磁共振:α—構(gòu)型與β-構(gòu)型殘基的比例;推斷異頭碳構(gòu)型;推斷主鏈和支鏈連接鍵型鑒定構(gòu)造復(fù)合方法:甲基化分析:推斷出多糖樣品中糖基的連接方式及各種連接鍵型的比例Smith推斷糖苷鍵的位置、直鏈多糖的聚合度及支鏈多糖的分支數(shù)目糖睛乙酸酷衍生物的氣相色譜法:單糖組成和摩爾比各種多糖化學(xué)構(gòu)造鑒定方法的具體實(shí)施方案1、酸水解完全酸水解稱取20mg樣品,參加2mL2mol·L-1

于安培管中沸水浴水解8h,水解液用2 4BaCO3

pH=7,離心,取上清夜置冰箱冷藏備測(cè).〔阿魏側(cè)耳子實(shí)體多糖分別純化及其化學(xué)構(gòu)造的初步爭論〕局部酸水解稱取糖樣70mg,80℃條件下,0.05M三氟乙酸水解2h。降至室溫后,離心(4000r/min,10min,將沉淀枯燥,留做GC分析.上清用無水乙醇除酸至中性(pH為67,蒸餾水透析48h:將袋外透析液濃縮,真空枯燥,留做GC分析;袋內(nèi)液濃縮至5ml左右,加10倍體積無水乙醇,醇沉過夜,離心(4000r/min,10min〕,沉淀常規(guī)枯燥,作GC分析;上清濃縮,真空枯燥,留做GC分析。2、高效液相色譜確定樣品的單糖組成色譜條件為:色譜柱為ShodexKS804Sugar〔300mm×7.8mm〕40流淌相為水0.8mL·min—1檢測(cè)用410RⅠ810GPC同時(shí)用鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、木糖、果糖、葡萄糖、巖藻糖8種單糖進(jìn)展比照,依據(jù)峰值確定樣品的單糖組成。分子量的測(cè)定以標(biāo)準(zhǔn)分子量的葡聚糖Pulluan作分子量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。讓其通過高壓液相色譜柱Pulluan的工作曲線上可以求得該成分分子量?!舶⑽簜?cè)耳子實(shí)體多糖分別純化及其化學(xué)構(gòu)造的初步爭論〕PW2HPLCPW221.77∶1。例如:HPLCPW23。18×104〔阿魏側(cè)耳子實(shí)體多糖分別純化及其化學(xué)構(gòu)造的初步爭論〕4、甲基化分析(1〕根本原理解,水解后得到的化合物,其羥基所在的位置,即為原來單糖殘基的連接點(diǎn).同時(shí)依據(jù)不同甲基化單糖的比例,可以推想出此種連接鍵型在多糖重復(fù)構(gòu)造中所占的比例.用此種方法得到的羥基及NaBH4

復(fù)原醛基后產(chǎn)生的羥基,經(jīng)乙?;傻玫郊谆奶谴家宜狨ァ睪C分析,再經(jīng)GC與GC—MS質(zhì)譜譜圖的主要離子碎片的分析便可以較準(zhǔn)確地確定糖的連接鍵型.反響通式如下:(2〕甲基化反響10mg,2.0ml〔DMSO〕N2NaOH50mgN2

