食品安全檢測(cè)技術(shù)演示文稿

食品安全檢測(cè)技術(shù)演示文稿本文檔共67頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分優(yōu)選食品安全檢測(cè)技術(shù)本文檔共67頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分一、色譜分析技術(shù)

色譜技術(shù)是幾十年來分析化學(xué)中最富活力的領(lǐng)域之一。作為一種物理化學(xué)分離、分析方法，色譜技術(shù)最初僅僅是作為一種分離手段。到20世紀(jì)50年代，隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展，人們才開始把這種分離手段與檢測(cè)系統(tǒng)連接起來，成為在環(huán)境、生化、藥物、精細(xì)化工產(chǎn)品及食品污染物分析等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用的物質(zhì)分離和分析的一種重要手段。本文檔共67頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分色譜法有多種類型，可分為以下幾種：(1)按流動(dòng)相的物態(tài)可分為氣相色譜法(流動(dòng)相為氣體)和液相色譜法(流動(dòng)相為液體)。(2)按固定相的物態(tài)可分為氣固色譜法(固定相為固體吸附劑)、氣液色譜法(固定相為涂在固相載體上或毛細(xì)管壁上的液體)、液固色譜法和液液色譜法。(3)按固定相的使用形式可分為柱色譜法(固定相裝在色譜柱中)、紙色譜(固定相為濾紙〉和薄層色譜法(固定相為吸附粉末制成的薄層)。(4)按分離過程的機(jī)制可分為吸附色譜法(利用吸附劑表面對(duì)不同組分物理吸附性能的差異進(jìn)行分離)、分配色譜法(利用不同組分在兩相中有不同的分配系數(shù)來進(jìn)行分離)、離子交換色譜法(利用離子交換原理)和排阻色譜法(利用多孔性物質(zhì)對(duì)不同大小的排阻作用)等。本文檔共67頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分二、氣相色譜法（GC）

氣相色譜（gaschromatography簡(jiǎn)稱GC）是二十世紀(jì)五十年代出現(xiàn)的一項(xiàng)重大科學(xué)技術(shù)成就。氣相色譜是采用氣體作為流動(dòng)相的一種色譜法。在此方法中，載氣(不與被測(cè)物作用，用來載送試樣的惰性氣體，如氫氣、氮?dú)獾?承載著待分離或檢測(cè)的試樣通過色譜柱中的固定相，使試樣中各組分分離，然后分別檢測(cè)。具有分離效能高、靈敏度高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等重要特點(diǎn)。本文檔共67頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分安捷倫氣相色譜儀6890N本文檔共67頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分氣相色譜的組成和工作流程本文檔共67頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分氣相色譜法用于食品添加劑的檢測(cè)

氣相色譜用于食品中致病菌的檢測(cè)本文檔共67頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分三、高效液相色譜法

高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography，

HPLC)是指流動(dòng)相為液體的色譜技術(shù)，也叫高壓液相色譜。它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高效、快速的分離分析技術(shù)，具有高壓、高速、高效和高靈敏度的特點(diǎn)?？捎糜诟叻悬c(diǎn)、熱穩(wěn)定性好、相對(duì)分子量較大(大于400以上)的有機(jī)物的分離和檢測(cè)。本文檔共67頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分高效液相色譜的組成和工作流程本文檔共67頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分氨基甲酸脂類農(nóng)藥是一類應(yīng)用范圍廣、藥效高、對(duì)哺乳動(dòng)物毒性較有機(jī)磷低的農(nóng)藥，由于這類農(nóng)藥多數(shù)為熱不穩(wěn)定，因此不適合采用氣相色譜測(cè)定。有機(jī)磷農(nóng)藥中大多數(shù)化合物的吸收都在遠(yuǎn)紫外，故用氣相色譜分析比較方便。但該類農(nóng)藥中有些農(nóng)藥性質(zhì)不很穩(wěn)定，故可使用高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行分析。高效液相色譜可用于食品中獸藥殘留檢測(cè)。本文檔共67頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分計(jì)算機(jī)技術(shù)對(duì)

食品安全檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)生的影響體現(xiàn)1.計(jì)算機(jī)技術(shù)提高了食品安全檢測(cè)系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理能力2.計(jì)算機(jī)促進(jìn)食品安全檢測(cè)技術(shù)自動(dòng)化程度的提高3.計(jì)算機(jī)使食品安全檢測(cè)更趨智能化本文檔共67頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分第二節(jié)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)

一、GC-MS系統(tǒng)的組成

計(jì)算機(jī)系統(tǒng)交互式地控制氣相色譜、接口和質(zhì)譜儀，進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和處理，是GC-

