人血小板因子4(PF4CXCL4)ELISA分析檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

人血小板因子（PF-4/）EL檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（PF-4/CXCL4實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血小板因子（PF-4/CXCL4水平。用純化的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（PF-4/CXCL4微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因（PF-4/CL4記的羊抗鼠抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TBH的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因（PF-4/用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血小板因子4（PF-4/CXCL4試劑盒內(nèi)容及其配制：試劑盒成份96/48酶標(biāo)板塑料膜板蓋標(biāo)準(zhǔn)品：

9孔配置4孔配置塊板 半塊板（9T（4T1塊 半塊1瓶 1瓶100ng/m（1.m（0.ml空白對(duì)照

1瓶 1瓶（1.m（0.ml標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩1瓶 1瓶沖液 （8.m（4.ml生物素標(biāo)記的1瓶 1瓶抗O抗體 （8.m（4.ml親和鏈酶素-HRP洗滌緩沖液

1瓶（12ml1瓶（20ml

1瓶（5l1瓶（10ml底物A底物B終止液

1瓶 1瓶（6.m（3.ml1瓶 1瓶（6.m（3.ml1瓶 1瓶（6.m（3.ml試劑盒組成：試劑盒組成說(shuō)明書(shū)封板膜密封袋酶標(biāo)包被板標(biāo)準(zhǔn)品：4μmol/L標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4孔配置1份2片（481個(gè)×480.瓶1.瓶

9孔配置 保存1份2片（9）1個(gè)×96 2保存0.瓶 2保存1.瓶 2保存酶標(biāo)試劑 3×1瓶樣品稀釋液3×1瓶顯色劑液3×1瓶顯色劑液3×1瓶

6×1瓶 2保存6m1瓶 2保存6×1瓶 2保存6ml瓶 2保存終止液 31瓶 61瓶 2保存濃縮洗滌液

（20×2倍×（20×3倍）瓶 ×瓶

2保存自備材料：1.蒸餾水。2.加樣器：510u、50ul100l200501000ul3.振蕩器及磁力攪拌器等。樣品收集、處理及保存方法：、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，100離心1分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。、血漿……EDTA檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。100×離心3分鐘。、細(xì)胞上清液……100×離心1分鐘去除顆粒和聚合物。、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。100×離心1分鐘，取。、保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-保存避免反復(fù)。，心或過(guò)濾。不要在3℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻。人血小板因子4EL盒操作注意事項(xiàng)：● 丟?！??！?使?！?使用一次性的吸頭以免交叉污染吸取終止液和底物液時(shí)避免使用帶金屬部分的加樣器?！?使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品?！?底物應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取O值。● 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。● 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。安全性：1.避免直接接觸終止液和底物，一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖。2.。3.。備：1.準(zhǔn)：100（號(hào)標(biāo)直ng/品） 接加入50ul50（號(hào)標(biāo)10倍標(biāo)準(zhǔn)品ng/品） 加入10準(zhǔn)品液25（號(hào)標(biāo)10u號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加ng/品）12.（3號(hào)標(biāo)ng/品）6.2（2號(hào)標(biāo)ng/品）3.1（1號(hào)標(biāo)ng/品）

入10準(zhǔn)品稀液10u號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入10準(zhǔn)品稀液10u號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入10準(zhǔn)品稀液10u號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入10準(zhǔn)品稀液0 對(duì)直ng/） 接加入50ul2.洗滌緩沖液（5×）的稀釋?zhuān)赫麴s水5倍稀釋。能：1.靈敏度：最小的檢測(cè)濃度小于號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)值為0.902.。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于1%人血小板因子EL試劑盒操作步驟：1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50u于反應(yīng)孔加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50u的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37溫育4分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩3秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入10和鏈酶素-H，輕輕振蕩混勻，3℃溫育3分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩3秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物、各50，輕輕振蕩混勻，3℃溫育分鐘。避免光。8.入50止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在45處測(cè)定各孔的O值。結(jié)果判斷與分析：、儀器值：于波長(zhǎng)45標(biāo)儀上讀取各孔的O值