病原微生物室sop標準操作程序文件

臨床微生物室

標準操作程序

SOP

編制人：XXX

審核人：XXX

批準人：XXX

修訂版號：2022-4

生效日期：2022-4-25

臨床微生物室標準操作程序(SOP)目錄

1.標本采集與送檢原則標準操作程序-LC-SOP-GC-1

2.血液及骨髓標本的采集標準操作程序-LC-SOP-GC-2

3.呼吸道標本留取標準操作程序?LC-SOP-GC-3

4.尿液標本留取標準操作程序-LC-S0P-GC-4

5.膿及創(chuàng)傷感染標本留取標準操作程序*LC-SOP-GC-5

6.生殖道分泌物標本采集標準操作程序-LC-SOP-GC-6

7.糞便標本采集標準操作程序-LC-SOP-GC-7

8.穿刺液標本留取標準操作程序-LC-S0P-GC-8

9.腦脊液、膽汁標本采集標準操作程序LC-S0P-GC-9

10.組織標本的采集標準操作程序-LC-S0P-GC-10

11.靜脈道管標本采集標準操作程序-LC-SOP-GC-11

12.眼、耳及乳突分泌物標本采集標準操作程序LC-S0P-GC-12

13.樣本接收、核對、接種、培養(yǎng)標準操作程序LC-SOP-GC-13

14.菌株的純化、鑒定、藥敏流程標準操作程序LC-S0P-GC-14

15.普通MicroScan板接種培養(yǎng)流程標準操作程序LC-S0P-GC-15

16.判讀普通革蘭陽性板標準操作程序-LC-S0P-GC-16

17.判讀普通革蘭陰性板標準操作程序?LC-SOP-GC-17

18.普通Microscan板報告標準操作程序-LC-S0P-GC-18

19.常見標本培養(yǎng)結果解釋標準操作程序-LC-S0P-GC-19

20.KB法藥敏試驗標準操作程序-LC-SOP-GC-20

21.超廣譜P-內酰胺酶(ESBLs)檢測標準操作程序LC-SOP-GC-21

22.B-內酰胺酶檢測標準操作程序-LC-SOP-GC-22

23.革蘭染色標準操作程序?LC-S0P-GC-23

24.抗酸染色標準操作程序-LC-S0P-GC-24

25.解胭/人型支原體培養(yǎng)標準操作程序-LC-SOP-GC-25

26.AccuStep衣原體抗原檢測標準操作程序-LC-SOP-GC-26

27.ATBFUNGUS2真菌藥敏標準操作程序-LC-SOP-GC-27

28.培養(yǎng)基的制備標準操作程序-LC-S0P-GC-28

29.觸酶試驗標準操作程序?LC-S0P-GC-29

30.氧化酶試驗標準操作程序-LC-SOP-GC-30

31.芽管試驗標準操作程序"LC-SOP-GC-31

32.臨床微生物實驗室安全標準操作程序-LC-S0P-GC-32

編號：LC-SOP-GCT

XX醫(yī)院標本采集與送檢原則日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

正確采集和處理標本是實驗室取得正確結果的前提，必須予以重視。但對標本采

集的方法和時間，標本的來源，實驗室常不能加以控制，實驗室人員有責任通過

各種方式，指導醫(yī)師和護士正確采集標本。特制定以下原則，以便統一標準執(zhí)行。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【基本原則】

1.送檢報告單應注明被檢人的姓名、性別、年齡、臨床診斷、標本來源及檢驗

目的、抗生素使用情況，使實驗室正確選用相應的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。

2.盡量在抗生素使用前采集標本。

3.在采集血液、腦脊液、穿刺液等標本時，應嚴格無菌操作，避免雜菌污染。

4.標本采集后應立即送到實驗室，床邊接種可提高病原菌的檢出率。

5.以拭子采集的標本如咽拭子、傷口拭子或肛拭子等，最好采用運送培養(yǎng)基送

檢，應采用吸水性好、不宜干燥的材料取樣。

6.混有正常菌群的標本，如痰、尿、傷口拭子、不可置肉湯培養(yǎng)基送檢。

7.盛標本容器需經滅菌處理，但不得使用消毒劑。

編號：LC-S0P-GC-2

XX醫(yī)院血液及骨髓標本的采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導血液及骨髓標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.一般采血部位為肘靜脈，疑似細菌性心內膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為

宜。切忌在靜脈滴注藥物處（或一手滴藥，另一手采血）采集血標本；

2.選擇體溫上升時才血可提高陽性率。對正在使用抗菌藥物而又不能停藥的患

者，應在下次投入抗菌藥物前采集標本。

3.采集部位先以70%酒精擦拭。再用棉簽沾取2%碘酊涂于欲作穿刺處，讓其干

后再用70%酒精擦拭。

4.全部手續(xù)再作一此（如必要）。

5.采血量以培養(yǎng)液體積的1/10為宜，成人每次采血5T0ml,嬰幼兒每次采血

l-5ml;