MS的中央控制單元。本文檔共67頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分二、GC-MS聯(lián)用中主要的技術(shù)問題1.儀器接口

氣相色譜儀的入口端壓力高于大氣壓，在高于大氣壓力的狀態(tài)下，樣品混合物的氣態(tài)分子在載氣的帶動(dòng)下，因在流動(dòng)相和固定相上的分配系數(shù)不同而產(chǎn)生的各組分在色譜柱內(nèi)的流速不同，使各組分分離，最后和載氣一起流出色譜柱。本文檔共67頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分質(zhì)譜儀中的樣品氣態(tài)分子在具有一定真空度的離子源中轉(zhuǎn)化為樣品氣態(tài)離子。這些離子在高真空的條件下進(jìn)入質(zhì)量分析器運(yùn)動(dòng)。在質(zhì)量掃描部件的作用下，檢測(cè)器記錄這些離子流強(qiáng)度及其隨時(shí)間的變化。本文檔共67頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分儀器接口接口技術(shù)中要解決的問題是氣相色譜儀的大氣壓的工作條件和質(zhì)譜儀的真空工作條件的連接和匹配。接口要把氣相色譜柱流出物中的載氣盡可能多地除去，保留或濃縮待測(cè)

物，協(xié)調(diào)色譜儀和質(zhì)譜儀的工作流量。本文檔共67頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分2.掃描速度

沒有與色譜儀連接的質(zhì)譜儀一般對(duì)掃描速度要求不高。和氣相色譜儀連接的質(zhì)譜儀，由于氣相色譜峰很窄，有的僅幾秒時(shí)間。一個(gè)完整的色譜峰通常需要至少6個(gè)以上數(shù)據(jù)點(diǎn)。這樣就要求質(zhì)譜儀有較高的掃描速度，才能在很短的時(shí)間內(nèi)完成多次全質(zhì)量范圍的質(zhì)量掃描。另一方面，要求質(zhì)譜儀能很快地在不同的質(zhì)量數(shù)之間來回切換，以滿足選擇離子檢測(cè)的需要。本文檔共67頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分三、GC-MS聯(lián)用儀和氣相色譜儀的主要區(qū)別

GC-MS聯(lián)用后，氣相色譜儀部分的氣路系統(tǒng)和質(zhì)譜儀的真空系統(tǒng)幾乎不變，僅增加了接口的氣路和接口真空系統(tǒng)。氣質(zhì)聯(lián)用法和氣相色譜法一些性能和操作上的區(qū)別：

①GC-MS方法定性參數(shù)增加，定性遠(yuǎn)比GC方法可靠。②GC-MS方法靈敏度卻遠(yuǎn)高于GC方法。③采用氣質(zhì)聯(lián)用中的提取離子色譜、選擇離子檢測(cè)等技術(shù)可降低化學(xué)噪聲的影響④氣質(zhì)聯(lián)用儀的定量精度優(yōu)于氣相色譜儀。⑤氣質(zhì)聯(lián)用中檢測(cè)器不需要經(jīng)常清洗，最常需要清洗的是離子源或離子盒。本文檔共67頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分四、GC-MS聯(lián)用儀器的分類GC-MS儀器的分類：按照質(zhì)譜技術(shù)：

GC-MS通常是指四極桿質(zhì)譜或磁質(zhì)譜，GC-ITMS通常是指氣相色譜-離子阱質(zhì)譜，GC-TOFMS是指氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜等。按照質(zhì)譜儀的分辨率：可以分為高分辨(通常分辨率高于5000)、中分辨(通常分辨率在1000----5000之間)、低分辨(通常分辨率低于1000)氣質(zhì)聯(lián)用儀。本文檔共67頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分GC-MS在食品污染物檢測(cè)中的應(yīng)用

1.GC-MS用于食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)2.GC-MS用于食品中獸藥殘留的檢測(cè)3.GC-MS在食品添加劑檢測(cè)4.GC-MS在食品中環(huán)境污染物檢測(cè)本文檔共67頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分第三節(jié)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)及接口

色譜與質(zhì)譜(MS)的聯(lián)用集高效分離、多組分同時(shí)定性和定量為一體，是分析混合物最為有效的工具。但由于許多有機(jī)化合物的高極性、熱不穩(wěn)定性、高分子量和低揮發(fā)度等原因，它們其中的90%以上需要用液相色譜(LC)分離，因此，LC和MS的聯(lián)用在有機(jī)混合物分析中具有明顯的優(yōu)越性。本文檔共67頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)聯(lián)用接口