1。0hN21.0mlN2

排出空氣,加蓋密封,室溫連續(xù)反響1。0h0.5ml48h24h,透析液冷凍枯燥得第一次甲基化樣品.第一次甲基化樣品連續(xù)甲基化,反響步驟同上,得其次次甲基化樣品。如此重復(fù)甲基化三次.甲基化后的樣品用紅外光譜檢測(cè),3700cm—1-3100cm-1,四周無羥基的特征吸取峰,說明甲基化反響完全。〔3)甲基化樣品的衍生化2mol/1(TFA〕3.0ml,1202。0h50℃2.0ml2。0ml25mg,2.0h。01mol/1pH5.5~7050℃2。0ml1。0ml1.0ml1。0h。反響50℃2.0ml1。0ml,0.45ulGC/MS(4〕GC/MSGC/MS依據(jù)文獻(xiàn)的相對(duì)保存時(shí)間和不同單糖的主要離子碎片(m/e〕,推斷出多糖樣品中糖基的連接方式及各種連接鍵型的比例.本試驗(yàn)承受的條件為:GC(VarianCP3800〕MS〔VarianSatum2200〕氣相一DB—5MS〔30mX0.25mmX0.25um80℃,保持18℃/min2101min20℃/min260℃,1min;氦氣作載氣,進(jìn)2501:50,1。0ml/min;電子電離源〔EI〕70eV,倍增器電350V,250uA260180℃,質(zhì)荷比〔m/z)掃描范圍30~4502.5scan/sec〔〕〔MAEP—2a-2b是安絡(luò)小皮傘菌絲體多糖的某個(gè)過程中第某個(gè)樣品)例如:經(jīng)過甲基化反響的MAEP-2b-2a通過GC—MS分析,結(jié)合其各峰位保存時(shí)間和質(zhì)譜碎片峰,推斷樣品的構(gòu)造并計(jì)算摩爾百分比。從表14中,可以看出MAEP-2b-2a中糖局部是以〔1→2,1→6〕連接的Man〔甘露糖)為〔1→2〕連接的Man〔甘露糖)在其4位上有分枝點(diǎn),(1→6)連接的Man在其2位上Gal和Glu為主組成的側(cè)鏈。MAEP-2b—2a的非復(fù)原末端是由Gal,Man,Glu組成.從甲基化結(jié)果的摩爾百分比計(jì)算,各分枝點(diǎn)摩爾百分比之和低于非復(fù)原末端摩爾百分比之和,由PMPMAEP-2b-2a尚含約9%的GalA,糖醛酸在簡單多糖中可能以分枝點(diǎn)的形式存在,故推想在MAEP—2b—2a中還有大量的GalA〔絡(luò)小皮傘菌絲體多糖〕〔茶源多糖構(gòu)造鑒定〕5、紅外光譜分析取枯燥樣品微量,壓片,全波段掃描。例如:阿魏側(cè)耳子實(shí)體多糖分別純化及其化學(xué)構(gòu)造的初步爭論圖中顯示在4000cm—1~650cm—1區(qū)內(nèi)的是具有多糖類物質(zhì)的一般特征。3372cm-1的吸取峰是O-H和N-H2931cm—1為C—H-CH和—CH2的共振吸取鋒。這兩類是糖類的特征吸取峰。848cm-1吸取峰說明在PW2〔文中提純的其次種成分)多糖純品構(gòu)造中存在α〔即α1026cm-11081cm—1和1152cm-1的吸取峰說明PW2中的糖環(huán)為吡喃糖環(huán),這是由醚鍵C—O-C振動(dòng)而產(chǎn)生的吸取峰;而呋喃糖環(huán)在此區(qū)間上只有兩個(gè)強(qiáng)吸取峰。在890cm—1處有微弱吸取,說明樣品中含有少量β型糖苷鍵,而在810cm—1處沒有振動(dòng)吸取峰說明沒有甘露糖的存在.928cm—1為糖類分子振動(dòng)吸取D—吡喃糖1725cm-1的存在,說明多糖含有糖醛酸基團(tuán),即PW2為酸性多糖。3、核磁共振將樣品10mg,溶于D