6.骨髓采集:嚴格消毒后抽取骨髓0.5Tml

7.血液或骨髓抽出后過火，立即注入雙相血培養(yǎng)瓶，馬上充分混勻后，及時送

檢。

8.每列至少采血兩次，間隔時間據病情而定，以利于提高陽性率和區(qū)別感染菌

和皮膚污染菌。

編號：LC-S0P-GC-3

XX醫(yī)院呼吸道標本留取日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導呼吸道標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.痰液標本的采集以清晨為好，因此時痰量多，含菌量大。標本收集前，病人

必須用清水漱口數次，除去口腔內大部分雜菌。然后用力自氣管深部咳出痰

液于無菌器皿內，及時送檢?？忍禃r應盡量防止唾液及鼻咽部的分泌物混入,

以減少污染。

2.痰量極少者可用45℃10%氯化鈉霧化吸入導痰，一般以清晨第一口痰為好

3.檢查結核菌時，必要時可收集24小時痰液，以提高陽性率。

4.支氣管分泌物內含的細菌常能正確地反映出下呼吸道中的病理變化，標本的

采集應由專科醫(yī)生利用支氣管鏡直接從患者支氣管內采取。

5.咽拭采集:囑病人在留取標本之前，用清水反復漱口以減少正常菌群的污染,

將拭子越過舌根到咽后壁或懸壅垂后側，反復涂抹數次，注意避免拭子接觸

口腔和舌拈膜,置無菌容器中盡快送檢。

編號：LC-S0P-GC-4

XX醫(yī)院尿液標本留取日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導尿液標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.正常人尿液是無菌的，而尿液細菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染。正常人外尿

道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。而這些細菌又是尿路感染中常見的病源菌。

因此要作好尿液細菌學檢查，首先應注意標本收集問題。

2.中段尿采集：是臨床上最常用的方法。女病人先用肥皂水或0.1%高銃酸鉀水

溶液沖洗外陰部及尿道口，用無菌紗布擦拭,最后用手指將陰唇分開排尿；男

病人應翻轉包皮沖洗，用肥皂水或2%紅汞或0.1%新潔爾滅消毒尿道口，再

用無菌紗布或干棉球拭干，叫病人排尿。將尿液分成三段，第一段排掉，收

集中段尿3?5ml留入試管中，立即加塞蓋好送檢。

3.嬰兒則先消毒其陰部，將無菌小瓶直接對準尿道以膠布粘上固定于皮膚，待

排尿后立即送檢。

4.導尿管采集尿液：一般用無菌導尿管取得尿液10?15ml,盛3~5ml于無菌試

管中，不能混入消毒劑，否則影響細菌生長。雖該可減少污染，但由于導尿

有將微生物引入膀胱的危險，因此除非必要，應避免用此法。

5.對于留置導尿者，可用碘酒消毒尿道口處的導尿管壁，用無菌注射器斜穿管

壁抽吸尿液，或消毒后解開接口，棄去導尿管前段尿液，留無污染的膀胱內

尿液送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標本。

6.做結核菌培養(yǎng)的尿液標本，應收集24小時全部尿液，并將沉淀部分盛于潔

凈瓶內送檢。

7.嬰幼兒中段尿采集困難或培養(yǎng)結果與病情不符時，可經恥骨上皮膚穿刺采集

無污染的膀胱內尿液。

8.送檢標本以晨尿為佳，但室溫較高時，應采集即時尿液，但尿液在膀胱內至

少置留了4小時以上。

編號：LC-SOP-GC-5

XX醫(yī)院膿及創(chuàng)傷感染標本留取日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導膿及創(chuàng)傷感染標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.應首先用無菌生理鹽水清洗膿液及病灶的雜菌，再采集標本，以免影響檢驗

結果。

2.一般用棉拭子采取膿液及病灶的深部的分泌物，矮管也可以無菌手續(xù)采取組

織放入無菌試管內送檢。

3.膿腫標本以無菌注射器抽取為好，也可在切開排膿時，以無菌棉拭子采取，

也可以將沾有膿汁的最內層敷料放人無菌平皿中送檢。

4.厭氧菌感染的膿液常有腐臭應予注意。采集和運送標本是否合格，對厭氧培

養(yǎng)是否成功至關重要，特別要注意兩點：1.避免正常菌群所污染；2.由采集

至接種前盡量避免接觸空氣。標本采取完畢應立即送往細菌室檢測。如一時

來不及送，應在室溫內作暫短保存，一般認為不要冷藏，因冷藏對某些細菌

有害，而且在低溫時氧的溶解度較高。

編號：LC-S0P-GC-6

XX醫(yī)院生殘道分泌物標本采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導生殖道分泌物標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.尿道及尿道口標本:生理鹽水清洗局部后，將無菌棉拭子插入尿道口1-2cm,