自開始研究LC-MS以來，前后至少提出過27種以上的接口技術(shù)，但能夠商品化并被廣泛或在一定程度上使用的只有如下幾種。

1.移動(dòng)帶技術(shù)2.直接液體導(dǎo)人接口3.熱噴霧接口4.粒子束接口5.快原子轟擊因此，對(duì)于一個(gè)現(xiàn)代化并從事多方面分析的實(shí)驗(yàn)室，需要具備幾種LC-MS接口技術(shù)，以適應(yīng)LC分離化合物的多樣性。本文檔共67頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分LC-MS在食品污染物檢測(cè)中的應(yīng)用

LC-MS在食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)LC-MS在食品中獸藥殘留檢測(cè)LC-MS在食品添加劑檢測(cè)本文檔共67頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分第三節(jié)生物芯片檢測(cè)技術(shù)

生物芯片(biochip)是指采用光導(dǎo)原位合成或微量點(diǎn)樣等方法，將大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至組織切片、細(xì)胞等生物樣品有序地固化于支持物(如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝膠、尼龍膜等載體)的表面，組成密集二維分子排列。然后與己標(biāo)記的待測(cè)生物樣品中靶分子雜交，通過特定的儀器，比如激光共聚焦掃描或電荷耦聯(lián)攝影機(jī)(CCD)對(duì)雜交信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)行快速、并行、高效地檢測(cè)分析，從而判斷樣品中靶分子的數(shù)量。由于常用玻片/硅片作為固相支持物，且在制備過程模擬計(jì)算機(jī)芯片的制備技術(shù)，所以稱之為生物芯片技術(shù)。本文檔共67頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分一、生物芯片分析步驟

本文檔共67頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分二、生物芯片在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

采用基因芯片技術(shù)建立的水中常見致病菌的檢測(cè)與鑒定方法:致病菌污染飲用水可導(dǎo)致多種疾病的暴發(fā)與流行，嚴(yán)重威脅著人類的健康。傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)方法及生化鑒定，操作繁瑣，且需要數(shù)天才能得到結(jié)果。常規(guī)PCR一次只能檢出一種致病菌，對(duì)水中分離的未知菌，或有多種細(xì)菌污染的樣品則顯得無從下手。利用在細(xì)菌學(xué)分類上具有重要意義的16SrRNA基因作為檢測(cè)的靶分子，并在其間設(shè)計(jì)檢測(cè)探針，建立一套水中致病菌的基因芯片快速檢測(cè)技術(shù)(4h)。（可以定性和半定量地檢出致病菌。用這種芯片可以特異地檢出水中副溶血弧菌、李斯特菌、耶爾森菌、變形桿菌及銅綠假單胞菌等）。本文檔共67頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分基因芯片與傳統(tǒng)方法相比其先進(jìn)性①基因芯片可以對(duì)水中致病菌實(shí)現(xiàn)高通量、并行檢測(cè)，一次實(shí)驗(yàn)即可得出全部結(jié)果;②操作簡(jiǎn)便、快速，整個(gè)檢測(cè)4h基本可以得到結(jié)果，而傳統(tǒng)的方法(包括儀器分析)一般需要4-7天;③特異性強(qiáng)、敏感性高，可以檢測(cè)水中常見的致病菌。本文檔共67頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分三、基因芯片檢測(cè)致病菌的特點(diǎn)①基因芯片可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的高通量檢測(cè)：

（可以同時(shí)對(duì)成千上萬個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)與分析）②芯片技術(shù)可以對(duì)大量樣品進(jìn)行“并行”檢測(cè)。③在基因芯片分析中可以采用熒光對(duì)樣品進(jìn)行標(biāo)記。④反應(yīng)體積小，降低了試劑的消耗。⑤反應(yīng)物在單位體積內(nèi)濃度高，反應(yīng)快，縮短檢測(cè)時(shí)間。⑥特異性較強(qiáng)基因芯片檢測(cè)的特異性與傳統(tǒng)的PCR結(jié)合探針雜交檢測(cè)的特異性一致。⑦基因芯片可以完全實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化及快速檢測(cè)。本文檔共67頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分四、基因芯片技術(shù)檢測(cè)致病微生物存在的問題1.基因序列信息缺乏2.基因及基因芯片技術(shù)專利的限制3.相關(guān)技術(shù)亟須改進(jìn)與提高4.檢測(cè)費(fèi)用過高基因芯片技術(shù)是一項(xiàng)多學(xué)科交叉、基礎(chǔ)研究與應(yīng)用開發(fā)研究密切結(jié)合的技術(shù)，必須依靠各相關(guān)學(xué)科科學(xué)家的鼎力合作才能取得突破?；蛐酒夹g(shù)本身面臨許多問題需要解決。本文檔共67頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分五、基因芯片技術(shù)的發(fā)展前景基因芯片技術(shù)一經(jīng)出現(xiàn)就受到各領(lǐng)域的高度重視，并迅速在生命科學(xué)領(lǐng)域、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，尤其是食品安全領(lǐng)域得到快速發(fā)展。沙門菌、李斯特菌、大腸桿菌O157等致病菌已成為危害食品安全及消費(fèi)者健康的主要病原菌?？焖俣鴾?zhǔn)確地檢測(cè)這些致病菌是確保食品安全的首要任務(wù)，而基因芯片技術(shù)則為快速檢測(cè)這些致病菌提供了廣闊的應(yīng)用前景目前，以生物芯片技術(shù)為核心的相關(guān)產(chǎn)業(yè)在全球迅速崛起，國(guó)際上已有數(shù)百家公司在做相關(guān)研究與開發(fā)?；蛐酒瑥膶?shí)驗(yàn)室走向工業(yè)化本文檔共67頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分POTOMAC

