我課間檢導(dǎo)論病毒感染與免疫

一、病毒的變異現(xiàn)象（一）毒力變異（virulent

variation）（二）抗原性變異(antigenic

variation)（三）宿主范圍變異：宿主范圍突變株：由于病毒基因組改變影響了對宿主細胞的感染范圍，可感染野生型病毒不能感染的細胞，也可利用其特性制備疫苗。1第四節(jié) 病毒的遺傳和變異（四）條件致死性突變：條件致死性突變株在某種條件下能夠增殖，而在另種條件下不能增殖的病毒株。溫度敏感突變（五）耐藥突變株(drug-resistant

mutant)

：因編碼病毒酶基因的改變而降低了靶酶對藥物的親和力或作用，從而使病毒對藥物不敏感而能繼續(xù)增殖。2二、病毒變異機制3（一）突變（二）基因重組與重配基因重組：兩種有不同生物學(xué)性狀而有親緣關(guān)系的病毒在感染同一細胞時，病毒之間發(fā)生基因的交換而形成子代的過程。重配：通過交換RNA節(jié)段而進行重組。交叉4隨機5（三）整合：病毒基因組與細胞基因組（四）病毒非基因組變異所致的表型改變互補、表型混合、核殼轉(zhuǎn)移6第五節(jié)病毒的感染與免疫病毒的傳播方式一、水平傳播病毒在人群不同個體間的傳播病毒侵入機體的三大重要門戶皮膚呼吸道消化道7二、垂直傳播通過胎盤或產(chǎn)道，病毒由母親傳給胎兒的方式胎盤

產(chǎn)道8（一）病毒對宿主細胞的直接作用1．溶細胞效應(yīng)（cytocidal

effect）病毒在細胞內(nèi)復(fù)制成熟，并于很短時間內(nèi)大量增殖，引起細胞裂解，釋放出病毒，在普通顯微鏡下可見到明顯的細胞病變（cytopathic

effect,CPE），正常細胞9CPE細胞病毒的致病機制2．穩(wěn)定狀態(tài)感染（steady

state

infection）10有些病毒在細胞內(nèi)增殖不引起細胞溶解死亡，也不阻礙細胞代謝，呈穩(wěn)定狀態(tài)感染，稱為非溶解細胞病毒。所引起的感染稱為穩(wěn)定狀態(tài)感染。細胞融合（cell

fusion）細胞膜出現(xiàn)新抗原(new

antigen

presented

in

cell

membrane)3．細胞凋亡（cell

apoptosis）細胞基因自身指令發(fā)生的一種程序性死亡。4．包涵體的形成有些病毒感染的細胞在顯微鏡下可觀察到胞質(zhì)或核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性，圓/橢圓形/不規(guī)則形狀的團塊結(jié)構(gòu)，大小、數(shù)目不等，稱為包涵體（inclusion）

。5．細胞轉(zhuǎn)化增生6．病毒基因的整合：病毒DNA或RNA的互補DNA整合入細胞染色體上或以質(zhì)粒形式存在于細胞質(zhì)中，稱整合感染通過兩種方式整合入宿主細胞11免疫病理損傷及對免疫系統(tǒng)的影響體液免疫、細胞免疫的損傷作用循環(huán)-免疫復(fù)合物引起的損傷自身免疫應(yīng)答引起的損傷抗體增強病毒感染作用12（二）病毒感染引起的機體變化感染的類型向外播散病毒機體獲得特異性免疫隱性感染顯性感染慢性感染

潛伏感染

慢發(fā)病毒感染13急性感染持續(xù)性感染↙

↓↘顯性感染（apparent

infection）14病毒感染后，患者出現(xiàn)明顯的臨床癥狀 可表現(xiàn)為局部和全身感染；急性感染：潛伏期短，發(fā)病急，病程短，恢復(fù)后 病毒被徹底清除，機體獲得免疫力。如流感，甲肝等。持續(xù)性感染（persistent

infection）：病毒在體內(nèi)持續(xù)存在幾個月,幾年,幾十年，甚至終身攜帶，經(jīng)常/反復(fù)有病毒排除體外，但缺乏持續(xù)性的臨床表現(xiàn)。慢性感染（chronic

infection）15顯性、隱性感染后，病毒未完全清除，持續(xù)存在血液或組織中，處于持續(xù)增殖狀態(tài)，并不斷排出體外。臨床癥狀可有、可無。病程長（數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十年），病毒慢性進行性損傷機體，并能檢出病毒的存在。病程長病毒可檢出如HBV潛伏感染（latent

infection）顯、隱性感染后，病毒存在于一定組織或細胞內(nèi)，不產(chǎn)生感染性病毒體。在某些條件下，病毒基因

被激活而急性發(fā)作，增殖出病毒顆粒，出現(xiàn)顯性

感染?？煞磸?fù)激活，急性發(fā)作，病毒只有在急性發(fā)作時才被檢出。如HSV、VZV慢發(fā)病毒感染（slow

virus

infection）16又稱遲發(fā)病毒感染（delay

infection）;

