第六章紫外吸收光譜分析

第六章紫外吸收光譜分析第一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)光的基本性質

一、光學分析法（一）光學分析法依據(jù)物質發(fā)射的電磁輻射或物質與電磁輻射相互作用而建立起來的各種分析法的統(tǒng)稱。

第二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（二）分類：1．光譜法：利用物質與電磁輻射作用時，物質內部發(fā)生量子化能級躍遷而產(chǎn)生的吸收、發(fā)射或散射、輻射等電磁輻射的強度隨波長變化的定性、定量分析方法按能量交換方向分吸收光譜法發(fā)射光譜法按作用結果不同分原子光譜→線狀光譜分子光譜→帶狀光譜第三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2．非光譜法：利用物質與電磁輻射的相互作用測定電磁輻射的反射、折射、干涉、衍射和偏振等基本性質變化的分析方法分類：折射法、旋光法、比濁法、χ射線衍射法3．光譜法與非光譜法的區(qū)別：光譜法：內部能級發(fā)生變化

原子吸收/發(fā)射光譜法：原子外層電子能級躍遷分子吸收/發(fā)射光譜法：分子外層電子能級躍遷非光譜法：內部能級不發(fā)生變化僅測定電磁輻射性質改變

第四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五3、發(fā)射光譜4、吸收光譜例：γ-射線；x-射線；熒光例：原子吸收光譜，分子吸收光譜第五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五二、光譜法儀器——分光光度計主要特點：五個單元組成光源單色器樣品池檢測器記錄裝置第六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五三、光的基本性質

光是一種電磁波，具有波動性和微粒性

1、波動性

2、微粒性

第七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五

例如：

為200nm的光，一個光量子的能量是：由于光量子能量?。?0-19J），因此定義：1eV（電子伏）=1.602110-19J則第八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第二節(jié)紫外吸收光譜的基本原理

一、分子吸收光譜的產(chǎn)生

能級：電子能級、振動能級、轉動能級①價電子運動：電子繞原子核作相對運動②原子振動：分子中原子或原子團在其平衡位置上作相對振動③分子轉動：整個分子繞其重心作旋轉運動④分子平動：躍遷：電子受激發(fā)，從低能級轉移到高能級的過程第九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五E分子=E電子+E振動+E轉動+E平動式中：E電子――代表分子中電子躍遷的能量E振動――代表分子的振動能量E轉動――代表分子的轉動能量，和分子的轉動慣量有關E總――代表分子的總能量E平動――代表分子的平動能量，只和溫度有關，對分子吸收光譜意義不大，可以不考慮第十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五

按照量子力學的觀點，分子吸收外界能量時，只能吸收等于兩個能級之差的能量，否則不能被吸收。

式中：E2――終止態(tài)的能量E1――起始態(tài)的能量△E――光子的能量第十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五雙原子分子能級示意圖

第十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五分子的“電子光譜”是由許多線光譜聚集在一起的帶光譜組成的譜帶，稱為“帶狀光譜”。由于各種物質分子結構不同對不同能量的光子有選擇性吸收吸收光子后產(chǎn)生的吸收光譜不同利用物質的光譜進行物質分析的依據(jù)。第十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五二、光的吸收定律

當一束平行的單色光照射均勻的有色溶液時，光的一部分被吸收，一部分透過溶液，一部分被比色皿的表面反射。如果入射光的強度為I0，吸收光的強度為Ia，透過光的強度為It，反射光的強度為Ir，則:I0＝Ia＋It＋Ir

第十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五在吸光光度法中，由于采用同樣質料的比色皿進行測量，反射光的強度基本上相同，其影響可以相互抵消，上式可簡化為:I0＝Ia

＋It透過光的強度It；與入射光的強度Io比之比稱為透光度或透光率，用T表示。

T＝It/Io第十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（1）Lambert

定律

當一束單色光通過濃度一定的溶液時，液層厚度愈大，光線強度減弱愈顯著。第十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（2）Beer定律

當一束單色光通過液層厚度一定的溶液時，溶液的濃度愈大，光線強度減弱愈顯著。第十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五

令：A=-logT，A定義為吸光度

A=-logT=ELC第十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五例1.有一單色光通過厚度為1cm的有色溶液,其強度減弱20%。若通過5cm厚度的相同溶液,其強度減弱百分之幾?解：lgT1

c1

─────=───lgT25c1

lgT2=5lgT1=5×lg0.80=-0.485

T2=32.7%,即減弱67.3%第二十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五吸光度具有加和性。A總＝Aa+Ab+Ac+…。應用;①進行光度分析時，試劑或溶劑有吸收，則可由所測的總吸光度A中扣除，即以試劑或溶劑為空白的依據(jù)；②測定多組分混合物；③校正干擾。