滲濾式蛋白芯片的設(shè)計(jì)本文檔共67頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分將應(yīng)用物品先準(zhǔn)備好。檢測(cè)實(shí)例本文檔共67頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分在晶片盒視窗內(nèi)滴加3滴試劑A，必要時(shí)用手輕晃晶片，使膜表面完全浸濕。本文檔共67頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分待完全滲入後，室溫放置1分鐘，加待檢樣品100μl。本文檔共67頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分待血清完全滲入後，再滴加6滴試劑B。本文檔共67頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分待試劑C完全滲入後，最後滴加6滴試劑D。本文檔共67頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分反應(yīng)完畢後0.5小時(shí)內(nèi)，將晶片放入晶片閱讀系統(tǒng)進(jìn)行閱讀分析。本文檔共67頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分大淵的PBT-X2-02型生物芯片識(shí)別儀器組成。本文檔共67頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分第五節(jié)生物傳感器檢測(cè)技術(shù)生物傳感器的基本原理生物傳感器是由固定化的具有分子識(shí)別功能的生物材料、換能器和信號(hào)處理放大裝置組成的分析工具或系統(tǒng)。本文檔共67頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分生物傳感器的結(jié)構(gòu)一般有兩個(gè)主要組成部分:其一是生物分子識(shí)別元件(感受器)，是具有分子識(shí)別能力的生物活性物質(zhì)(如組織切片、細(xì)胞、細(xì)胞器、細(xì)胞膜、酶、抗體、核酸、有機(jī)物分子等);其二是信號(hào)轉(zhuǎn)換器(換能器)，主要有電化學(xué)電極(如電位、電流的測(cè)量)、光學(xué)檢測(cè)元件、熱敏電阻、場(chǎng)效應(yīng)晶體管等。當(dāng)待測(cè)物與分子識(shí)別元件特異性結(jié)合后，所產(chǎn)生的復(fù)合物(或光、熱等)通過信號(hào)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵龅碾娦盘?hào)、光信號(hào)等，從而達(dá)到分析檢測(cè)的目本文檔共67頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分換能器（Transducer）感受器（Receptor）測(cè)量信號(hào)（MeasurableSignal）=分析物（Analyte）溶液（Solution）選擇性膜（Thinselectivemembrane）識(shí)別元件（RECOGNITION）生物傳感器工作機(jī)理本文檔共67頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分生物傳感器按生物分子識(shí)別元件敏感物質(zhì)分類

本文檔共67頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分一、生物傳感器的分類(1)根據(jù)傳感器輸出信號(hào)的產(chǎn)生方式可分為生物親和型傳感器、代謝型生物傳感器和催化型生物傳感器。(2)根據(jù)生物傳感器中生物分子識(shí)別元件的敏感性物質(zhì)可分為酶?jìng)鞲衅?、微生物傳感器、組織傳感器、基因傳感器、免疫傳感器等。(3)依據(jù)生物傳感器的信號(hào)轉(zhuǎn)換器可分為電化學(xué)生物傳感器、半導(dǎo)體生物傳感器、測(cè)熱型生物傳感器、測(cè)光型生物傳感器、測(cè)聲型生物傳感器等。本文檔共67頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分生物傳感器在食品污染物檢測(cè)中的應(yīng)用

1.農(nóng)藥和抗生素殘留分析檢測(cè)