停留10余秒,輕輕旋轉采集標本,置無菌容器中盡快送檢；

2.外陰糜爛、潰瘍標本：用無菌鹽水和手術刀清除潰瘍面，暴露出潰瘍基底，滲

出物積聚較明顯時，用拭子或吸管采集，置無菌容器中盡快送檢；

3.宮頸標本：用無菌鹽水濕潤窺陰鏡暴露宮頸，清除陰道和宮頸分必物，棄之,

輕壓宮頸使分必物流出用拭子采集，或用拭子插入宮頸管1—2cm,轉動并停

10—30s再取出，置無菌容器中盡快送檢；

4.陰道標本：先清除陰道表面的分泌物，棄之，然后在后穹窿或陰道上端采集

粘膜分泌物。

5.前列腺液:有醫(yī)生通過前列腺按摩獲取,置無菌容器中盡快送檢。

6.用于除去宮頸外粘液的拭子不宜作微生物培養(yǎng)，因其含有大量的陰道菌群。

編號：LC-SOP-GC-7

XX醫(yī)院糞便標本采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導糞便標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.糞便標本采集時應挑取有膿血、粘液部分的糞便2—3g；液狀糞便取絮狀物

盛于滅菌的廣口瓶中或臘狀紙盒中，并及時送檢和接種。

2.在無法獲得糞便時，可用無菌生理鹽水或增菌液濕潤直腸，將棉拭子插入肛

門4?5cm深處（小兒2?3cm）,輕輕轉動一周擦取直腸表面的粘液后取出，

盛入無菌試管或保存液中送檢。

編號：LC-S0P-GC-8

XX醫(yī)院穿刺液標本留取日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導穿刺液（胸、腹水、心包液、關節(jié)液）標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.各種穿刺液標本的留取應由臨床醫(yī)生以無菌穿刺術抽取，胸腹水抽取量一般

約為5一10ml,心包液、關節(jié)液等一般抽取量為1?5ml,將所得穿刺液盛

于含有無菌的試管中，立即送檢。

2.對易自凝的標本可用已添加抗凝劑的無菌試管，充分混勻，立即送檢。

3.也可將5Tom1的穿刺液無菌操作注射到雙相血培養(yǎng)瓶中送檢。

編號：LC-S0P-GC-9

XX醫(yī)院腦脊液、膽汁標本采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導腦脊液、膽汁標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

腦脊液、膽汁標本的采集方法應由醫(yī)生親自嚴格無菌操作，留在無菌試管內，注

意保溫，以防細菌死亡并立即送細菌室培養(yǎng)。

編號：LC-SOP_GC_10

XX醫(yī)院組織標本的采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導組織標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.表淺的感染組織和各種竇道標本可用棉簽擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手術

切除。對竇道和痰管應刮取深部管壁組織。

2.深部組織標本可經皮穿刺或手術切除。標本置無菌容器并加少量生理鹽水以

保濕度；或置肉湯增菌液，或置血平皿送檢。

3.尸體標本應予死后20小時內采取，以防腸道菌侵入引起污染。

4.作病原體分離的組織標本不可用福爾馬林固定。疑有污染的組織塊可用燒紅

的烙鐵燒灼其表面，或置沸水中5-10秒鐘使其表面變白消除污染后，再用

無菌器械切開組織，取中間部位組織送檢。

編號：LC-SOP_GC_11

XX醫(yī)院猙脈道管標本采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導靜脈道管標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.從病人體內拔出靜脈插管，用無菌技術剪去導管體外部分，體內段導管立即

置血平皿上作滾動涂布接種。不能作床邊接種者，將導管置含少量生理鹽水

的無菌試管內送檢。

2.也可將剪下的導管體內段置肉湯內增菌，但不能區(qū)分導管感染菌與少量定植

菌。

3.有些標本的微生物學檢驗在診斷感染或指導治療上無多大價值，如Foley導

管的尖端、惡露、嘔吐物、結腸造口術的滲出物等，一般不進行培養(yǎng)。

4.口腔及牙周損傷處、褥瘡及靜脈曲張?zhí)?、燒傷、淺層壞死及肛周膿腫等部位

標本，應先徹底清瘡后在取組織送檢。

5.沖洗用的道管、靜脈導管及動脈導管應在進入部位的皮膚消毒后，小心取出，

以無菌方法切區(qū)去皮膚外的短部，其余部分送檢。

編號：LC-SOP_GC_12

XX醫(yī)院眼耳及乳突分泌物標本采集日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

指導眼、耳及乳突分泌物標本的正確采集。

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.以無菌棉拭子采集眼分泌物、尤其是膿性分泌物及耳部膿汁置無菌試管中及

