不同生化檢測系統(tǒng)實現(xiàn)結(jié)果可比性的方法

新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院檢驗科齊振普不同生化檢測系統(tǒng)實現(xiàn)結(jié)果可比性的方法當前第1頁\共有75頁\編于星期二\16點問題的提出當前第2頁\共有75頁\編于星期二\16點問題1目前，很多實驗室都有兩臺或多臺生化分析儀，經(jīng)常有不同儀器檢測同一項目結(jié)果不一致的情況。怎樣才能使兩臺儀器之間的結(jié)果具有可比性呢？當前第3頁\共有75頁\編于星期二\16點問題2即使只有一臺生化分析儀，但參加EQA結(jié)果不成功，地區(qū)間不同實驗室結(jié)果可比性差。如何改進EQA成績，提高地區(qū)間不同實驗室之間結(jié)果的可比性呢？當前第4頁\共有75頁\編于星期二\16點問題3病人抱怨在不同醫(yī)院檢驗結(jié)果不一致，不知道該相信誰。醫(yī)師不知道該如何依據(jù)檢驗結(jié)果對患者診斷和治療。衛(wèi)生部要求不同實驗室之間結(jié)果“互認”，降低醫(yī)療成本。當前第5頁\共有75頁\編于星期二\16點怎樣解決這些問題呢？當前第6頁\共有75頁\編于星期二\16點實現(xiàn)同一檢測項目在不同檢測系統(tǒng)中的檢測結(jié)果具有可比性，是臨床診斷疾病的基本要求，也是衛(wèi)生部提倡“結(jié)果互認”的基礎(chǔ)，更是實驗室管理的重要目標。解決“可比性”的關(guān)鍵在于檢測系統(tǒng)的量值溯源。鑰匙當前第7頁\共有75頁\編于星期二\16點檢測系統(tǒng)：是指完成一個檢測項目所需要的儀器、試劑、校準品、檢驗程序等的組合。當前第8頁\共有75頁\編于星期二\16點儀器試劑校準品實驗程序當前第9頁\共有75頁\編于星期二\16點固定檢測系統(tǒng)（封閉檢測系統(tǒng)）：由公司選定的儀器、試劑、校準品、檢驗程序等組成固定的組合，用戶實驗室不能更改。這樣的檢測系統(tǒng)經(jīng)過公司與參考系統(tǒng)校準比對，可以保證結(jié)果的可比性和量值溯源性。當前第10頁\共有75頁\編于星期二\16點自建檢測系統(tǒng)（開放檢測系統(tǒng)）：實驗室自行選擇的儀器、試劑、校準品、檢驗程序的組合，其中的每一要件都可以更改。如果自建的檢測系統(tǒng)經(jīng)過比對、校準驗證和偏倚評估，證明其有效性。則成為有效的檢測系統(tǒng)，其檢測結(jié)果具有可比性和量值溯源性。當前第11頁\共有75頁\編于星期二\16點如果自建的檢測系統(tǒng)未經(jīng)過比對、校準驗證和偏倚評估，其檢測結(jié)果的可比性和量值溯源性未知，則稱為“自攢檢測系統(tǒng)”。當前第12頁\共有75頁\編于星期二\16點選擇檢測系統(tǒng)的原則：①選擇性能優(yōu)良的儀器和質(zhì)量好的試劑；②以性能和質(zhì)量為主要標準，價格為次要標準；③儀器制造商和試劑生產(chǎn)商的美譽度；④培訓(xùn)和售后服務(wù)；⑤考慮發(fā)展因素；⑥檢測系統(tǒng)經(jīng)過評價確定后，不可隨意更換任一要素，特別是試劑和程序。除非有特殊原因，如原使用的試劑停產(chǎn)等。特別不能因為經(jīng)濟利益的原因，隨意更換試劑。⑦如果確實需要更換試劑，必須重新評價新檢測系統(tǒng)的性能指標，證明是有效的檢測系統(tǒng)，方可在實際工作中應(yīng)用。當前第13頁\共有75頁\編于星期二\16點實驗方法的分級當前第14頁\共有75頁\編于星期二\16點檢驗方法學(xué)包括：(1)經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準確度或不確定性原因的決定性方法；(2)經(jīng)詳盡研究證實不準確度與不精密度可以忽略的參考方法；(3)可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的常規(guī)方法。當前第15頁\共有75頁\編于星期二\16點決定性方法（definitivemethod）是指準確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細的研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。用于發(fā)展及評價參考方法和一級標準品。