第二十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、吸光系數(shù)定性的依據(jù):在一定條件下（如單色光波長，溶劑一定、溫度一定等），不同物質對同一波長的單色光，可以有不同的吸光系數(shù)。定量的依據(jù):在稀溶液的條件下，液層厚度一定時，吸光度和濃度呈線性關系，此時吸光系數(shù)是斜率，其值越大，靈敏度越高。

第二十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（1）摩爾吸光系數(shù)ε：含義：指濃度為1mol/L的溶液，在液層厚度為1cm時的吸光度。ε〉104，為強吸收ε102～104，為中強吸收ε〈102，為弱吸收（2）比吸收系數(shù)或稱為百分吸收系數(shù)，含義：指濃度為1％（w/v）的溶液，用厚度為1cm吸收池時的吸光度第二十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五例：氯霉素（Mr＝323.15）的水溶液在278nm有最大吸收。假設用純品配制100ml含2.00mg的溶液，以1.00cm厚的吸收池在278nm處測得透光率為24.3％。求吸光度A和吸光系數(shù)ε、。解：A=-logT=-log0.243=0.614

第二十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五3、引起偏離Lambert-Beer定律的因素

（1）吸收定律本身的局限性

只有在稀溶液中才能成立（2）化學因素

溶液中的溶質可因c的改變而有離解、締合、配位以及與溶劑間的作用等原因而發(fā)生偏離L-B定律的現(xiàn)象。第二十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（3）儀器因素（非單色光的影響）

目前各種方法所得到的入射光是具有一定波長范圍的波帶，而非單色光單色光的純度愈差，吸光物質的濃度愈高，偏離朗伯-比耳定律的程度愈嚴重。（4）其它光學因素①散射和反射②非平行光第二十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五三、電子躍遷的類型

價電子

成鍵的價電子σ電子→飽和的σ鍵π電子不飽和的π鍵非成鍵的價電子n電子軌道

電子圍繞原子或分子運動的幾率軌道不同，電子所具有能量不同

基態(tài)與激發(fā)態(tài)：電子吸收能量，由基態(tài)→激發(fā)態(tài)預備知識：第二十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五

兩個氫原子形成一個氫分子時，兩個氫原子上的S電子形成鍵后能量降低了，成為更穩(wěn)定的狀態(tài)――成鍵軌道，以表示分子外層還有一種更高的能級存在，稱為反鍵軌道，以*表示

成鍵軌道與反鍵軌道：σ<π<n<π*<σ*低→高第二十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五外層電子的躍遷類型：

1、→*躍遷→*的能量差大所需能量高吸收峰在遠紫外(<150nm)飽和烴（甲烷，乙烷）在UV測定中作為溶劑，如己烷、庚烷、環(huán)己烷等。第二十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、n→*躍遷n軌道的能量〉成鍵軌道，吸收波長增大，一般在150～250nm間。含有雜原子團如：-OH，-NH2，-X，-S等的有機物分子中除能產(chǎn)生→*躍遷外，同時能產(chǎn)生n→*躍遷例如：三甲基胺(CH3)3N-的n→*吸收峰在227nm，約為900L/mol·cm，屬于中強吸收。第三十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五3、→*躍遷

→*能量差較小所需能量較低吸收峰紫外區(qū)(200nm左右)不飽和基團（—C＝C—，—C＝O）或體系共軛，E更小，λ更大

第三十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五4、n→*躍遷含有雜原子的不飽和基團，如-C=O，-CN等的化合物，在雜原子上有未成鍵的n電子，能級較高。激發(fā)n電子躍遷到*，即n→*躍遷所需能量較小，λ200~700nm（近紫外區(qū)）

第三十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五→*>n→*

→*>n→*200nm以下150～250nm200nm200～700nm

第三十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第三節(jié)有機化合物的紫外吸收光譜一、紫外吸收光譜曲線的表示方法第三十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五二、紫外光譜中常用的光譜術語

1、發(fā)色團和助色團（1）生色團（發(fā)色團）：具有軌道的不飽和官能團稱為發(fā)色團有機化合物：具有不飽和鍵和未成對電子的基團具n電子和π電子的基團產(chǎn)生n→π*躍遷和π→π*躍遷躍遷E較低例：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—