病毒感染后，在機體內(nèi)經(jīng)過長期潛伏(數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十年)后，出現(xiàn)慢性進行性疾病，最終導(dǎo)致死亡;常見病毒引起：HIV→

AIDS;麻疹病毒→亞急性硬化性全腦炎（SSPE）非常見病毒/待定致病因子引起：朊?！虬W疫(scrapie)，庫魯病(Kulu)等抗病毒免疫17一、非特異性免疫1、屏障作用2、巨噬細胞的作用3、干擾素——獲得性非特異性免疫干擾素18定義：由病毒或其他干擾素誘生劑刺激機體細胞所產(chǎn)生的一種具有多種生物學(xué)作用的糖蛋白種類：IFN類型主要來源特點I型αIFN人WBC抑制病毒作用I>IIβIFN人成纖維CII型γIFNTC免疫調(diào)節(jié)作用II>I作用機理

不是直接殺滅病毒IFN→細胞基因→抗病毒蛋白(蛋白激酶,磷酸二脂酶,2’-5’腺嘌呤核苷合成)↓降解病毒mRNA抑制病毒蛋白合成抑制病毒組裝、釋放↓抑制病毒復(fù)制↓中斷病毒感染；限制病毒擴散19生物學(xué)活性:廣譜的抗病毒作用；抑制病毒感染、阻止病毒在體內(nèi)擴散、促進痊愈;調(diào)節(jié)免疫功能；抑制腫瘤細胞生長；IFN作用特點:產(chǎn)生早；中斷受染細胞的病毒感染，限制病毒擴散；IFN誘導(dǎo)的抗病毒蛋白，只對病毒起作用，不影響宿主細胞蛋白質(zhì)合成。20二、特異性免疫細胞免疫：體液免疫：按種類：IgG

IgM

IgA按功能：中和抗體、補體結(jié)合抗體、血凝抑制抗體中和抗體：定義、機理和免疫球蛋白的類型抗病毒免疫的主要成分TD、TC

、NK、M21理化因素對病毒的影響22溫度：大多病毒耐冷不耐熱，但有例外的，如HBV等pH：病毒在pH5.0以下或pH9.0以上迅速滅活射線：γ射線，χ射線，紫外線多能使病毒滅活氧化劑，鹵素及其他化合物有滅活病毒的功能酚類可除去病毒衣殼蛋白

脂溶劑可破壞有包膜的病毒甲醛可破壞對病毒的感染性而對抗原性影響不大23組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng)細胞培養(yǎng)原代細胞培養(yǎng)

二倍體細胞培養(yǎng)傳代細胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法（三）病毒的培養(yǎng)方法動物接種雞胚接種（三）病毒的培養(yǎng)方法25動物接種優(yōu)點：體外培養(yǎng)生長緩慢的嗜神經(jīng)V、方法簡便缺點：動物可能攜帶V（需要認證實驗動物） 飼養(yǎng)工作量大。實驗動物：小/大鼠，豚鼠，兔，猴等。接種途徑：鼻內(nèi),皮內(nèi),皮下,腦內(nèi),腹腔,靜脈等。雞胚接種一般9-14天的雞胚。優(yōu)點：本身不帶V；易管理；接種簡便。缺點：不易大量制備病毒；接種部位尿囊腔、羊膜腔流感V、腮腺炎V卵黃囊流行性乙型腦炎V26組織培養(yǎng)27定義：將離體活組織塊/器官/分散的 活細胞，給予適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)條件， 使其在體外繼續(xù)生存或增殖，統(tǒng)稱為組織培養(yǎng)。器官培養(yǎng)、移植培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)28分散的活細胞在體外培養(yǎng)。用途：分離培養(yǎng)V；制備疫苗；研究V與C相互作用；檢測中和Ab；包括：原代細胞培養(yǎng)；傳代細胞培養(yǎng)：二倍體細胞株傳代細胞系:病毒感染的診斷與防治原則29一.病毒感染的診斷：1.標(biāo)本的采集、送檢:原則：盡早采取部位適宜冷藏速送：冰塊或干冰50%的甘油緩沖鹽水抗生素雙份血清標(biāo)本：急性期、恢復(fù)期雙份血清檢驗標(biāo)本→殺滅雜菌

(青鏈霉素)接種動物接種→出現(xiàn)病狀

雞胚接種→病變或死亡細胞培養(yǎng)→細胞病變鑒定病毒種型302.

方法:病毒分離的一般程序：（1）V分離培養(yǎng)與鑒定：V分離培養(yǎng)方法：細胞培養(yǎng)、動物接種、雞胚接種鑒定方法：CPE、血吸附現(xiàn)象、用已知Ab檢測V-Ag顯微鏡：特征性的包涵體電鏡：直接觀察V顆粒。HRVSARS-CoV31病毒抗原、特異性抗體的檢查檢測患者Ab；已知Ag：V裂解Ag、基因工程抗原等；被檢Ab：IgM--早期診斷；IgG--雙份血清Ab效價≥或≤4倍；方法