當前第16頁\共有75頁\編于星期二\16點參考方法（referencemethod）是指準確度與精密度已經(jīng)充分證實的分析方法，干擾因素少，系統(tǒng)誤差與重復(fù)測定的隨機誤差相比可以忽略不計，有適當?shù)撵`敏度、特異性及較寬的分析范圍。這類方法在條件許可的實驗室中應(yīng)經(jīng)常使用。用于評價常規(guī)方法和試劑盒，鑒定二級標準品。

當前第17頁\共有75頁\編于星期二\16點常規(guī)方法（routinemethod）指性能指標符合臨床或其他目的的需要，有足夠的精密度、準確度、特異性和適當?shù)姆治龇秶?，而且?jīng)濟實用。這類方法經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認可后可稱為推薦方法（recommendedmethod），推薦方法應(yīng)具有足夠的實驗證據(jù)。

當前第18頁\共有75頁\編于星期二\16點項目決定性方法參考方法 常規(guī)方法鈣ID-MS 原子吸收分光光度法 鄰甲酚肽絡(luò)合法氯電量滴定法、 電流滴定法 電量分析法中子活化法 硝酸汞滴定法鎂 ID-MS 原子吸收分光光度法 甲基麝香草酚蘭比色法磷 ID-MS—— ——鉀 ID-MS、 火焰光度法 火焰光度法中子活化法鈉 重量分析法、 火焰光度法 火焰光度法 中子活化法白蛋白—— 免疫化學(xué)法 溴甲酚綠法總蛋白—— 雙縮脲法 雙縮脲法肌酐 ID-MS、 離子交換層析法 苦味酸法 離子交換層析法尿素 ID-MS 尿素酶法 尿素酶法尿酸 ID-MS 尿酸酶法（紫外法） 尿酸酶法膽紅素 —— 重氮反應(yīng)法 重氮反應(yīng)法葡萄糖 ID-MS 己糖激酶法 葡萄糖氧化酶法膽固醇 ID-MS Abell-Kendall法， 膽固醇氧化酶法 膽固醇氧化酶法甘油三酯ID-MS 酶法 酶法AST —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法ALT —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法GGT —— 連續(xù)監(jiān)測產(chǎn)物生成法 連續(xù)監(jiān)測產(chǎn)物生成法CK —— 酶偶聯(lián)法 酶偶聯(lián)法當前第19頁\共有75頁\編于星期二\16點生化參考方法（衛(wèi)生部臨檢中心2011.12.23）分析項目分析原理參考方法名稱葡萄糖（Glu）ID-LC/MS/MS血清葡萄糖同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法尿素（Urea）ID-GC/MS血清尿素同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法尿酸（UA）ID-LC/MS/MS血清尿酸同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法肌酐（Crea）ID-LC/MS/MS血清肌酐同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）IFCC-Spectrophotometry丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測定方法天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）IFCC-Spectrophotometry天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測定方法轉(zhuǎn)肽酶（GGT）IFCC-Spectrophotometryr-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性濃度（37℃）參考測定方法乳酸脫氫酶（LDH）IFCC-Spectrophotometry乳酸脫氫酶活性濃度（37℃）參考測定方法肌酸激酶（CK）IFCC-Spectrophotometry肌酸激酶活性濃度（37℃）參考測定方法淀粉酶（AMY）IFCC-Spectrophotometry淀粉酶活性濃度（37℃）參考測定方法鈉（Na）ICP/MS血清鈉電感耦合等離子體質(zhì)譜法鎂（Mg）ICP/MS血清鎂電感耦合等離子體質(zhì)譜法糖化血紅蛋白A1cIFCC-LC/MS/MS糖化血紅蛋白液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜IFCC法高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）Ultracentrifugation-HPLC高密度脂蛋白及其亞類膽固醇超速離心-高效液相色譜法低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）Ultracentrifugation-HPLC低密度脂蛋白及其亞類膽固醇超速離心-高效液相色譜法膽固醇（TC）ID-LC/MS/MS血清總膽固醇同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法膽固醇（TC）ID-GC/MS血清總膽固醇同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法甘油三酯（TG）ID-LC/MS/MS血清甘油三酯同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法甘油三酯（TG）ID-GC/MS血清甘油三酯同位素稀釋氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法皮質(zhì)醇（Co）ID-LC/MS/MS血清皮質(zhì)醇同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法睪酮（T）ID-LC/MS/MS血清睪酮同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法孕酮（P）ID-GC/MS血清孕酮同位素稀釋氣相色譜質(zhì)譜法當前第20頁\共有75頁\編于星期二\16點血液參考方法（）