第三十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五注：當出現(xiàn)幾個發(fā)色團共軛，則幾個發(fā)色團所產(chǎn)生的吸收帶將消失，代之出現(xiàn)新的共軛吸收帶，其波長將比單個發(fā)色團的吸收波長長，強度也增強第三十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（2）助色團：本身無紫外吸收，但可以使生色團吸收峰加強同時使吸收峰長移的基團有機物：連有雜原子的基團例：—OH，—OR，—NH2，—NR2—，—X當這些基團單獨存在時一般不吸收紫外-可見區(qū)的光輻射。但當它們與具有軌道的生色基團相結合時，將使生色團的吸收波長長移（紅移），且使吸收強度增強（助色團至少要有一對與生色團電子作用的孤對電子）第三十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、紅移和藍移由于化合物結構變化（共軛、引入助色團取代基）或采用不同溶劑后

吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）

吸收峰位置向短波方向移動，叫藍移（紫移，短移）3、增色效應和減色效應

增色效應：吸收強度增強的效應減色效應：吸收強度減小的效應

第三十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五4、吸收帶（1）R帶：由含雜原子的不飽和基團的n→π*躍遷產(chǎn)生C＝O；C＝N；—N＝N—

E小，λmax250～400nm，εmax<100溶劑極性↑，λmax↓→藍移（短移）第三十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（2)K帶：由共軛雙鍵的π→π*躍遷產(chǎn)生(—CH＝CH—)n

—CH＝C—CO—

λmax>200nm，εmax>104共軛體系增長，λmax↑→紅移，εmax↑溶劑極性↑，對于—(—CH＝CH—)n—λmax不變對于—CH＝C—CO—λmax↑→紅移第四十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五3．B帶：由π→π*躍遷和苯環(huán)的振動的重疊引起的產(chǎn)生芳香族化合物的主要特征吸收帶λmax=254nm，寬帶，具有精細結構；εmax=200極性溶劑中，或苯環(huán)連有取代基，其精細結構消失第四十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五4．E帶：由苯環(huán)環(huán)形共軛系統(tǒng)的π→π*躍遷產(chǎn)生芳香族化合物的特征吸收帶E1180nmεmax>104（常觀察不到）E2200nmεmax=7000強吸收苯環(huán)有發(fā)色團取代且與苯環(huán)共軛時，E2帶與K帶合并一起紅移（長移）第四十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五有機化合物結構與紫外信息的關系（1）200-400nm無吸收峰。飽和化合物，單烯。（2）270-350nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮n→π*躍遷產(chǎn)生的R帶。（3）250-300nm有中等強度的吸收峰（ε=200-2000），芳環(huán)的特征吸收（具有精細解構的B帶）。（4）200-250nm有強吸收峰（ε104），表明含有一個共軛體系（K）帶。

不飽和醛酮：K帶230nm，R帶310-330nm260nm,300nm,330nm有強吸收峰，3,4,5個雙鍵的共軛體系。第四十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第四節(jié)影響紫外光譜的因素

1．溶劑效應：對λmax影響：n-π*躍遷：溶劑極性↑，λmax↓藍移π-π*躍遷：溶劑極性↑，λmax↑紅移第四十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五對吸收光譜精細結構影響

溶劑極性↑，苯環(huán)精細結構消失溶劑的選擇——極性；純度高；截止波長<λmax第四十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2．pH值的影響：影響物質存在形式，影響吸收波長例：苯胺，以乙醇作溶劑，λmax為230nm以稀酸作溶劑，λmax為203nm利用溶劑pH值不同對光譜的影響，可以測定化合物結構中的酸性或堿性基團

第四十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五3、超共軛效應在共軛體系中，如果存在烷基取代，則烷基的C-H鍵的σ電子和共軛體系的π電子會產(chǎn)生重疊，使電子活動范圍擴大，躍遷能量降低，吸收峰波長向長波長方向移動，這種作用為超共軛效應。4、助色效應助色團和某些生色團相連時，使吸收波長λmax紅移，吸收強度增大，這種效應稱為助色效應。第四十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第五節(jié)紫外－可見分光光度計

第四十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五一、光源：提供入射光的裝置光源的發(fā)光面積應該小，同時應附有聚光鏡把光聚集在單色器的進光狹縫。1、鎢燈:作為可見光源，適用范圍為350～1000nm2、氫燈或氘燈作為紫外光源，是一種氣體放電發(fā)光的光源，發(fā)射200～400nm的連續(xù)光譜，第四十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五二、單色器：包括狹縫、準直鏡、色散元件第五十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五1、色散元件功能：把混合光分散為單色光的元件棱鏡——對不同波長的光折射率不同分出光波長不等距色散元件長區(qū)密，短區(qū)疏光柵——衍射和干涉分出光波長等距第五十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、準直鏡準直鏡是以狹縫為焦點的聚光鏡。3、狹縫入口狹縫：限制雜散光進入出口狹縫：使色散后所需波長的光通過。狹縫的寬度對分光質量影響：狹縫過寬，單色光不純；狹縫太窄，則光通量小，靈敏度降低