時送檢；

2.乳突炎患者標本在手術時采集。

編號：LC-SOP-GC-13

XX醫(yī)院樣本接收、核對、接種、培養(yǎng)日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

標本的質量是檢驗結果準確性與有效性的基礎，為使標本從病人到實驗室這一過

程受控，保證準確可靠的檢驗結果，特制定本程序。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.接收樣本：

核對各樣本號與申請單聯號是否一致，如不一致馬上與病房聯系以便作出

相應的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯系情況的記錄。核查各送檢樣本

是否符合要求。

1）痰液樣本：先看外觀、再直接涂片鏡檢，低倍鏡下見白細胞＞10個/LP,上

皮細胞＜25個/每個視野，為合格痰液。

2）無菌體液樣本：檢查各種無菌體液樣本的盛放器皿是否符合要求。

3）容易干燥的樣本：對一些容易干燥的樣本如大便、咽拭子、膿液拭子、泌尿

生殖道拭子等是否已經干燥。

對不符合要求的樣本必需與臨床聯系，以便作出相應處理，方法如聯號

不符的樣本。做好記錄。對符合的樣本進行接種，并注明日期。

2.樣本接種：

1）大便致病菌、三線，分區(qū)劃線接種于麥康凱平板；

2）血液、骨髓按要求采集直接注射于法國梅里埃雙相血培養(yǎng)瓶送檢；

3）支原體培養(yǎng)+藥敏，按支原體操作規(guī)程接種于支原體專用培養(yǎng)基；

4）衣原體檢測，按衣原體操作規(guī)程操作；

5）其它標本（痰液、咽拭子、腦脊液、各種無菌體液、膿液分泌物）分別接種血

平皿、麥康凱平板，分三區(qū)劃線接種；

對膿液、腦脊液等在接種的同時應對其沉渣進行革蘭染色，如有細菌立刻通

知臨床，并做記錄。

4樣本培養(yǎng)：

移種過的血平板、麥康凱平板、血液增菌培養(yǎng)瓶及支原體培養(yǎng)條板均置于

35.0℃的培養(yǎng)箱（HH.B1L420型）。

編號：LC-S0P-GC-14

XX醫(yī)院菌株的純化、鑒定、藥敏流程日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁

【目的】

明確菌株純化、鑒定、藥敏流程，指導檢測人員正確進行菌株的純化、鑒定、藥

敏操作。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1.查對昨天移種平板申請單，確定標本移種是否正確。

2.觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現有細菌生長，馬上涂片革蘭染色，將細菌的染

色特性及形態(tài)報告給臨床，并做好記錄，同時將陽性的血液增菌瓶移種到血

平板與麥康凱平板上，且用無菌棉簽沾取該陽性增菌液涂于MH培養(yǎng)基，依

革蘭染色，按NSSLS貼藥敏紙片，培養(yǎng)18-24小時（臨時報告）。

3.觀察平板，挑取可疑菌落涂片革蘭染色，并將菌落純化于血平板；

4.將前一天分純的細菌嚴格按照美國德靈MicroScan細菌分析系統操作手冊配

制菌懸液、加樣、置培養(yǎng)箱。

5.對一些不適合用儀器檢測藥敏的細菌，改用標準的K-B法進行檢測。碰到

異常的耐藥模式應要慎重，需重復試驗或送上一級單位確認后方可發(fā)出報

告，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克

雷伯菌屬、腸桿菌屬等。并加做特殊的藥敏紙片，并改用紙片法加以比較。

6.真菌用ATBFUNGUS2真菌藥敏條進行耐藥性檢測，嚴格按操作規(guī)程操作。

7.大便培養(yǎng)，對可疑菌用抗血清做凝集試驗，陽性的再做生化鑒定和藥敏試驗,

需血清凝集試驗與生化鑒定相符方可報告，否則要慎重。

編號：LC-S0P-GC-15

XX醫(yī)院普通MicroScan板接種培養(yǎng)流程日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共2頁

【目的】

明確普通G，、GMicroScan板接種培養(yǎng)流程，指導檢測人員正確進行普通G'、G

MicroScan板接種培養(yǎng)的操作流程。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【步驟】