檢測項目檢測原理參考方法名稱白細胞計數(shù)（WBC）單通道電阻抗法白細胞計數(shù)參考方法紅細胞計數(shù)（RBC）單通道電阻抗法紅細胞計數(shù)參考方法血紅蛋白測定（HGB）HiCN分光光度法血紅蛋白測定參考方法紅細胞比容測定（Hct）微量毛細管離心法紅細胞比容測定參考方法血小板計數(shù)（PLT）流式細胞術(shù)法血小板計數(shù)參考方法當前第21頁\共有75頁\編于星期二\16點標準品的分級（3級）當前第22頁\共有75頁\編于星期二\16點一級標準品（原級參考物質(zhì)）是一種穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，它的數(shù)值已由決定性方法確定，或由高度準確的方法確定，所含雜質(zhì)也已經(jīng)定量，且有證書；用于校正決定性方法，評價及校正參考方法以及為二級標準品定值。當前第23頁\共有75頁\編于星期二\16點二級標準品（次級參考物質(zhì)）這類標準品可由實驗室自已配制或為商品，它的示值必須用一級標準品和參考方法確定；主要用于常規(guī)方法的評價或為控制物定值和常規(guī)測定的結(jié)果計算。當前第24頁\共有75頁\編于星期二\16點日常校準品用二級標準品和常規(guī)方法測定得到校準品，用于常規(guī)測定中的標準。當前第25頁\共有75頁\編于星期二\16點生化標準物質(zhì)（國家標準）1.GBW09174冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標準物質(zhì)2.GBW09175冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標準物質(zhì)