O(重水)中,溶解溫度80400MHz500MHz21HNMR13CNMR。(阿魏側(cè)耳子實(shí)體多糖分別純化及其化學(xué)構(gòu)造的初步爭論〕氫譜分析例如:5。39吸取峰說明樣品的主要構(gòu)型為α—構(gòu)型4.97吸取峰的存在,說明存在少量的β-構(gòu)型(α-C—1δ103以下,H—1δ5。0以上;β—C-1在δ104H—1δ5。0以下)。且α—構(gòu)型與β—構(gòu)型殘基的比例為1∶0。2843。碳譜分析例如:由圖及表2可以看出:C—1信號(hào)在100.4ppm,即處在90-103之間,說明多糖的異頭碳的構(gòu)型為α—構(gòu)型,同時(shí)可以看到存在一個(gè)微弱的117ppm峰β-構(gòu)型,峰的相對(duì)高度正比于碳的數(shù)目,即α—構(gòu)型與β—構(gòu)型殘基的比例為1∶0.29,這個(gè)結(jié)果和紅外光譜以及氫譜的結(jié)論完全吻合。圖中70~76之間的碳共振峰分別是未被取代的C-2、C-3、C—4,其中,αβ兩種構(gòu)型的共振峰重疊嚴(yán)峻,由于77.906C-4的糖苷鍵的共振峰,圖中可以看出存在重疊峰,這是由于α與β兩種構(gòu)型和兩種單糖造成的,〔小邱:不是很明白它的意思,C—4〕C-661.11469。977說明多糖PW2存在1—6依據(jù)峰高比例可以大約看出多糖PW2的主鏈為1—61-4糖苷鍵的支鏈。由C—1和C-6的峰高比例可以看出多糖PW2的支鏈不多。6、Smith(1)原理高碘酸氧化是一種選擇性的氧化反響,它只能作用于多糖分子中連二輕基及連三輕基處。當(dāng)C—C后,產(chǎn)生相應(yīng)的醛;當(dāng)C—C時(shí),產(chǎn)生甲酸及相應(yīng)的醛1molC-C1mol1mol2mol因此,通過測(cè)定高碘酸消耗量及甲酸生成量,便可以推斷糖苷鍵的位置、直鏈多糖的聚合度及支鏈多糖的分支數(shù)目等.高碘酸氧化產(chǎn)物經(jīng)NaBH4復(fù)原,得到的多糖醇用稀酸在溫順條件下水解,可發(fā)生特異性降Smith.Smith打斷被高碘酸破壞的糖苷鍵殘基仍連在糖鏈上。這樣,多糖醇經(jīng)Smith降解,就可以得到小分子的多元醇和未被破壞的多糖或寡糖片段,對(duì)這些產(chǎn)物進(jìn)展分析,便可以推斷出糖苷鍵的鍵型及其位置.(2〕高碘酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制NaI04〔15mmol/L〕NaIO3

〔15mmol/L)5:0,4:1,3:2,2:3,1:40:50.1ml25025ml,223nmNaI04〔mmol/L〕為橫坐標(biāo),吸NaIO4

標(biāo)準(zhǔn)曲線?!?)高碘酸氧化25mg15mmol/1NaIO4

1.0mg/ml〕溶液,振蕩使其溶解。2h0.1ml25025ml,223nm4℃6h0.1ml25ml223mn吸光值,直至吸光值根本穩(wěn)定。依據(jù)反響前后的吸光值和NaIO4