第五十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五三、吸收池：玻璃——能吸收UV光，僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)要求：匹配性（對光的吸收和反射應一致）四、檢測器：將光信號轉變?yōu)殡娦盘柕难b置光電換能器，是把所接受到的光信號轉變成電信號的元件

常用的有：光電管和光電倍增管第五十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五1、光電管90VDC直流放大陰極R-+光束e陽極絲（Ni）抽真空

陰極表面可涂漬不同光敏物質產(chǎn)生的光電流約為硒光電池的1/10。優(yōu)點：阻抗大，電流易放大；響應快；應用廣。缺點：有微小暗電流（Darkcurrent，40K的放射線激發(fā)）。第五十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五900Vdc90V123456789陽極陰極石英封讀出裝置R光電倍增管（PMT）電路圖優(yōu)點：高靈敏度；響應快；適于弱光測定，甚至對單一光子均可響應。缺點：熱發(fā)射強，因此暗電流大，需冷卻（-30oC)。不得置于強光(如日光)下，否則可永久損壞PMT！2、光電倍增管第五十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五五、顯示器光電管輸出的光電流很小，需要經(jīng)過放大后才能以某種方式將測定結果顯示出來。常用的顯示裝置有:檢流計、曲線掃描、熒光屏顯示等，數(shù)據(jù)工作站。電表指針、數(shù)字顯示、熒光屏顯示等；顯示方式：A、T(%)、c等第五十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五

第六節(jié)紫外吸收光譜的應用

一、定性分析吸收光譜的形狀吸收峰的數(shù)目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強度相應的吸光系數(shù)定性鑒別的依據(jù)－吸收光譜的特征第五十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(一）比較吸收光譜法根據(jù)化合物吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目、強度、位置進行定性分析待測樣品相同條件樣品譜標準物質標準譜（二）計算max的經(jīng)驗規(guī)律第五十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五二、有機化合物分子結構的推斷1.推測官能團200～280nm無吸收不含不飽和鍵，不含苯環(huán)，可能是飽和化合物210～250nm強吸收ππ*，2個共軛單位

260～350nm強吸收ππ*，3—5個共軛單位

270～350nm弱吸收nπ*，無強吸收，孤立含雜原子的雙鍵C=O,-NO2,-N=N-

260nm（230～270）中吸收ππ*，有苯環(huán)第五十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、異構體的判斷（1）順反異構體的判斷生色團和助色團處在同一平面上時，才產(chǎn)生最大的共軛效應。由于反式異構體的空間位阻效應小，分子的平面性能較好，共軛效應強。因此，反式異構體的吸收峰波長及強度都大于順式異構體的吸收峰波長及強度。順式

280nm13500反式

295nm27000肉桂酸第六十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(2)互變異構體的判斷例如：乙酰乙酸乙酯就是酮式和烯醇式兩種互變異構體：酮式異構體沒有共軛體系，在近紫外光區(qū)沒有強吸收，只是在為272nm(ε為16)處有弱吸收，是n－π*躍遷所產(chǎn)生R吸收帶。烯醇式異構體有共軛體系，所以在近紫外有強吸收，為243nm(ε為16000)，是π－π*躍遷共軛體系的K吸收帶。第六十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五兩種異構體的互變平衡與溶劑有密切關系

在極性溶劑如水中在非極性溶劑如乙烷中，由于形成分子內的氫鍵

第六十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五三、定量分析應用范圍：無機化合物，測定主要在可見光區(qū)，大約可測定50多種元素有機化合物，主要在紫外區(qū)1.單組分物質的定量分析測定條件：選擇合適的分析波長（λmax）A：0.2～0.8選擇適當?shù)膮⒈热芤旱诹?，共八十七頁，編輯?023年，星期五（1）比較法：在一定條件下，配制標準溶液和樣品溶液，在λmax下測A標準溶液As=κCsL被測溶液Ax=κCxLCx=CsAx/As注意：Cs與Cx大致相當?shù)诹捻?，共八十七頁，編輯?023年，星期五（2）標準曲線法AλCXAX配制一系列（5～10）個不同濃度的標準溶液，在適當