3.GBW09176冰凍人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素標準物質(zhì)4.GBW09177冰凍人血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-谷氨?；被D(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、α-淀粉酶活性濃度標準物質(zhì)5.GBW09178血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標準物質(zhì)6.GBW09179血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標準物質(zhì)7.GBW09180血清總膽固醇、總甘油、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇標準物質(zhì)8.GBW09181人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標準物質(zhì)9.GBW09182人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標準物質(zhì)10.GBW09183人血紅蛋白溶液中糖化血紅蛋白標準物質(zhì)當前第26頁\共有75頁\編于星期二\16點血液標準物質(zhì)（國家標準）檢測項目標準物質(zhì)名稱證書編號HGB氰化高鐵血紅蛋白國家一級標物質(zhì)GBW09153WBC、RBC、HBG、PLT血細胞分析國家一級標準物質(zhì)GBW09172HCT紅細胞比容國家一級標準物質(zhì)GBW09173當前第27頁\共有75頁\編于星期二\16點免疫和核酸標準物質(zhì)（國家標準）標準物質(zhì)名稱標準物質(zhì)編號濃度乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（凍干）標準物質(zhì)GBW0916428.0±3.2IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900380.23±0.08IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900390.74±0.23IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900401.31±0.42IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900412.55±0.80IU/ml乙型肝炎表面抗原（HBsAg）血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900424.6±1.3IU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（凍干）標準物質(zhì)GBW091608.00±0.20NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900440.86±0.09NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900452.10±0.29NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900464.35±0.72NCU/ml丙型肝炎病毒（HCV）抗體血清（液體）標準物質(zhì)GBW(E)0900478.4±1.1NCU/ml當前第28頁\共有75頁\編于星期二\16點臨床實驗室使用常規(guī)方法和日常校準品，涉及到分析儀器、試劑、分析參數(shù)和校準品。如果常規(guī)方法的檢測結(jié)果經(jīng)一系列合理實驗的驗證，其量值能夠溯源到高級標準物質(zhì)，說明檢驗結(jié)果有溯源性。最高級標準為國際或國家標準，如無國際或國家標準，常規(guī)測量結(jié)果通常應(yīng)該溯源到廠家標準。

當前第29頁\共有75頁\編于星期二\16點實驗室認可的兩個國際標準ISO/IEC17025（檢測和校準實驗室能力認可準則）和ISO/15189（醫(yī)學(xué)實驗室—質(zhì)量和能力的專用要求）都對檢驗結(jié)果的溯源性和可比性提出了明確要求，強調(diào)方法學(xué)比對試驗是實現(xiàn)準確度溯源和患者標本檢驗結(jié)果可比性的重要途徑當前第30頁\共有75頁\編于星期二\16點美國臨床和實驗室標準協(xié)會（CLSI）EP9-A2文件提供了不同檢測系統(tǒng)比對試驗的方法。在進行比對試驗之前，首先應(yīng)對自建系統(tǒng)作精密度評價。EP5-A2文件提供了精密度評價方法。當前第31頁\共有75頁\編于星期二\16點精密度和準確度當前第32頁\共有75頁\編于星期二\16點1.精密度試驗當前第33頁\共有75頁\編于星期二\16點精密度實驗一般選擇2個標本，1個為正?；蛟卺t(yī)學(xué)決定水平附近，另1個為異常值。以本實驗室研制的改良血清蛋白方法（中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2005，11：1197-1200）的精密度評價為例，實驗用1份正常值混合血清和1份高值混合血清。當前第34頁\共有75頁\編于星期二\16點⑴精密度初步試驗正常值和高值混合血清各重復(fù)測定20次，計算均值，標準差（s），變異系數(shù)（CV%）。結(jié)果如下。正常值混合血清：x=71.0g/L，s=1.30g/L，CV=1.81%。高值混合血清：x=96.5g/L，s=1.36g/L，CV=1.42%。當前第35頁\共有75頁\編于星期二\16點⑵精密度正式試驗①測定：取上述2個混合血清，每日測定2次（2次間隔>2h），每次測定均作雙份，連續(xù)20天。每次測定均同時做質(zhì)控。②離群點檢查：如每次雙份測定的差值超過初步精密度測定時±標準差的5.5倍（是99.99%的上限值），這對數(shù)據(jù)為“離群點”，棄去并重新補做。當前第36頁\共有75頁\編于星期二\16點③統(tǒng)計分析：所得數(shù)據(jù)按文獻[1]計算均值，標準差（s），變異系數(shù)（CV%）。包括批內(nèi)CV，批間CV，日間CV和總CV（表1，2）。④結(jié)果判斷：按照國內(nèi)或國際上權(quán)威機構(gòu)公布的精密度指標判斷精密度試驗結(jié)果的可接受性。如果自建系統(tǒng)的精密度不可接受，則要查找原因，必要時更換檢測系統(tǒng)。當前第37頁\共有75頁\編于星期二\16點表1精密度試驗計算表（正常值混合血清）當前第38頁\共有75頁\編于星期二\16點正常值混合血清：日平均均值=70.1 S日間(B)=2.32，CV日間=B/日平均均值×100%=3.32% S批間(A)=(E/2n)1/2=1.65，CV批間=A/日平均均值×100%=2.35% S批內(nèi)(F)=((C+D)/4n)1/2=1.39 CV批內(nèi)=F/日平均均值×100%=1.99% S總(G)=(B2+A2+F2)1/2=3.17 CV總=G/日平均均值×100%=4.52% 總CV4.52%，低于IFCC規(guī)定的CV≤5%的標準。當前第39頁\共有75頁\編于星期二\16點表2精密度試驗計算表（高值混合血清）當前第40頁\共有75頁\編于星期二\16點高值混合血清：