NaIO4

消耗量。1。0ml1h1.0ml,50ul0.5mmol/LNaOH50mg20h01mol/LpH5。5—7。048h,24h502。0ml3Smith〔4〕SmithGC將減壓蒸干的多糖高碘酸氧化產(chǎn)品,進(jìn)展三氟乙酸(TFA)水解,再制備糖腈乙酸酯衍生物,GC7、糖腈乙酸酯衍生物的氣相色譜法(鮑氏層孔菌菌絲體多糖的構(gòu)造分析)〔1)多糖樣品水解承受完全酸水解法。5mg2mol/1(TFA)2ml,120℃250℃2ml,再蒸發(fā)干,如此重復(fù)3生化使用。(2)糖腈乙酸酯衍生物的制備10mg5mg06ml90℃30min1。0ml9030min,冷卻后得糖腈乙酸酯衍生物。反響產(chǎn)物可直接用于氣相色譜分析?!?)衍生物的氣相色譜檢測(cè)本試驗(yàn)承受的條件為:Agilent6890N氣相色譜儀,5%苯甲基硅氧烷毛細(xì)管色譜柱HP—5,30。0mX320umX0.25um;氫火焰離子檢測(cè)器(FID〕;色譜柱程序升溫:1200C3min30C/min2100C,2100C4min250℃、280℃;進(jìn)樣體1.0ul,25ml/min,30ml/min,400ml/min。(4〕標(biāo)準(zhǔn)單糖衍生與檢測(cè)鼠李糖、巖藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖以及半乳糖等標(biāo)準(zhǔn)單糖同樣進(jìn)展糖睛乙酸酷衍生化,然后以同樣條件進(jìn)展氣相色譜分析。單糖組成和摩爾比.計(jì)算公式:Wx=〔Ax*Wi)/〔Ai*。Wx〔mg〕;Wi(mg);AX-樣品中單糖的峰面積;Ai—樣品中內(nèi)標(biāo)的峰面積;f—相對(duì)校正因子:f=Wi*As/(Ws*Ai〕。8、薄層層析〔TLc)單糖殘基的定性分析(猴頭菌實(shí)體多糖)〔TLc):2mg2mol/L〔TFA)4mL,在110℃2h,4h40℃)后,3mL45TFA05mL5uL水〔5:51:3,顯色劑為苯胺一鄰苯二甲酸,110℃加熱10min后顯色,以標(biāo)準(zhǔn)單糖樣品為比照?!采剿幎嗵恰?、氣相色譜法〔猴頭菌體多糖)標(biāo)準(zhǔn)單糖樣品的乙?;苊芊Q取等摩爾〔2mmol/L〕的半乳糖、巖藻糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖,分別溶于3mL蒸餾水中,參加20-30mg硼氫化鈉(NaBH4,于室溫下,間歇振蕩,復(fù)原3h,NaBH4,至溶液不再產(chǎn)生氣泡為止,pH4—53mL4—5過夜。次日,110℃15min,4mL1001h,3mL4-53mL410mLGCGC—MS樣品的乙?;幚?mg2mol/L〔TFA)4mL,110℃水2h40℃3mL4-5TFA5m1,GCGC-MSGC分別用單個(gè)單糖的標(biāo)樣按〔1〕法處理后用GC糖的混標(biāo)按(1〕法處理后用GC6〔RSD(1法平行處理六個(gè)混標(biāo)樣品后用GC(RSD2。糖的定量分析:計(jì)算各糖組分的峰面積,利用面積歸一法求出各糖組分的百分比例,并計(jì)算每種單糖的響應(yīng)因子.然后依據(jù)等摩爾的標(biāo)樣組分,計(jì)算出樣品的摩爾比.(4)色譜條件氣相色譜儀(GCDB-23,30mX0。25mmX0.25um。氫火焰離子化檢測(cè)器(FID12015℃/min2406.5min。2501:5025035mL/min350mL/min,尾30mL/min1mL/min。10、高效陰離子色譜法〔猴頭菌體多糖〕2mg2mol/L〔TFA〕4mL110℃下水2h,100mL100DionexCarboPacTMPA20CarboPacTMPA20工作參數(shù):E1100mv,400ms;E2—2023mv,20ms;E3600mV,10ms;E4100mV,70ms2.5mmol/LNaOH濃度淋洗。流速:0。45mL/min;上樣量:25uL30℃。11、氣質(zhì)聯(lián)用〔猴頭菌體多糖〕GC—MS,色譜條件:氣相一質(zhì)譜聯(lián)用(GC—MS〕DB—5MS毛細(xì)管柱,30mX0.25mmX0.25um801min,50C/min至2000C20C/min至215℃,最終以20/min至270250℃,1:501mL/min。EI(70eV)350v250uA,接口200℃,250℃42-462amu,2。5scan/秒.HEPF1〔36〕,通過各峰的保存時(shí)間和質(zhì)譜可以確定其含有巖藻22.58min22.58min圖〔3.7m/z43,87,101,117,129,143,189203m/z2031893-0-z129143m/z189203AcOH,—60〕而產(chǎn)生的二級(jí)片段,與文獻(xiàn)完全全都.由此可以斷定此峰是3-0—甲基一甲基戊糖的糖醇乙酸酷衍生物。由于3-0—甲基一甲基戊糖有兩種存在形式,3—03—0一種,還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。12、苯酚·硫酸法總糖含量測(cè)定〔1〕標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作10520mg500mL0.4mL,0.6mL,0。8mL,1.0mL,1.2mL,1。4mL,1。6mL,1。8mL2.0mL6%1。0mL,用移液管吸5.0mL10min20min490nm測(cè)吸光度,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2〕樣品含量測(cè)定1mg/mL13、糖醛酸含量測(cè)定〔1〕試劑配制間輕基聯(lián)苯〔m-hydroxydiphenyl〕試劑:0.15%0.5%氫氧化鈉配制,置于冰箱中保存,10.0125mol/L60mg,100mL60ug/mL,定容后備用.(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作0uL,5uL,100uL,150uL,200uL,250uL,300uL,350uL025mL1.5mL5min25uL520nm(3〕樣品測(cè)定0.1mg/mL0.1mL,1mL,余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線,平行測(cè)定三次,依據(jù)吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得糖醛酸含量。14、分子質(zhì)量測(cè)定〔dn/dc)通過OPTILAB折光儀在633nm和25℃dn/dc值為0.14dn/dc描述的是大分子溶液折光指數(shù)相對(duì)于溶質(zhì)濃度的變化,它的值得大小有其自身性質(zhì)打算的,受溶劑、溫度、測(cè)量波長等因素的影響,也是用光散射測(cè)定聚合物分子量不行少的常數(shù)。LS測(cè)定角度為900,TFP1的流出體積為28m6-1和6—2,通過Kc/R。θsin2(θ/2)+KcZimm〔圖15(b)〕,Mw公式中字母的意義:K,c為多糖溶液的濃度(mg/mL),Rθ