(1)農(nóng)藥殘留的生物傳感器檢測(cè)目前，有機(jī)磷農(nóng)藥中的馬拉松、甲基馬拉松、速效磷、久效磷和百治磷等，以及氨基甲醋類農(nóng)藥中的滴滅威、西維因、滅蟲多和殘殺威等農(nóng)藥在食品中殘留量的生物傳感器檢測(cè)都有相應(yīng)的研究報(bào)道。

(2)抗生素殘留分析2.生物傳感器在食品添加劑檢測(cè)3.生物傳感器在食品微生物污染檢測(cè)食品中常見沙門菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、李斯特菌、產(chǎn)氣英膜梭菌和蠟樣芽抱桿菌等目前都可用光纖生物傳感器、免疫生物傳感器和DNA生物傳感器進(jìn)行檢測(cè)。4.生物傳感器在食品生物毒素污染檢測(cè)

細(xì)菌和真菌毒素的檢測(cè)本文檔共67頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分三、生物傳感器的發(fā)展趨勢(shì)1.開發(fā)新材料2.采用新工藝3.研究多功能集成傳感器4.研究智能型傳感器5.研究仿生傳感器由于生物傳感器具有方便、快捷、選擇性高、可用于復(fù)雜體系等突出的優(yōu)越性，它在分析儀器市場(chǎng)中所占的份額越來越大，并已開始大量取代相同領(lǐng)域內(nèi)的其他分析儀器。本文檔共67頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分快速葡萄糖(glucose)分析儀生物傳感器應(yīng)用舉例本文檔共67頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分德國(guó)研發(fā)的環(huán)境廢水BOD分析儀本文檔共67頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分一種血糖乳酸自動(dòng)分析儀本文檔共67頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分第六節(jié)酶聯(lián)免疫(ELISA)吸附測(cè)定免疫酶技術(shù)(ELISA)是將抗原一抗體反應(yīng)的特異性與酶的高效催化作用有機(jī)結(jié)合的一種方法。它以酶作為標(biāo)記物，與抗體或抗原連接，與相應(yīng)的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應(yīng)做抗

原一抗體的定性和定量。目前應(yīng)用最多的免疫酶技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)，它是使抗原或抗體吸附于固相載體，使隨后進(jìn)行的抗原、抗體反應(yīng)均在載體表面進(jìn)行，從而簡(jiǎn)化了分離步驟，提高了靈敏度，既可檢測(cè)抗原，也可檢測(cè)抗體。本文檔共67頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分一、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定原理以間接法測(cè)定抗體為例簡(jiǎn)要說明其原理:利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板作為固相免疫吸附劑，吸附抗原，使之固定化，此過程稱之為包被。之后加待測(cè)抗體，再加相應(yīng)的酶標(biāo)記抗抗體進(jìn)行兩次抗原-抗體的特異性免疫反應(yīng)，生成抗原-抗體-酶標(biāo)記抗抗體復(fù)合物。最后加入酶的底物，進(jìn)行酶促反應(yīng)，生成有色產(chǎn)物，待測(cè)抗體的量與有色產(chǎn)物的顏色成正比，用特定波長(zhǎng)測(cè)定產(chǎn)物的光吸收值即可得到待測(cè)抗體的量。本文檔共67頁；當(dāng)前第57頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第58頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分本文檔共67頁；當(dāng)前第59頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分DNM-9602G酶標(biāo)分析儀DNM-9602標(biāo)配酶標(biāo)分析儀

DNM-9602A酶標(biāo)分析儀幾種酶標(biāo)分析儀本文檔共67頁；當(dāng)前第60頁；編輯于星期三\19點(diǎn)5分二、酶免疫測(cè)定法的特點(diǎn)酶免疫測(cè)定法是利用抗原一抗體的免疫學(xué)反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，具有高度特異性，要求參加反應(yīng)的抗原和抗體純度高，消除非特異性反應(yīng)和假陽性反應(yīng)，避免交叉反應(yīng)，去除內(nèi)源性酶活性等。酶免疫測(cè)定法是利用抗原抗體的初級(jí)免疫學(xué)反應(yīng)和酶的高效催化底物反應(yīng)的特點(diǎn)，具有生物放大作用，所以反應(yīng)靈敏，可檢出濃度在納克級(jí)水平。酶免疫測(cè)定法中所使用的試劑都比較穩(wěn)定，按照一定的實(shí)驗(yàn)程序進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性較好，有較高的準(zhǔn)確性。酶免疫測(cè)定法成本低，操作簡(jiǎn)便，可同時(shí)快速測(cè)定多個(gè)樣品，不需要特殊的儀器設(shè)備。本文檔共67頁；當(dāng)前第61頁；編輯于