日平均均值=91.1S日間(B)=1.57，CV日間=B/日平均均值×100%=1.72%S批間(A)=(E/2n)1/2=0.87，CV批間=A/日平均均值×100%=0.96%S批內(nèi)(F)=((C+D)/4n)1/2=1.12，CV批內(nèi)=F/日平均均值×100%=1.23%S總(G）=（B2+A2+F2）1/2=2.12 CV總=G/日平均均值×100%=2.33%總CV2.33%，低于IFCC規(guī)定的CV≤5%的標準。

當前第41頁\共有75頁\編于星期二\16點精密度好，準確度如何？是B還是C？當前第42頁\共有75頁\編于星期二\16點2.與參考方法或目標系統(tǒng)比對，實現(xiàn)自建檢測系統(tǒng)的量值溯源當前第43頁\共有75頁\編于星期二\16點溯源性ISO15189：醫(yī)學(xué)實驗室-質(zhì)量和能力的專用要求

“通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結(jié)果或測量標準的值能夠與規(guī)定的參考標準，通常是與國家標準或國際標準聯(lián)系起來的特性”。當前第44頁\共有75頁\編于星期二\16點自建系統(tǒng)與目標系統(tǒng)比對與量值溯源鏈當前第45頁\共有75頁\編于星期二\16點比較方法。應(yīng)是參考方法或推薦方法，如果該項目沒有參考方法或推薦方法，也可用公認的常規(guī)方法。但須具備：①比試驗方法有更好的精密度。②干擾影響已知。③與試驗方法使用相同的計量單位。目標系統(tǒng)。性能良好的固定檢測系統(tǒng)或室內(nèi)質(zhì)控（IQC）和長期室間質(zhì)評（EQA）成績合格的檢測系統(tǒng)，可作為比對的目標系統(tǒng)。

⑴比較方法和目標系統(tǒng)當前第46頁\共有75頁\編于星期二\16點⑵實驗標本每天收集不同濃度的新鮮血清8份，連續(xù)收集5天以上，濃度范圍盡可能覆蓋該項目的測量范圍，且參考值范圍以外的標本盡可能在50%以上。各濃度標本數(shù)量的按排可參閱表3。當前第47頁\共有75頁\編于星期二\16點表3方法比較中分析物濃度水平當前第48頁\共有75頁\編于星期二\16點⑶實驗方法每天用兩種方法分別測定8個標本，每個標本測定2次。第1次按1→8，第2次按8→1的順序，共測定5天，各獲得80個數(shù)據(jù)。當前第49頁\共有75頁\編于星期二\16點舉例：NCCLS(EP9-A2)文件2.3方法比較步驟(以淀粉酶測定為例)2.3.1樣品大小至少為40個標本,每個標本用2種方法分別作雙份測定,因此樣本應(yīng)有足夠的量,如臨床標本的量太少可將2份含量相近的標本混合。2.3.2每天測定8個標本,雙份測定時第一次按順序1,2..7,8,第二次8,7..2,1,共測5天,將數(shù)據(jù)整理成表4。當前第50頁\共有75頁\編于星期二\16點表4

淀粉酶測定試驗方法(Y)與BM試劑(X)比較(U/L)