為瑞利因子,n溶劑的折光指數(shù),λ0

為入射光波長,<S2>z1/2均方根旋轉(zhuǎn)半徑,NA

Avogadro,II0 θ分別為入射光強(qiáng)和散射光強(qiáng),代表光源到測(cè)量點(diǎn)得距離。ZimmTFPlNaCl1,TFPl的重均分子量(Mw〕大5.832xl06Da;Z〔<S2>z1/2)是用來描述大分子的尺寸,它的大小可以用TFP1<S2z1/21913nmTFP1(Mw/Mn〕1。005TFP1TFP1是分子量較大的均一多糖,糖鏈?zhǔn)巧煺沟膭傂枣湣?4、碘—碘化鉀反響TFP1〔0.02%120.2%KI300—700nm565nm則說明多糖有較少的分支和較短的側(cè)鏈[161。16TFP1I2—KI351nm565nm沒有最大吸取,說TFP1可能存在較長的側(cè)鏈和較多的分支TFP1I2—KI15、剛果紅試驗(yàn)CHNNaOS696。66,能溶于水和乙醇,可與具32226 262有三股螺旋構(gòu)象的多糖形成絡(luò)合物,絡(luò)合物的最大吸取波長同剛果紅相比發(fā)生相對(duì)位移,在肯定NaOHNaOH03mol/LNaOH于剛果紅本身最大吸取波長削減明顯緩慢,則說明多糖未表現(xiàn)出三股螺旋構(gòu)造。如圖17,隨著NaOHTFP116、粘度檢測(cè)高分子的粘度是流體力學(xué)性質(zhì)的內(nèi)容,反映高分子之間的摩擦力,特性粘度值反映的是單個(gè)高分子在特定濃度下對(duì)溶液粘度的奉獻(xiàn),其值的大小并不隨濃度轉(zhuǎn)變而轉(zhuǎn)變,多糖溶液特性粘度[?。Kh和Kk分別為高分子在特定條件下某溶劑中的常數(shù)[?粘度;C,高分子溶液濃度。

增比粘度;?相對(duì)sp rHuggins〔y=1146547。14x+1508.83Kraemer〔y=-189179x+1507.8)計(jì)TFPl[?]=1508.3mL/g18)2250.1mol/LNaCl作為溶劑的條件下測(cè)定的特性粘度,銀耳多糖與其它一些樣品相比占有相對(duì)

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