——通常為max下，以適當?shù)目瞻兹芤鹤鲄⒈?，分別測定A，然后作A-c曲線。同條件下測定試樣溶液吸光度Ax，查找對應的cx

。第六十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2.多組分物質的定量分析（只討論2組分）在某特定波長下測定A總=A1+A2+A3+……吸光度加和性（1）吸收光譜互不重疊在1處測a組分，b組分不干擾在2處測b組分，a組分不干擾第六十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(2)第二種情況:部分重疊在1處a、b組分都吸收在2處b組分吸收，a組分不干擾A1a+b=A1a+A1b

A2b=E2

bCbLab1

2第六十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（3）第三種情況:兩吸收曲線互相重疊第一法：解方程組選定兩個波長1及2，測得試液的吸光度為A1和A2，則可解方程組求得組分a、b的濃度ca、cb：在1處：

在2處第六十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第二法：等吸光度雙波長（消去）法找等吸收度點第六十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五第七十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五四、光度法顯色反應條件和測量條件的選擇（一）影響顯色反應的因素及反應條件的選擇1、顯色反應的選擇（1）選擇性好：干擾少或易排除；（2）靈敏度高（S）：尤其是對低含量組分，一般選擇：104～105L/mol·cm（3）有色化合物穩(wěn)定、組成恒定（4）有色化合物與顯色劑的顏色差別大

第七十一頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五2、影響顯色反應的因素及反應條件(1)顯色劑的用量被測物質與顯色劑的反應可用下列一般式表示：M十R＝MR（被測物）（顯色劑）（有色配合物）為了使顯色反應盡可能完全，一般應加入過量的顯色劑。如果配合物穩(wěn)定度高，而且在一定條件下能保持穩(wěn)定，顯色劑不必大量過量。在分析實踐中，由于待測物質的濃度未知，稍過量的顯色劑是必要的。第七十二頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(2)溶液的酸度①酸度對顯色劑濃度的影響

所用的顯色劑不少是有機弱酸（以HR表示），酸度提高則平衡傾向于生成HR，使R的實際濃度降低，不利于顯色反應的進行。因此。顯色時溶液的酸度不能高于某一限度。此外，在不同的酸度下，R的濃度不同，有時可引起有色配合物配位數(shù)的改變。

第七十三頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五②酸度對被測離子形態(tài)的影響

當被測離子是容易水解的金屬離子時，若酸度低于某一限度，被測離子形成羥基配合物、多核羥基配合物、堿式鹽或氫氧化物沉淀，不利于光度分析。第七十四頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五③對顯色劑顏色的影響許多有機顯色劑具有酸堿指示劑的性質，隨著pH的改變，顯出不同的顏色，在選擇酸度時必須考慮這種情況。例如

H2RH++HRH＋R2-

（黃色）（橙色）（紅色）pH6.9pH12.4第七十五頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(3)顯色時間

有些顯色反應能瞬間完成，且有色化合物的顏色很快達到穩(wěn)定狀態(tài)，在較長時間內保持不變有些顯色反應雖能迅速完成，但由于空氣的氧化、光的照射或其他原因使有色化合物的顏色逐漸減退有些顯色反應需要一定時間才能完成

第七十六頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五(4)顯色溫度①對顯色反應速度的影響。反應速度常隨溫度的升高而加快。②由于溫度的升高可能導致某些有色配合物發(fā)生分解或氧化還原反應，因而會使有色配合物破壞而不利于光度測定。

第七十七頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五③溫度升高會引起有色配合物離解度的增大，使其穩(wěn)定性降低而導致吸光度下降。④溫度變化會使有色配合物的摩爾吸光系數(shù)改變，從而使吸光度發(fā)生改變。在分析實踐中，并不是每一顯色反應都同時存在上述四個方面的影響。通過繪制吸光度一溫度曲線可以確定反應的適宜溫度。第七十八頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（5）溶劑通常，水溶性有色配合物因加入適當有機溶劑，使溶液的介電常數(shù)降低，使配合物離解度減小，或穩(wěn)定性增大。有時，可增大速度第七十九頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五（二）分光光度法測量誤差及實驗條件的選擇

誤差可能來自光源的電壓不穩(wěn)定，光電元件靈敏度的變化和儀器刻度讀數(shù)不準確等。如果測量時透光率讀數(shù)的絕對誤差是ΔT，對于同一臺儀器，它基本上是常數(shù)。但由于吸光度與透光率之間是負對數(shù)關系，在不同A值時，同樣的ΔT的讀數(shù)誤差所引起的吸光度的絕對誤差ΔA是不同的。A值越大，由ΔT引起的ΔA也越大。第八十頁，共八十七頁，編輯于2023年，星期五設當?