試驗方法 比較方法試驗方法比較方法樣品 結(jié)果1 結(jié)果2結(jié)果1結(jié)果2 結(jié)果1-2結(jié)果1-2

1 1792 179516721676 3 42 1755 175115611562 4 13 1598 1595148014833 3..38 353639401 139727579 78 3 140 545258 55 2 3當前第51頁\共有75頁\編于星期二\16點⑷離群值檢查方法內(nèi)離群值的檢查：計算每個標本重復(fù)測定值間的絕對差值、每個標本測定值的均值，以平均絕對差值的4倍為限，超出限值即為離群點。（表5）方法間離群值的檢查：計算兩方法間成對結(jié)果的絕對差值及其平均值，以平均絕對差值的4倍為限，超出限值即為離群點。（表6）當前第52頁\共有75頁\編于星期二\16點表5方法內(nèi)復(fù)測結(jié)果離群值檢查Xi1=1672Xi2=1676 Yi1=1792Yi2=1795DXi=︱xi1-xi2︱=︱1672-1676︱=4,X1=(Xi1+Xi2)/2=1674DYi=︱Yi1-Yi2︱=︱1792-1795︱=3,Y1=(Yi1+Yi2)/2=1793.5DXi’=DXi/Xi=4/1674=0.00239DYi’=DYi/Yi=3/1793.5=0.00167同樣:I Xi1Xi2Yi1Yi2DXiDYiDXi’DYi’1 167216761792 1795430.00239 0.001672 15611562 1755 1751140.00511 0.002283 14801483 1598 1595330.00202 0.00202..38 394035 36 110.0253 0.028239 7978 72 75 130.0127 0.038240 5655 54 52 120.0180 0.0377當前第53頁\共有75頁\編于星期二\16點DX=2.75,控制限值=4×DX=4×2.75=11進位制=11DY=2.875,控制限值=4×DY=4×2.875=11.5進位制=12DX’=0.00698控制限值=4×DX’=0.0288DY’=0.0105

控制限值=4×DY’=0.0420

本例方法內(nèi)未發(fā)現(xiàn)離群點。當前第54頁\共有75頁\編于星期二\16點表6方法間離群點檢查Xi1=1672 Xi2=1676 Yi1=1792 Yi2=1795Ei1=︱Yi1-Xi1︱=︱1792-1672︱=120Ei2=︱Yi2-Xi2︱=︱1795-1676︱=119Ei1’=Ei1/Xi1=120/1672=0.0718Ei2’=Ei2/Xi2=119/1676=0.0710同樣：I Ei1Ei2 Ei1’ Ei2’1 120119 0.0718 0.07102 185*189* 0.1180 0.12103 118112 0.0797 0.0755.3844 0.1030 0.10003973 0.0886 0.03854023 0.0357 0.0545當前第55頁\共有75頁\編于星期二\16點

402E=1/80∑∑Eij=1/80×3359=41.99I=1j=1E的控制限值=4×E=4×41.99=167.96進位=168

402E’=1/80∑∑E’ij=1/80×4.831=0.0604

I=1j=1E’的控制限值=4×E’=0.2416本例方法間出現(xiàn)2個離群點當前第56頁\共有75頁\編于星期二\16點⑸實驗數(shù)據(jù)的可接受性判斷兩種方法的相關(guān)性分析：①計算回歸方程