1、標本按微生物室標準操作程序所推薦的方法進行收集、運送和初步離培養(yǎng)。

2、染色：挑取純培養(yǎng)細菌進行革蘭氏染色

1）革蘭氏陰性桿菌、弧菌：進行氧化酶實驗，記下實驗結果，選用陰性板NC21

2）革蘭氏陽性球菌：進行觸酶實驗，區(qū)分鏈球菌科（-）和微球菌科（+）,記

下實驗結果，選用陽性板PC12

3、接種：

①.接種的準備：

a）用取種針去接觸純菌落3、4次，讓頂端凹槽填滿菌，用CAP帽子抹去

多余菌，放接種水中蓋緊，充分混勻，備用。

b）挑選瓊脂平板上，形態(tài)相同的菌落移種于M-H液體培養(yǎng)基中，置35℃

溫箱中孵育4小時，用生理鹽水稀釋至相當于0.5麥氏濁度標準，或用

接中環(huán)挑取菌落，懸浮于生理鹽水中振蕩混勻后與標準化濁管比濁，調

整濁度至相當于0.5麥氏濁度標準，吸100ul菌懸液于25ml接種水中，

備用；

②.Microscan板的水化與接種：

要用的干板取出室溫平衡后，用無菌吸嘴吸取115ul菌懸液于相應的

Microscan板中。

4、加石蠟油：于孔下劃有一橫線的孔滴加2、3滴石蠟油。

陰性板NC21：7個孔（GLUURELYSH2sARGORNDCB）

陽性板PC12：2個孔（睡ARG）

5、貼封口膠紙：對革蘭氏陰性板，氧化酶（+）的板右上角9個孔貼封口膠（空

位為DCB孔）

CITTAROF/G

MALACEOF/B

ONPGCET闞

6、孵育：測試板上蓋一塊空板，35c非CO?培養(yǎng)箱孵育16-24小時。

7、檢查：從培養(yǎng)箱取出板

①檢查C孔（控制孔）須澄清；G孔（生長孔）混濁，有菌長。

（如不滿足上述條件，則不要判藥敏結果）

②革蘭氏陽性板：

aPGT孔(+)黃色

b以下9孔，有任意三個以上為(+)黃色

RAFLACTRE

MNSSORARA

RBSINCMAN

★以上兩個條件，任意一個符合即可加試劑叛讀結果。若以上兩個條件均不符合,

則需再孵育15-24小時。藥敏MIC結果需在16-24小時內判讀。

③革蘭氏陰性板：

a葡萄糖發(fā)酵菌：1)GLU=深黃色2)SUC=黃色或SOR=黃色

b葡萄糖非發(fā)酵菌：1)ARG=紫色和OF/G=黃色3)LYS=紫色

2)ARG=紫色和CET=混濁4)01^=紫色

★符合以上條件之一則可加試劑叛讀結果。若不符合，則需再孵育15-24小時。

藥敏MIC結果需在16-24小時內判讀。

8、加試劑：

革蘭氏陰性板：VP-40%K0H(VPl),5%a-蔡酚(NIT2)各一滴。

迎「0.8%對氨基苯磺酸(NIT1),0.5%a-蔡酚(NIT2)各一

滴。(5分鐘后判讀)。

TDA-10%Fecl3(TDA)一滴。

IND-柯凡奇試劑(IND)3滴。

革蘭氏陽性板：VP-40%K0H(VPl),5%a-蔡酚(VP2)各一滴。

NIT-0.8%對氨基苯磺酸(NIT1),0.5%a-蔡酚(NIT2)各一

滴。(5分鐘后判讀。)

PYR-肽酶試劑(PET)2滴。

★如果VP(-)須等到20分鐘后再確定VP是否真為陰性

9、拿掉封口劑。

10＞人工判讀，將生化反應和藥敏結果記錄在相應的Microscan結果記錄紙上。

編號：LC-S0P-GC-16

XX醫(yī)院判讀普通革蘭陽性板日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共2頁

【目的】

指導檢測人員正確進行普通革蘭陽性（G'MicroScan）板的結果判讀，保證檢驗

結果。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【普通G*MicroScan板陽性對照色卡】

VP1、VP2各一滴20分鐘

A

＞微球菌編碼

1

4CVNOVBEPGTLACNaCLPBSBAC

2MSPGROPTIS3URETRESORINUPRV

1NITIDXPHOARGMANMNSARARAFHEM

二鏈球菌編碼

NITI、NIT2”一滴5分鐘PEP二滴2分鐘

【步驟】

一、35℃非也培養(yǎng)箱孵育16-24小舟后，C孔（控制孔）須1清;G孔（生長

孔）混濁，有菌長，并符合以下條件之一則可加試劑判讀結果:

aPGT孔（+）黃色有沉淀

b以下9孔，有任意三個以上為（+）黃色

RAFLACTRE

MNSSORARA

RBSINCMAN

二、以上兩個條件均不符，則先判讀所有藥敏結果。記錄鑒定藥敏或生長試驗

CV、MS、NOV、NaCL、BAC和IDX、PHO、BL實驗結果，其它生化反應試驗再

孵育15-24小時后判讀。

三、普通G'MicroScan板々E化結果判斷：

試驗孔名稱陽性結果陰性結果

CVMSNaCL有生長（混濁）無生長（清）

OPTNOVBAC

PGRPHOPGT黃色（孔中有一點黃色即可）無色

（與NOV作對照）

試驗孔名稱陽性結果陰性結果

IDX藍色，灰色沉淀無色或白色沉淀

VP粉紅至紅色無色至褐色或極淡粉色

試驗孔名稱陽性結果陰性結果

BE暗棕色至黑色無色至亮棕色

PYR紅色或橙紅色黃色至橙色

ARG微球菌屬橙色，粉紅/紅色黃色至橙黃色

鏈球菌屬粉紅/紅色黃色至橙色

URE粉紅色（24H）黃色至橙色

RAFLACSORRBSINU黃色橙色至紅色

PRVTREARAMNSMAV

BL無色蘭色至黑色

NIT粉紅至紅色無色或淡粉色

HEMB-溶血無B-溶血

LOC儀器識別反應板類型用

四、MIC藥敏結果的判讀：

1.所有的藥敏，CV、MS、NOV、NaCL、OPT和BAC的結果以黑色為背景判讀；

2.以最開始出現生長抑制的最低濃度孔記錄為MIC；

3.當所有孔均不出現細菌生長，MIC記錄為小于等于最低濃度；

4.當所有孔均出現細菌生長,MIC記錄為大于最高濃度；

5.當不出現細菌生長的濃度孔出現于細菌生長的濃度孔梯度孔中，譬如，細菌

在1、2、和8ug/ml濃度孔中生長，但在4ug/ml孔中不生長，此孔則稱為跳

孔，這個濃度孔結果應被忽略。

五、生化和藥敏結果均記錄在手工記錄紙上：

Microscan陽性復合板PC12結果記錄：

病人：床號：記錄時間：

鑒定結果：

4CVNOVVPBEPGTLACNaCLPBSBAC

2MSPGROPTPYRURETRESORINUPRV

1NITIDXPHOARGMANMNSARARAFHEM

鑒定值

藥敏結果:

T/SRifOxAugTeImp

AmPCfVaECla

CfzCdGmCftCpNxn

FdTFGSTSGMSB-Lac

編號：LC-S0P-GC-17

XX醫(yī)院判讀普通革蘭陰性板日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共2頁

【目的】

指導檢測人員正確進行普通革蘭陰性(GMicroScan)板的結果判讀，保證檢驗

結果。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【普通GMicroScan板陽性對照色卡】

葡萄糖發(fā)酵菌編碼TDA一滴3分鐘NITI、NIT2各一滴5分鐘

1、_

4GLURAFINOURELYS■■CITCL>4TAROF/GCL>4

2SUCRHAADOARGMALCF>8ACEP>4Fd>64OXI

1SORARAMEL■]ORNONPGOXICETK>4To>4

葡萄糖非發(fā)酵菌編碼.

_________V1______________________

IND三滴5分鐘VP1、VP2各一滴20分鐘

【步驟】

一、35℃非CO?培養(yǎng)箱孵育16-24小時后，C孔(控制孔)須澄清；G孔(生長

孔)混濁，有菌長，并符合以下條件之一則可加試劑叛讀結果：

1、葡萄糖發(fā)酵菌：1)GLU=深黃色2)SUC=黃色或SOR=黃色

2、葡萄糖非發(fā)酵菌：1)ARG=紫色和OF/G=黃色3)LYS=紫色

2)ARG=紫色和CET=混濁4)0RN=紫色

二、以上條件均不符，則先判讀所有藥敏結果。記錄鑒定藥敏CL4；Cf8、P4、

K4、FD64和CET實驗結果，其它生化反應試驗再孵育15-24小時后判讀。

三、普通GMicroScan板生化結果判斷:

試驗孔名稱陽性結果陰性結果

GLU深黃色橙紅色

SUCRAFINOSOR黃色、橙黃色紅色

RHAADOARAMEL

URE洋紅、粉紅色黃、橙黃或淡粉紅色

H2S黑色有沉淀沒變黑

IND粉紅至紅色澄清、橙色

LYSORNARG發(fā)酵菌紫色至灰色黃色

(DCB為對照孔)非發(fā)酵菌紫色無色或灰色

試驗孔名稱陽性結果陰性結果

TDA暗棕色黃色至橙色

ESC棕色至黑色澄清

VP紅色澄清

ONPG淺黃色澄清

CITTARMALACE藍色至藍綠色綠色至黃色

OF/G若OF/B為綠色黃色綠色至藍色

若OF/B為藍色或藍綠色黃色至綠色藍色

NIT紅色無色或淡粉色

P4K4CL4Cf8CET有生長（混濁）無生長（清）

LOC儀器識別反應板類型用

四、MIC藥敏結果的判讀：

6.所有的藥敏，CV、MS、NOV、NaCL、OPT和BAC的結果以黑色為背景判讀；

7.以最開始出現生長抑制的最低濃度孔記錄為MIC；

8.當所有孔均不出現細菌生長，MIC記錄為小于等于最低濃度；

9.當所有孔均出現細菌生長,MIC記錄為大于最高濃度；

10.當不出現細菌生長的濃度孔出現于細菌生長的濃度孔梯度孔中，譬如，細菌

在1、2、和8ug/ml濃度孔中生長，但在4ug/ml孔中不生長，此孔則稱為跳

孔，這個濃度孔結果應被忽略。

五、生化和藥敏結果均記錄在手工記錄紙上：

Microscan陰性復合板NC21結果記錄

病人：床號：記錄時間：

鑒定結果：

4GLURAFINOURELYSTDACITCL>4TAROF/GCL>4NIT

2sueRHAADOH2SARGESCMALCF>8ACEP>4Fd>64OXI

1SORARAMELINDORNVPONPGOXICETK>4To>4

鑒定值

藥敏結果:

A/SAmCfP/TPiAzt

CfzCfxCpCpdCrmCax

CazCftCpeT/SGmTo

ImpAkESBL

編號：LC-S0P_GC-18

XX醫(yī)院普通Microscan板報告日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共2頁

【目的】

明確普通Microscan板報告的操作流程，指導檢測人員正確進行普通Microscan

板的細菌查詢、英文報告生成與傳送、中文報告檢索生成與打印。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