y（自建）=a+bx（比對）②計算相關(guān)系數(shù)（r）和決定系數(shù)（r2）。

當前第57頁\共有75頁\編于星期二\16點③相關(guān)系數(shù)r≥0.975或決定系數(shù)r2≥0.95，說明實驗數(shù)據(jù)范圍合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠。④相關(guān)系數(shù)r<0.975或決定系數(shù)r2<0.95，說明自建系統(tǒng)方法精密度差或?qū)嶒灁?shù)據(jù)范圍不合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距不可靠，需改進方法的精密度或擴大濃度范圍。當前第58頁\共有75頁\編于星期二\16點⑹臨床可接受性判斷①計算方法間的系統(tǒng)誤差：將各個項目的醫(yī)學(xué)決定水平濃度（Xc）代入回歸方程，計算Y與X之間的系統(tǒng)誤差（SE）。SE=∣Y－X∣②計算相對偏差（SE%）=（SE/Xc）×100%當前第59頁\共有75頁\編于星期二\16點③以方法學(xué)比較評估的SE%≤1/2美國臨床醫(yī)學(xué)檢驗部門修正法案（CLIA’88）能力比對檢驗的分析質(zhì)量要求允許總誤差（TEa）為臨床可接受水平，判斷自建系統(tǒng)與目標系統(tǒng)檢驗結(jié)果的可比性。淀粉酶測定的最大允許誤差（TEa）=靶值±30%（附錄）。SE%≤15%即為臨床可接受。當前第60頁\共有75頁\編于星期二\16點④自建系統(tǒng)與比對方法或目標系統(tǒng)的檢驗結(jié)果有可比性，即認為自建檢測系統(tǒng)為有效的檢測系統(tǒng)。其檢測結(jié)果具有量值溯源性。當前第61頁\共有75頁\編于星期二\16點⑤如果自建系統(tǒng)與目標系統(tǒng)檢驗結(jié)果不具可比性，則應(yīng)依據(jù)NCCLSEP15-A文件[7]對自建系統(tǒng)進行校準驗證和溯源性確認。當前第62頁\共有75頁\編于星期二\16點3.自建系統(tǒng)的校準驗證和溯源性確認當前第63頁\共有75頁\編于星期二\16點采用新鮮血清賦值傳遞的方法，是實現(xiàn)自建系統(tǒng)與目標系統(tǒng)檢測結(jié)果一致性的有效途徑。用目標系統(tǒng)先給新鮮血清定值，再賦值給商品校準物（日常校準品），解決了自建系統(tǒng)的校準溯源性問題。由于商品血清校準物存在“基質(zhì)效應(yīng)”，新鮮血清不存在基質(zhì)效應(yīng)但不易儲存，二者結(jié)合應(yīng)用可克服缺陷，優(yōu)勢互補。當前第64頁\共有75頁\編于星期二\16點⑴自建檢測系統(tǒng)的校準當前第65頁\共有75頁\編于星期二\16點⑵校準驗證和溯源性確認①選取由低到高系列濃度患者新鮮血清5～6份，濃度覆蓋整個測量范圍；②分別在自建系統(tǒng)和目標系統(tǒng)上重復(fù)測定2次，求平均值；③進行相關(guān)與回歸分析，若回歸線性相關(guān)系數(shù)（r）≥0.975，斜率（b）與1差異無統(tǒng)計學(xué)意義，截距（a）與0差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明相關(guān)性良好。④將醫(yī)學(xué)決定水平值代入回歸方程，計算各點校準驗證值。若校準驗證的相對偏差（SE%）≤1/4CLIA’88允許總誤差（TEa），說明校準成功，結(jié)果具有溯源性。否則重新校準。當前第66頁\共有75頁\編于星期二\16點4.用室內(nèi)質(zhì)控（IQC）和室間質(zhì)評（EQA）相結(jié)合的方法驗證自建系統(tǒng)的量值溯源性當前第67頁\共有75頁\編于星期二\16點⑴

室內(nèi)質(zhì)控（IQC）主要控制測定的隨機誤差（精密度）是A還是B或C?當前第68頁\共有75頁\編于星期二\16點室內(nèi)質(zhì)控（IQC）①質(zhì)控物：選取與人血清基質(zhì)相同的質(zhì)控品，要求性能穩(wěn)定、有效期1年以上且瓶間變異小。②確定靶值與標準差：當實測標準差（s）≤1/4CLIA’88TEa（附錄1，2）時，以實測標準差為質(zhì)控圖的標準差。當實測標準