［步驟］

一、英文資料輸入（測定結果）

1、打開電腦電源，自檢通過后，電腦屏幕顯示

Fl=Standardbootofbootablepartition

F2=CCIConcurrentDOSMicroscan

按HF23鍵進入MicroScan英文系統

二、細菌鑒定板判讀和細菌查詢

1、完成板加試劑判讀，記錄生化反應和藥敏結果；

2、根據生化反應生成6-9位編碼；

3、進入儀器第四平臺：同時按KCtrl』和進入

革蘭氏陰性發(fā)酵菌和孤菌（氧化酶陰性）選擇KU；

革蘭氏陰性非發(fā)酵菌和遲緩酵菌（氧化酶陽性）選擇K2』；

革蘭氏陽性鏈球菌和腸球菌（觸酶陰性）選擇D53；

革蘭氏陽性葡萄球和微球菌（觸酶陽性）選擇K163；

根據編碼檢索，確定細菌名和代碼記錄。

三、資料輸入

1、DMS主菜單輸入KU按RENTER1鍵，選擇第一項（DatdEnrtyandEdit）

進入；

第一頁輸入樣本編號（SpecimemNO.）：一般輸入8為號碼,如：02080101；

樣本來源（Source）：如輸入K5］為痰液，輸入（3』為尿液，（可

按KF31鍵查看）

按（PageDown］］鍵進入第二頁（按［［PageUp3鍵返回第一頁）

第二頁輸入菌株號（Iso/ResNO.）：輸入H13（同一標本分離的第二

菌株輸入K21）

測試板類型（PansType）：輸入口》為G板，輸入（2》為G板，

菌名代碼（Orgabism）：輸入第四平臺查詢得到地菌名代碼；

測試日期（TestDate）：輸入為當天日期，m為昨天日

期；

增加試驗（ExtraTesst）：按要求輸入TFGESBLsBL等（+/-/*）；

STSGMS（R/S）

藥敏結果（MICs）：輸入檢測藥敏結果；

完成菌株和藥敏資料輸入后按KF103保存當前頁，可繼續(xù)輸入同一病人

分離的另外菌株資料，或按KF6D保存前后兩頁資料，并進入下一病人資

料輸入。完成所有資料輸入后同時按KCtrl+FlO》保存退出。

四、英文報告?zhèn)魉?/p>

1、確定任務：傳送英文報告，進入第二平臺：同時按KCtrl3和K2』；

DMS主菜單輸入K33按KEnterD鍵，選擇第三項進入；

2、選擇報告格式和內容：

Selectedby:輸入K3D按HEnter］］鍵，使用測試日期；

TypeofReport:輸入鍵，選擇長報告格式；

Sortedby:輸入K1D按KEnter1］鍵，選擇樣品編號；

TypeofResult:輸入按HEnter］］鍵，選擇所有結果；

輸入m或m按kEnter』鍵，選擇是否包括打印過的資料；

輸入E23按(Enter1鍵，選擇長報告不包括總結頁；

3、檢索結果范圍：

輸入起止樣品編號，按HEnterl］鍵確定；

輸入起止測試日期，直接按KEnterll鍵選擇當天結果；

4、查看和打印/傳送報告：

輸入K2D或H33按KEnterD鍵，查看選擇結果；

輸入口』按KEnterD鍵，確認準備完成后再按HEnterU鍵打印可傳

送；

5、退出：完成后連續(xù)按KEsc3+［Enter1三次，返回到主菜單。

6、完成當天工作后，確認第一和第二平臺都處于主菜單(MainMenu)下,

輸入K1OX按1Enter』退出到C：\DMS\；可以關閉或重啟電腦

五、中文報告檢索生成和打印

1、完成步驟四報告?zhèn)魉秃?，重新啟動電腦，屏幕出現提示：

Fl=Standardbootofpartition

F2=CCIConcurrentDOSMicroscan

2、按KFl1鍵進入Windows中文系統；

3、運行微生物中文報告系統，輸入病人資料后進行檢索，確認結果；

4、無菌報告在中文系統手工輸入生成

5、審核后打印報告。

編號：LC-S0P-GC-19

XX醫(yī)院常見標本培養(yǎng)結果解釋日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共2頁

【目的】

由于微生物標本采集過程中正常菌群及環(huán)境微生物的污染(特別是醫(yī)院感染時的

許多分離菌均是機體正常的菌群)，因而對許多感染標本的培養(yǎng)結果應作綜合分

析，而不能籠統將所有培養(yǎng)分離出的細菌均認為是感染的病原菌。特別是醫(yī)院感

染，由于抗生素的應用等因素導致菌群失調，定植治病菌污染感染部位標本甚為

多見，其給醫(yī)院感染的病原學診斷帶來困難，為提高疾病診斷的正確性，確認感

染病原菌而制定本程序。

【適用人員】

臨床微生物實驗室檢驗人員

【該SOP變動程序】

本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員

批準簽字：專業(yè)主管、科主任。

【血液結果解釋】

1.通常血培養(yǎng)分離的細菌或真菌，可認為是血液感染的病原菌。但如為表皮葡

萄球菌、類白喉棒狀桿菌等皮膚常居菌，則連續(xù)兩次培養(yǎng)為同種菌方可確定。

血培養(yǎng)為枯草桿菌則污染可能性大。

2.如為靜脈插管病人，血中培養(yǎng)一次陽性，且選用相應敏感抗生素治療有效時，

也可認為是病原菌。

【尿液結果解釋】

1.中斷尿分離的革藍陰性菌濃度＞l()5cFU/ml,革藍陽性球菌＞l()4cFU/ml可

認為是感染的病原菌，反之污染的可能性大。真菌或腸球菌濃度〉

1000-10000CFU/ml可認為是感染菌。

2.已用抗菌藥物或經導尿管采集的尿液，多次尿培養(yǎng)為單一的同種菌，細菌濃

度雖未達到上述界限，也可認為是感染菌。

3.尿培養(yǎng)顯示濃度超過上述界限，但有兩種以上細菌或真菌時，應考慮污染的

可能。

4.恥骨上穿刺尿標本分離出細菌，不管量是多少均有臨床意義。

5.無菌生長的膿性尿表明有腎結核的可能，應建議進行接和結核菌檢查。

【痰液結果解釋】

1.外觀干燥或僅為唾液者屬不合格，應要求重留。

2.半定量培養(yǎng)結果的臨床意義

各區(qū)菌落數目相當于菌落數

級別臨床意義

第一區(qū)第二區(qū)第三區(qū)(CFU/ml)

極少量+<10<10'多為污染菌

少量++>10<5105污染可能性大，建議重復培養(yǎng)

中等量+++>10>5<5106感染可能性大，建議重復培養(yǎng)

大量++++>10>5>5210，多為感染病原菌

3.經篩選的痰液(白細胞＞10個/LP,磷狀上皮細胞＜25個/LP)連續(xù)兩次分

離出相同的病原菌。

4.痰液與血液或胸水中分離到相同病原體，有診斷意義。

5.如經纖維支氣管鏡或人工氣道采集的標本分離出濃度為lOkfu/ml的致病菌

或條件致病菌即有意義。

6.呼吸道標本中檢到特殊的病原體，如結核桿菌、軍團菌即有意義。

【皮膚和軟組織結果解釋】

感染部位引流物或吸引物培養(yǎng)出病原體，如為皮膚正常菌群（如表皮葡萄球菌或

微球菌），則需為純培養(yǎng)。

編號：LC-SOP_GC_20

XX醫(yī)院KB法藥敏試驗日期：22年4月25日

臨床微生物實驗室標準操作程序版號：2022-4

第1頁，共1頁